抗C1q抗體在狼瘡腎炎血清中的表達及臨床價值

周 倩 陳 曦

（綿陽市中心醫院，四川綿陽 621000）

系統性紅斑狼瘡（system lupus erythematosus，SLE）是一種病因尚不明確、以多種器官受累伴自身抗體形成的自身免疫性疾病，其臨床表現主要為發熱、面部出現明顯紅斑、多形性皮疹、多發性口腔潰瘍、關節炎以及中樞神經系統癥狀等[1]。腎臟是SLE 最為常見的累及器官之一，而狼瘡腎炎也是SLE 較為常見的一種并發癥，臨床發病率高達60%～87%，已經成為影響SLE 預后的主要危險因素之一。C1q 抗體是一種固有免疫補體經典途徑的始動因子補體1（C1）的組成成分，是補體C1 的第一組分的首個反應亞基[2]。抗C1q 抗體與C1q 特異性結合后形成免疫復合物，激活補體系統及消耗大量補體，進而造成腎小球的損傷及系膜濾過功能異常，最終導致蛋白尿和管型的發生。為了進一步明確抗C1q 抗體在狼瘡腎炎中的鑒別反映能力，了解抗C1q 抗體的工作效能，本研究以綿陽市中心醫院收治的68 例系統性紅斑狼瘡患者、同期健康體檢者及自身免疫疾病者進行對比研究，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取綿陽市中心醫院2018 年11 月至2019 年6 月收治的68 例狼瘡患者作為研究對象并設為觀察組，其 中 男 性10 例，女 性58 例；年 齡23 ～47 歲，平均年齡（32.1±1.8） 歲；病程1 個月～12 年，平均病程（36.5±6.5） 月；病理分型：Ⅱ型+Ⅲ型24 例，Ⅳ型29 例，Ⅴ型15 例。選取同期自身免疫疾病者68 例設為疾病對照組，其中男性13 例，女性55 例；年齡21 ～44 歲，平均年齡（31.8±2.2）歲。再選取同期健康體檢者68 例，其中男性15 例，女性53 例；年齡20 ～42 歲，平均年齡（31.5±2.5）歲。三組受檢者的性別構成比、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義，（P ＞0.05），具有可比性。納入標準：所有患者均符合《2010 年中國系統性紅斑狼瘡診斷與治療指南解讀》的診斷標準[3]；均處于狼瘡腎炎的活動期。排除標準：原發性、繼發性急性或慢性腎臟疾病者；既往自身免疫系統疾病者、痛風者等。

1.2 儀器和試劑

酶標儀采用德國Roche 全自動生化免疫分析儀Cobas8000 儀，抗C1q 抗體試劑盒來自上海北加生化試劑有限公司。

1.3 方法

抗C1q 抗體采用免疫透射比濁法進行檢測。抽取三組受檢者外周靜脈血約3 ～5 mL，以轉速3 000轉/分～4 000 轉/分進行離心約10 ～15 min，快速分離血清后冷凍于-80℃冰箱內保存。首先，將待檢測的樣品用磷酸稀釋液以1 ∶100 進行稀釋，在已經包被C1q 抗原的微滴定板上，分別放入稀釋后的100μL 樣品稀釋液，標準液和質控血清，在室溫條件下進行孵育約30 min，而后用沖洗液約300μL×3 洗滌除去無用成分。其次，再向其中分別加入酶標液100μL，室溫條件下孵育約30 min，再次用300μL×3 沖洗液洗滌除去無用成分。再者，加入顯色底物約100μL，室溫黑暗狀態下孵育約30 min，最后，加入終止液，再次室溫條件下進行孵育15 min 后，在酶標儀中進行比色。樣品顏色的深淺與抗C1q 抗體水平呈正相關，數值不小于20 U/mL 表示抗C1q 抗體檢測結果呈陽性，否則為陰性。

1.4 統計學分析

數據均采用SPSS 20.0 統計學軟件進行分析，兩組或多組間的抗C1q 抗體陽性率采用四格表的χ2檢驗，不同病理類型的抗C1q 抗體水平比較采用t 檢驗，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清抗C1q 抗體在三組受檢者中的陽性率比較

觀察組血清抗C1q 抗體檢測陽性35 例，陽性率為51.47%；疾病對照組血清抗C1q 抗體檢測陽性5 例，陽性率為7.35%；健康對照組血清抗C1q 抗體檢測陽性0 例，陽性率為0.00%。觀察組的血清抗C1q 抗體檢測陽性率明顯高于疾病對照組（χ2=47.013，P=0.000）和健康對照組（χ2=68.456，P=0.000）。

2.2 不同病理類型系統性紅斑狼瘡患者血清抗C1q 抗體陽性率比較

系統性紅斑狼瘡腎炎IV 型的抗C1q 抗體陽性率相對高于Ⅱ型+Ⅲ型及Ⅴ型的抗C1q 抗體陽性率，差異有統計學意義（P ＜0.05），見表1。

3 討論

狼瘡屬于一種自身免疫性疾病，其發生發展多與細胞的凋亡和補體的激活系統相關。在細胞凋亡的過程中，核小體、核酸及蛋白等多種亞細胞成分作為機體免疫的刺激性抗原，誘導體內產生大量自身抗體和免疫復合物，從而導致全身多種器官受累，而腎臟是SLE 最主要的受累器官之一。文獻報道[4]，SLE 患者并發腎炎是導致其死亡的主要原因之一，早診斷、早發現對于患者的治療意義重大。

表1 不同病理類型系統性紅斑狼瘡患者血清抗C1q 抗體陽性率比較[例（%）]

補體C1q 的構型是由六個亞單位組成的對稱六聚體，也是構成補體C1 的主要成分之一。當免疫球蛋白（IgM）或人體免疫球蛋白G（IgG）的Fc 段與兩個以上的C1q 相結合時，C1q 就會相應地發生構型上的變化，從而激活C1r和C1s，進而引發補體經典激活系統，加強吞噬細胞的清除作用，加速清除額外的免疫復合物，并進一步發揮免疫調節作用和參與后續的炎性反應。抗C1q 抗體是補體 C1q 抗原決定簇膠原樣區域暴露，刺激機體產生自身免疫應答，其機制十分復雜，至今尚無明確的結論。近年來的大量研究顯示[5]，血清抗C1q 抗體與系統性紅斑狼瘡腎臟的受損具有較為密切的聯系，可以作為判斷系統性紅斑狼瘡的活動性實驗指標。

本研究結果顯示，觀察組血清中抗 C1q 抗體的陽性率為51.47%，高于疾病對照組7.35%和健康對照組0.00%，差異有統計學意義（P ＜0.05）。推測原因可能是系統性紅斑狼瘡患者身體中的大量補體被激活，C1q 的水平增多，進而導致抗原決定簇膠原樣區域大量暴露，使抗C1q 抗體增多。增多的C1q 抗體與體內的補體C1q 相結合，阻礙了正常的補體激活，導致體內免疫復合物的清除速度達不到要求，由此沉積下來的循環免疫復合物增多，血清中補體C1q 的水平降低。再者，C1q 抗體能夠導致補體C1q 與免疫復合物相互聚集，進而與腎小球基底膜的陰離子蛋白大量結合并沉積在腎臟中，加重腎臟的損害。此外，抗C1q抗體對于抑制C1q 清除自身抗原也發揮了一定程度的作用。

本研究結果顯示，IV 型系統性紅斑狼瘡腎炎的抗C1q抗體陽性率為72.41%，明顯高于Ⅴ型40.00%和Ⅱ型+Ⅲ型33.33%（P ＜0.05）。IV 型系統性紅斑狼瘡腎炎為彌漫增生型，其病變較為嚴重且廣泛存在，在光鏡下可以看到幾乎所有的腎小球有不同程度的損害，且系膜細胞和內皮細胞嚴重增生，細胞核破碎的現象也相對較為明顯。任沭麗等[6]的研究指出，抗C1q 抗體在一定程度上反映了腎臟的病理改變，而IV 型的臨床癥狀相對較為嚴重，其陽性率為77.8%，特異性為81.5%。張彥平等[7]的研究顯示，Ⅳ型系統性紅斑狼瘡的陽性率為68.8%，Ⅱ型+Ⅲ型為23.5%，Ⅳ型高于Ⅱ型+Ⅲ型。另有研究顯示[8]，經過免疫熒光檢查，Ⅳ型系統性紅斑狼瘡患者腎小球的區域內IgG、IgM、IgA、C1q 等均呈現顆粒狀沉積滿堂亮的現象。

綜上所述，系統性紅斑狼瘡的發生發展較為復雜，多種器官受累是其主要的臨床表現，其中腎臟受累是較為常見的臨床癥狀。狼瘡腎炎患者機體的抗C1q 抗體表達相對較高，抗C1q 抗體的檢測在一定條件下可以反映系統性紅斑狼瘡疾病的活動性，有效指導臨床區分其病理分型，特別是對于彌漫增殖型系統性紅斑狼瘡（Ⅳ型）。動態監測患者治療前后抗C1q 抗體水平的變化可以在一定程度上為臨床系統性紅斑狼瘡腎炎的治療提供重要的參考。