探究全自動血細胞分析儀在血常規檢驗中的應用價值

呂丹

血常規是一種通過觀察血細胞形態分布、數量變化等判定疾病的方法,是實驗室檢驗的重要項目。以往血常規多通過血涂片顯微鏡細胞形態學檢查,但對檢驗人員的要求較高,如操作不當或血涂片制備不合格均會導致誤差,影響疾病的診斷結果［1,2］。隨著檢驗儀器的快速發展,全自動血細胞分析儀因精確度高、檢測速度快、操作簡單的優勢被廣泛用于血常規檢查中［3］。但全自動血細胞分析儀檢測血常規也存在誤差現象。為進一步探究其應用價值,本研究對復檢血常規標本分別進行全自動血細胞分析儀檢驗、涂片鏡檢檢測,以便探究全自動血細胞分析儀在血常規檢驗中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年8月～2019年7月本院檢驗科1712 份患者的血常規標本資料,均經血細胞全自動血細胞分析儀檢測,符合血細胞形態學復檢標準的共878 份,其中男488 份,女390 份；年齡7～82 歲,平均年齡(58.57±20.46)歲。以上患者均符合此次研究標準。患者均對本次研究目的知悉,且自愿參加,并簽署相關知情同意書。此次研究已通過本院倫理委員會審核批準。

1.2 方法 878 份患者的血常規標本均行全自動血細胞分析儀和涂片鏡檢檢測。

1.2.1 儀器與設備 全自動血細胞分析儀(sysmex型)；雙目顯微鏡(O 淋巴細胞mpusCX22)；瑞士染色液購自杭州濱河微生物試劑有限公司；乙二胺四乙酸二鉀真空抗凝管(貝斯特,EDTA-K2型)。

1.2.2 檢測方法 抽取患者靜脈血2 ml,均勻搖晃且靜置1 h 后,在室溫下由同一位經驗豐富的檢驗醫師完成全自動血細胞分析儀檢測,并進行瑞氏染色液染色。染色方法如下：將厚薄均勻、頭體尾明顯的干燥血涂片標本用蠟筆在兩頭劃線,滴瑞氏染液4～5 滴,固定1 min 后以1：(1～2)的比份加緩沖液,吹均勻后染色5 min,沖洗、晾干。在顯微鏡下觀察細胞的形態、數量、大小、分類等。為減少結果變異的發生,所有標本檢測和復查均在5 d 內完成。

1.3 檢測標準

1.3.1 標本復檢標準［4］白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血小板(PLT)至少存在一項減少,或RBC 增加但全自動血細胞分析儀無報警提示,PLT＜50×109/L或＞350×109/L,WBC＜2.5×109/L 或＞15×109/L；或WBC分類存在異常者；或血紅蛋白(Hb)濃度＞160 g/L 或＜60 g/L,平均RBC 體積＞100 fl 或＜70 fl；中性粒細胞＞0.85；嗜酸粒細胞＞0.10；嗜堿粒細胞＞0.10；淋巴細胞＞0.60；單核細胞＞0.15。

1.3.2 鏡檢陽性標準 RBC 形態學、PLT、有核紅細胞改變幅度為重度以上,WBC 檢驗和分類結果一致,可見未成熟粒細胞、異型淋巴細胞、血小板聚集、細胞核左移、原始細胞,可見血液寄生蟲、中毒顆粒等異常。

1.4 觀察指標 比較全自動血細胞分析儀和涂片鏡檢檢測的血常規結果,包括中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、幼稚細胞/核左移、原始細胞/異型淋巴細胞檢出率及血常規異常標本總檢出率。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行數據統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

復查878 份血常規異常標本中,其中中性粒細胞427 份,全自動血細胞分析儀檢出率為100.00%,涂片鏡檢檢出率為99.30%；嗜酸粒細胞84 份,全自動血細胞分析儀檢出率為83 份(98.81%),涂片鏡檢檢出率為92.86%；嗜堿粒細胞56 份,全自動血細胞分析儀檢出率為96.43%,涂片鏡檢檢出率為87.50%；淋巴細胞167 份,全自動血細胞分析儀檢出率為95.81%,涂片鏡檢檢出率96.41%；單核細胞56 份,全自動血細胞分析儀檢出率為89.29%,涂片鏡檢檢出率為100.00%；原始細胞/異型淋巴細胞42 份,全自動血細胞分析儀檢出率為80.95%,涂片鏡檢檢出率為97.62%；幼稚細胞/核左移46 份,全自動血細胞分析儀檢出率為82.61%,涂片鏡檢檢出率為95.65%；全自動血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞的檢出率與涂片鏡檢比較,差異無統計學意義(P＞0.05)；全自動血細胞分析儀對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移檢出率低于涂片鏡檢,差異有統計學意義(P＜0.05)。全自動血細胞分析儀血常規異常標本總檢出率為96.36%(846/878),涂片鏡檢總檢出率為96.81%(850/878),比較差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法的血常規結果比較［n(%)］

3 討論

不同疾病對應的血細胞形態變化也不一致。涂片鏡檢是血常規檢查的金標準,具有較高的準確度,適合用于各種血液病的初篩［5］。但涂片鏡檢的干擾因素較多,如血涂片制備厚薄不均、細胞分布不均、兩側未留有間隙；染色過酸或過堿；染色時間不適；檢驗人員技術不合格等均可能影響涂片鏡檢的準確度。此外,不同的檢驗人員對細胞的判斷存在誤差,也會在一定程度上影響疾病的判斷。早些年,中華醫學會檢驗分會根據國際血液學復查專家組成立的針對自動血細胞計數和白細胞計數的復檢標準,發布了41 條篩查規則。即使這樣,國內醫療機構仍然重視度不足。因此,應在常規臨床血液檢查中提高復檢率,以確認儀器檢查結果是否正確。應該針對有問題的標本進行描述性分析,以免對血液系統疾病造成漏診。血細胞形態分析是常規血液檢查的金標準。

隨著檢驗設備的快速發展,全自動血細胞分析儀被廣泛用于臨床血常規檢查中。該儀器用于血常規檢查中主要具備三種功能：白細胞計數及分類、紅細胞計數以及分類功能的拓展,包括造血干細胞計數、有核紅細胞觀察及計數、未成熟及幼稚粒細胞計數等。本研究結果顯示,全自動血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞的檢出率與涂片鏡檢比較,差異無統計學意義(P＞0.05)；全自動血細胞分析儀對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移檢出率低于涂片鏡檢,差異有統計學意義(P＜0.05)。全自動血細胞分析儀血常規異常標本總檢出率為96.36%(846/878),涂片鏡檢總檢出率為96.81%(850/878),比較差異無統計學意義(P＞0.05)。由此說明全自動血細胞分析儀在血常規中具有較高的應用價值,對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞等檢出率較高,對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移等分類效果較差,但必要時也可聯合涂片鏡檢,以便提高檢測準確率。分析原因在于,與以往的涂片鏡檢相比,全自動血細胞分析儀具有操作簡單、速度快、準確度高、重復性好的優勢。但全自動血細胞分析儀較難識別血細胞的形態,對血細胞形態、比例分析和觀察具有局限性,容易出現假陽、假陰情況,誤導疾病診斷。為了提高診斷的準確性,檢查人員在檢驗血樣前應預先校準儀器,以確保檢驗質量,并確保檢驗結果更可靠、更準確。同時還必須注意自動血細胞全自動血細胞分析儀和試劑的保存,以確保保存環境干燥,通風良好,以防止儀器受到無線電干擾或陽光直射的影響,并嚴格按照標準操作程序進行各種檢查操作［6］。

當患者發生細菌感染時中性粒細胞發生毒性、核象變化,胞質粗大、增多或有空泡、變性,但其他因素也可能引發白細胞假性增高。病毒感染以淋巴細胞增高為主,血紅蛋白含量、紅細胞形態、大小均可改變。全自動血細胞分析儀在正常血細胞形態的檢查中可計數成熟的白細胞、紅細胞、血小板。在相關研究中得知,儀器對于大紅細胞和小紅細胞的判讀較為準確,從直方圖中能夠直觀讀取。楊玉勤［7］的研究中得知,血液標本白細胞分類鏡檢中嗜酸性細胞、中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞具有較高符合率,嗜堿性細胞符合率較低。而有報警提示鏡檢陽性符合率為69.88%。因此,血細胞全自動血細胞分析儀對異常細胞報警提示靈敏度極高,具有較強的針對性,與鏡檢的符合度較高。邢瑩等［6］研究中,對外周血血細胞中白細胞復檢結果進行分析,發現全自動血細胞形態學數字圖像全自動血細胞分析儀對各種白細胞的分類、計數特異性較高,尤其是中性粒細胞中毒形態異常檢測敏感度可達100.00%,對原始細胞可達91.7%,對中性粒細胞分類計數異常敏感性達91.8%,淋巴細胞達88.5%,嗜酸粒細胞達78.9%,證明全自動血細胞分析儀在血常規中應用價值較高。但對于嚴重感染、白血病或其他病變者,血細胞形態會出現病理變化導致血異常,此時全自動血細胞分析儀無法準確對異變細胞計數、分類。而涂片鏡檢對此類細胞分類有明顯優勢,因此,臨床常將其與涂片鏡檢結合,從而降低誤診、漏診的發生。

綜上所述,全自動血細胞分析儀在血常規檢驗中具有較高的應用價值,但必要時也可聯合涂片鏡檢,以便提高檢測準確率。