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不同藥物麻醉下行肝腫瘤切除患者術后血漿miR-92a水平與肝損傷指標的關系

2021-02-13 02:01:06高毅冷玉芳張保朝司小萌溫昌明孫麗孫軍
精準醫學雜志 2021年6期
關鍵詞:血漿肝癌水平

高毅 冷玉芳 張保朝 司小萌 溫昌明 孫麗 孫軍

(1 鄭州大學附屬南陽市中心醫院麻醉科,河南 南陽 437000; 2 蘭州大學第一附屬醫院麻醉科)

肝癌是我國常見的消化道惡性腫瘤之一,在全球癌癥死亡原因中排名第3位[1-2]。我國人群肝癌的發病率和病死率均占世界首位,由于肝癌惡性程度高,且病程進展快,往往確診時患者已經處于中晚期[3-4],嚴重危害患者的生命健康。肝癌患者在手術切除可能的情況下首選肝臟腫瘤切除術。肝腫瘤切除手術中常會因麻醉藥物肝毒性、出血、肝門阻斷致缺血再灌注損傷、炎癥、內毒素血癥等因素致肝損傷,因此及早發現治療肝損傷對患者預后具有重要意義。以往臨床上多是通過檢測血漿中丙氨酸轉氨酶(ALT)和天冬氨酸轉氨酶(AST)的水平預測患者是否存在肝損傷[5],但外周血中ALT、AST水平升高受多種因素影響[6-7],因此可能會存在誤診或漏診的情況。動物實驗研究發現,miR-92a在急性肝損傷中具有保護作用[8],但miR-92a與肝損傷關系的臨床研究較少。目前在肝臟腫瘤切除術中使用較多的麻醉藥物是丙泊酚和七氟醚[9],在麻醉效果方面,兩種藥物無顯著差異。本研究分別使用七氟醚和丙泊酚兩種藥物對我院行肝臟腫瘤切除手術的患者進行麻醉,旨在分析不同藥物麻醉下行肝臟腫瘤切除患者術后血漿miR-92a水平與肝損傷指標的相關性,以探討血漿miR-92a表達水平對肝臟腫瘤切除術后肝損傷的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2017年5月—2019年5月在我院擇期行肝臟腫瘤切除術的患者共93例,按照麻醉藥物不同分為兩組,七氟醚組48例,男26例,女23例;平均年齡(52.23±8.44)歲;丙泊酚組45例,男23例,女21例;平均年齡(52.67±8.82)歲。兩組患者性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。患者納入標準:①年齡18歲以上;②符合原發性肝癌診斷標準,且經穿刺病理檢查確診;③術前未接受放療、化療等治療;④無肝外轉移病灶。排除標準:①術前嚴重心、肝、腎功能損傷的患者;②合并其他腫瘤疾病的患者;③第二次行肝臟手術的患者;④并發嚴重原發性疾病患者。本研究通過醫院倫理委員會的批準(批準號:2019JLHGKJDWLS-110),所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 麻醉方法

常規監測患者生命體征,確認無異常后進行麻醉手術。常規進行靜脈麻醉,丙泊酚組采用丙泊酚(2.0 mg/kg)、咪達唑侖(2 mg)、舒芬太尼(0.2 μg/kg)、順式阿曲庫胺(0.2 mg/kg)進行誘導,以丙泊酚6 mg/(kg·h)和瑞芬太尼0.1 μg/(kg·min)進行維持;七氟醚組采用吸入含體積分數0.01~0.02的七氟醚(氧流量4 L/min),同時復合泵入咪達唑侖(2 mg)、舒芬太尼(0.2 μg/kg)、順式阿曲庫胺(0.2 mg/kg)進行誘導,含體積分數0.02的七氟醚吸入復合泵入瑞芬太尼0.1 μg/(kg·min)進行麻醉維持。兩組患者均間斷給予順式阿曲庫胺,手術結束前30 min均給予0.2 μg/kg舒芬太尼。

1.3 肝損傷程度的判斷

術后12 h依據《傳染病學》6版中的標準判斷患者肝損傷程度。

1.4 血漿ALT和AST水平的檢測

采集患者術后12 h清晨肘靜脈血3 mL兩份。其中一份以2 500 r/min離心10 min,分離血漿標本,選用CS-7300全自動生化分析儀(成都萬瑞達醫療設備有限公司)測定患者血漿中ALT、AST和總膽紅素(TBIL)水平。

1.5 血漿miR-92a相對表達量的檢測

另一份靜脈血分離血漿后,取250 μL血漿置于無RNA/DNA酶的離心管中加750 μL的TRIzol試劑后混勻,室溫下靜置5 min后于-80 ℃低溫保存。參照miRNA分離試劑盒說明書中的步驟提取總RNA,使用FTC200型熒光定量PCR(RT-PCR)儀(加拿大Funglyn Biotech公司)進行PCR。設置PCR條件為94 ℃預變性2 min;然后94 ℃ 20 s,60 ℃ 34 s,60 ℃ 34 s,共進行40個循環。采用2-△△CT的方法計算血漿中miR-92a的相對表達量。

1.6 統計學方法

2 結 果

2.1 兩組患者血漿中ALT、AST以及TBIL水平和miR-92相對表達量比較

七氟醚組患者血漿中ALT、AST和TBIL表達水平和miR-92a相對表達量均高于丙泊酚組(t=2.492~5.102,P<0.05)。見表1。

2.2 兩組患者血漿中ALT、AST與miR-92a相對表達量的相關性

Pearson相關分析顯示,七氟醚組和丙泊酚組患者血漿中ALT、AST水平與miR-92a相對表達量均呈正相關(r=0.411~0.522,P<0.05)。結果見表1。

表1 兩組血漿中ALT、AST、TBIL水平和miR-92a相對表達量比較

2.3 血漿中miR-92a對兩組患者肝損傷的臨床診斷價值

七氟醚組和丙泊酚組患者術后發生肝損傷分別為39、37例。血漿中miR-92a相對表達量以約登指數最大的cut-off為臨界點,確定七氟醚組和丙泊酚組患者血漿中miR-92a診斷肝損傷的臨界值分別為0.932和0.915時,所相對應的曲線下面積分別為0.972(95%CI=0.943~1.000,P<0.05)和0.868(95%CI=0.786~0.950,P<0.05)。血漿中miR-92a評估七氟醚麻醉的肝腫瘤切除術患者發生肝損傷34例,診斷靈敏度為87.2%,特異度為96.0%;血漿中miR-92a評估丙泊酚麻醉下肝腫瘤切除術患者發生肝損傷28例,診斷靈敏度為75.7%,特異度為96.0%。

3 討 論

肝癌惡性程度高,是病死率極高的高危疾病,肝腫瘤切除術治療肝癌效果顯著,但術后易出現復發或嚴重肝損傷,危及患者生命健康,因此高靈敏度的診斷方法對及時發現早期肝損傷和改善患者預后具有重要意義。血漿中ALT和AST水平是目前評估肝組織損傷的有效指標,血漿中TBIL水平是評價藥物性肝損傷的重要指標。然而血漿中ALT和AST及TBIL的水平對于預測肝損傷的程度或患者預后均具有一定的局限性,如急性甲型肝炎病毒(HAV)感染患者的ALT和AST的水平急劇升高[9-11],而大多數HAV急性感染患者可以完全康復。以往研究認為患者的年齡、乙肝病史、腫瘤良惡性、手術切除范圍等是影響肝腫瘤切除術術后肝損傷的重要因素[12-13],本研究中兩組患者上述指標比較無顯著差異,說明在分組上排除了上述因素對結果的影響。

miRNAs是一種內源性的非編碼小分子RNA,miRNAs通常與靶mRNA的3′非翻譯區(3′UTR)相互作用,誘導mRNAs降解和翻譯抑制[14-15]。隨著對肝腫瘤研究的不斷深入,發現miRNA與肝腫瘤發生發展密切相關,諸如miR-218可通過靶向調控SERBP1而抑制肝癌細胞的轉移和細胞間質轉化[16-18];miR-26通過調節FXO11表達而抑制肝癌細胞的增殖、遷移和侵襲[19-21]。miR-92a廣泛存在于內皮細胞和內皮祖細胞中,與多種疾病發生發展相關,miR-92a家族基因在體內多種組織器官生長發育調控中發揮極其重要的作用。目前尚未有證據證實血漿中miR-92a在肝腫瘤中的作用,但本研究發現兩組患者血漿中miR-92a相對表達量與ALT、AST以及TBIL表達趨勢一致,相關性分析發現兩種經不同麻醉藥物進行的肝腫瘤切除術患者血漿中ALT、AST表達水平與miR-92a相對表達量呈正相關,表明miR-92a表達異常可能是肝損傷造成的。由于血漿中miR-92a與ALT、AST高度相關,提示血漿中miR-92a在預測肝損傷方面可能存在某些潛在價值。

肝臟切除必然伴隨著對肝組織的損傷,除肝門阻斷損傷外,麻醉藥物也可能會對肝細胞造成直接損傷。不同麻醉藥物對肝損傷程度不同,七氟醚在麻醉過程中可產生氧自由基,刺激血漿脂質過氧化物(LPO)升高,加重術后肝細胞損傷[22]。本研究中,丙泊酚組血漿中ALT、AST、TBIL水平及miR-92a相對表達量均低于七氟醚組,也提示丙泊酚可能具有抗氧化功能,可以有效地清除機體產生的氧自由基,對肝功能的損傷程度較輕。有研究認為,miR-92a在藥物性肝損傷過程中會發生變化,隨著肝損傷進展會有一定程度的下降,并且在肝病中也扮演著重要調節作用[23],但是關于其與肝損傷的相關性還需進一步研究。本研究中ROC曲線分析結果顯示,七氟醚組患者血漿中miR-92a的最佳臨界值為0.932時,診斷肝損傷的靈敏度及特異度分別為87.2%、96.0%;丙泊酚組患者血漿中miR-92a的最佳臨界值為0.915時,診斷肝損傷的靈敏度、特異度分別為75.7%、96.0%,提示血漿中miR-92a對行七氟醚、丙泊酚兩種藥物麻醉的肝腫瘤切除術患者的肝損傷具有較高診斷價值。

綜上所述,血漿中miR-92a對七氟醚、丙泊酚麻醉行肝腫瘤切除術后患者的肝損傷具有良好的預測價值。然而本研究仍存在不足之處,肝臟切除后機體的應激反應可能會對結果產生一定的影響;另外本研究的樣本量較小,后續應加大樣本量,進一步明確血漿中miR-92a水平對不同麻醉藥物肝切除術后肝損傷的預測價值。

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