成人Epstein-Barr 病毒感染患者的EB 病毒相關抗體、DNA及淋巴細胞亞群變化分析

馬志民，崔 萍，白偉娜

（北京京煤集團總醫院感染性疾病科 北京 102300）

Epstein-Barr 病毒（EB 病毒）為皰疹病毒家族中的一種，是一種噬人類B 淋巴細胞的DNA 病毒，是皰疹病毒科γ 皰疹病毒亞科，作為雙鏈DNA 病毒的一種，有泛嗜性特征。相關文獻提出，EB 病毒大約感染了全球近90%的人，它是引起呼吸道感染、腫瘤的常見病毒，多數表現是傳染性單核細胞增多癥，其特征是存在大量單個核細胞增生情況，主要是增殖、活化EBV 特異性CD8+細胞毒性T 細胞，最主要的傳播途徑為唾液傳播，初始感染部位為鼻咽與口咽部的上皮細胞[1]。成人在感染EB病毒后，表現差異性較大[2]，多數屬于潛伏性感染，在特定情況下，可以激活，會導致患者發現病毒血癥，會侵犯淋巴細胞，導致全身免疫性損傷發生。成人EB 病毒感染者可檢測到EB 病毒相關抗體。依據病程進展的不同，EB 病毒可分為急性感染、慢性感染等，其中急性感染多表現為呼吸道感染，一般預后良好，少數患者可發展為慢性感染甚至腫瘤，預后較差。基于此，本次研究EB 病毒感染患者的臨床特點及不同年齡層次實驗室指標變化，以充分掌握EB 病毒感染的特點。現報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年7 月—2021 年5 月北京京煤集團總醫院收治的751 例EB 病毒感染患者，其中男472 例，女279 例，年齡18 ～87 歲，平均年齡（55.67±2.74）歲，其中年齡18 ～59 歲的493 例中青年患者納入甲組，年齡≥60 歲的老年患者納入乙組。納入標準：①年齡≥18 歲；②EB 病毒DNA 檢測陽性，明確診斷為EB 病毒感染。排除標準：①排除臨床資料不完整者；②排除合并病毒性肝炎且處于急性期的患者。

1.2 方法

收集患者性別、年齡、合并基礎疾病等基本資料，并進行淋巴細胞亞群檢測、EB 病毒相關抗體檢測、EB 病毒DNA 檢測。

1.3 觀察指標

①淋巴細胞亞群檢測：采用邁瑞流式細胞分析儀，流式細胞法檢測不同T 淋巴細胞分類含量；②EB 病毒相關抗體：EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體，采用索靈LIAISON 分析儀以化學發光法進行檢測，所應用的試劑為配套EB 病毒抗體試劑盒；③EB病毒DNA：采用羅氏LightCycler cobas Z480 以實時定量PCR 法檢測EB 病毒DNA，檢測所應用試劑為圣湘EB病毒核酸定量檢測試劑盒。

1.4 統計學方法

采用SPSS 24.0 統計軟件分析本次的所有數據，計量資料用（± s）表示，組間采用t檢驗；計數資料用[n（%）]表示，組間采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 EB 病毒感染者伴隨癥狀分析

751 例EB 病毒感染患者中，有407 例患者伴隨發熱癥狀，占54.19%；有19.57%（147/751）存在淋巴結腫大；14.11%（106/751）存在脾腫大；10.79%（81/751）存在肝臟腫大；伴隨咽部充血者占8.26%（62/751），伴隨皮疹者占5.73%（43/751）。

2.2 中青年與老年EB 病毒感染者淋巴細胞亞群對比

甲組患者的B 淋巴細胞數絕對值、CD4+T 淋巴細胞數絕對值、T 淋巴細胞總數絕對值均較乙組顯著升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組患者NK 細胞數絕對值、CD8+T 淋巴細胞數絕對值水平比較差異均無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組EB 病毒感染者淋巴細胞亞群對比（± s）

表1 兩組EB 病毒感染者淋巴細胞亞群對比（± s）

組別甲組（n = 493） 乙組（n = 258）tP B 淋巴細胞計數415.45±14.52 308.62±17.61 88.841 ＜0.001 CD4+T 淋巴細胞計數851.55±22.15 416.82±34.56 209.096 ＜0.001總T 淋巴細胞計數1 394.93±43.49 1 042.55±36.32 111.387 ＜0.001 NK 細胞計數 374.79±20.83 363.40±19.371.9420.335 CD8+T 淋巴細胞計數754.17±36.87 729.54±39.820.9330.373

2.3 中青年與老年EB 病毒感染者EB 病毒抗體及DNA陽性情況對比

甲組患者的EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性率、EB 病毒DNA 陽性率分別為81.50%、16.84%、63.08%，乙組分別為79.84%、15.89%、62.79%的，兩組比較差異均無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 中青年與老年EB 病毒感染者EB 病毒抗體及DNA 陽性情況對比[n（%）]

3.討論

EB 病毒可以通過輸血、唾液傳播，是感染性疾病的一種，臨床應對其加強關注，分析得出，人體在感染B細胞之后，會導致T 細胞免疫反應，患者會發生全身免疫功能異常，尤其是細胞免疫功能異常。外周血的T 淋巴細胞的免疫紊亂較為嚴重，過度激活B 淋巴細胞，下降NK 細胞數量以及功能等，可以預示患者發生嚴重EB病毒感染疾病。所有T 細胞、效應T 細胞、輔助T 細胞的表面標志是CD3、CD4，CD4 細胞可以對分化以及增殖B 細胞、T 細胞以及其他免疫細胞產生促進作用，CD8 是抑制T 細胞、細胞毒T 細胞的表面標志。對EBV 感染的B 細胞進行清除期間，CD8 可以將重要作用發揮。分析得出，CD4/CD8 的比例失去平衡，會導致EBV 相關疾病發生。在活化EB 病毒之后，會將患者B 淋巴細胞以及T 淋巴細胞激活，會轉化T 細胞成為細胞毒性T 細胞，進一步累及患者肝臟，會導致肝臟轉化、攝取等情況發生嚴重功能障礙，加重疾病。對于EB 病毒感染患者來說，機體免疫改變顯著，大量產生細胞因子，會將NK 細胞等激活，大量產生病毒性T 淋巴細胞，可以將導致EB 病毒感染發生的B 淋巴細胞起到一定消滅作用，因為病毒感染，會對患者體內正常細胞免疫產生抑制，導致患者發生細胞免疫功能紊亂，導致免疫失衡。

EB 病毒感染往往具有長期持續潛伏感染的特點，在免疫抑制等外界某種因素刺激下，病毒可再次激活，隨著病毒的復制引發諸多臨床癥狀[3]。成人感染EB 病毒后，臨床表現往往具有顯著差異性，其中發熱為最常見的臨床癥狀，部分患者還可表現為肝脾腫大、淋巴結腫大、皮疹、咽部充血等，產生這些癥狀最主要的原因為機體首次感染后，EB 病毒在B 淋巴細胞中以潛伏形式持續存在，EB 病毒潛伏階段，可逃避機體免疫攻擊性反應，只有在某種因素刺激下，才會產生免疫反應，主導細胞為CD8+T 淋巴細胞，免疫反應發生后，被EB 病毒感染的系統、器官、細胞，均受到了免疫攻擊，導致患者出現臨床癥狀[4]。依據EB 病毒在機體的狀態不同分類，初次感染為急性原發性感染，主要表現是傳染性的單核細胞增多癥，病毒潛伏后的再次感染則稱為既往感染，主要表現為慢性活動性的EB 病毒發生感染，發展至既往感染階段，往往對機體器官的損傷作用較為明顯，部分患者還會發生相關惡性腫瘤。

肝功能損傷在EB 病毒感染患者中較為常見，其中約有0.85%的患者表現為不明原因的肝功能受損。對于EB病毒感染患者來說，若沒有肝臟損傷情況存在，沒有嚴重的機體免疫功能失衡情況發生，可以良好清除病毒，免疫能力可以有效獲取。但是，機體嚴重免疫失衡發生時，會激活補體系統，會大片壞死肝臟細胞，導致肝臟進一步損傷，機體下降免疫功能時，會導致自身免疫反應出現，不完全耐受情況誘發，將嚴重肝臟損傷形成。因此，若患者存在肝臟損傷，體內嚴重沉積免疫復合物，會進一步下降患者免疫功能，導致肝細胞壞死、凋亡。

以往EB 病毒的主要感染人群為兒童，但近年來成人感染病例逐年增多，多數以發熱為首發癥狀，并伴有白細胞及外周血內淋巴細胞數目的增加，部分患者還可出現異形淋巴細胞，EB 病毒感染無特異性，與其他類型病毒感染鑒別困難。基于此，本次研究針對我院收治的751 例成人EB 病毒感染患者展開了調查研究，并分析了EB 病毒感染的臨床特點，以為成人EB 病毒感染的早期診斷及干預提供依據。相關研究顯示：成人EB 病毒感染者中，男性的比例更高[5]，與本次調查結果基本相符，可能與多種原因導致免疫機能下降相關。成人EB 病毒感染患者臨床表現多無明顯的特異性，病毒入侵人體后，可在B 細胞內潛伏，一旦被激活，機體會產生免疫反應，免疫反應形成的抗體會攻擊EB 病毒感染的組織、器官，導致臨床癥狀的出現。本次調查研究中顯示：發熱、淋巴結腫大、脾腫大為EB 病毒感染最主要的臨床特征，分別占54.19%、19.57%、14.11%，此外，部分患者還可表現為咽部充血、皮疹等。進一步對比中青年與老年人群的淋巴細胞亞群發現，甲組患者的B 淋巴細胞計數、CD4+T 淋巴細胞計數、總T 淋巴細胞計數絕對值均較乙組顯著升高 （P＜0.05）。提示與老年人群比較，青中年人群的免疫反應相對更為活躍，免疫活動也更為強烈，但隨著年齡的增加，老年人群免疫功能減退，淋巴細胞亞群水平明顯降低。

相關研究顯示，EB 病毒感染是腫瘤、艾滋病等疾病發生以及發展的影響因素，很多學者認為，在人體B 淋巴細胞中潛伏EB 病毒，感染后，這一病毒會在患者體內終身攜帶[6]，因此臨床十分關注成人EB 病毒感染患者的EB 病毒相關抗體、EB 病毒DNA 及淋巴細胞亞群變化。我國兒童群體中，VCA-IgG 抗體的陽性表達率很高，在90%及以上。近些年來，這一情況的發生趨勢呈現為顯著升高，通過臨床觀察以及總結得出，成人EB 病毒感染后[7]，異常升高體內IgG、IgA，是臨床用于診斷疾病的輔助指標。在臨床評價EB 病毒感染癥狀表現上，標準并不統一，主要是間歇性以及持續性發熱、肝脾腫大、淋巴結，或者伴隨心肺、神經系統、皮膚等并發癥情況，患者預后嚴重不良，容易死亡[8]。但是，這種嚴重癥狀限于極少數病毒感染平衡被破壞、免疫功能被破壞患者。在一般情況下，在發生EB 病毒感染后，癥狀幾乎沒有很嚴重，或者將傳染性單核細胞增多癥引發，即便輕微癥狀發生，在數周后，逐漸減輕至消失[9]。分析EB 病毒感染患者的轉歸以及臨床表現，相關患者機體免疫功能，且關系密切，機體免疫功能改變可能對患者疾病轉歸、預后產生預示作用，因此，監測患者免疫功能，在診治EB 病毒感染患者病情中，十分重要，價值較高[10-12]。

EB 病毒感染后機體會對應性產生多個類型的抗體，其中EB 病毒DNA 是病毒復制增殖的敏感指標，EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性是診斷急性感染的可靠指標，本研究對比了中青年與老年人群在感染EB 病毒后的EB 病毒抗體及DNA 陽性情況，結果顯示：甲組患者的EB 病毒衣殼抗原IgG 抗體、EB 病毒衣殼抗原IgM 抗體陽性率，EB 病毒DNA 陽性率分別為81.50%、16.84%、63.08%，與乙組上述指標陽性率對比，差異均無統計學意義（P＞0.05），結果提示EB 病毒在不同年齡層次感染與病毒復制方面，差異性不大。

綜上所述，EB 病毒感染患者最常見的臨床表現為發熱、淋巴結腫大、脾腫大等，往往無明顯特異性癥狀，目前臨床尚無清除EB 病毒的有效策略，可采取阿昔洛韋抗病毒治療，但其確切療效尚存爭議。