熒光染色、派克墨水染色及KOH濕片法在馬拉色菌相關性疾病中的檢測效果比較

羅 雯，談 園，羅 宏

（長沙市第一醫院皮膚性病科，湖南 長沙 410000）

馬拉色菌是一種親脂性厚壁孢子菌，目前認為馬拉色菌毛囊炎、花斑癬、脂溢性皮炎、特應性皮炎、銀屑病均與馬拉色菌的定植密切相關[1]。采用KOH濕片法檢測馬拉色菌的特異性及敏感性低，臨床上常易出現漏診或誤診。派克墨水可將菌絲與孢子染成淺藍色，皮屑不著色，背景呈淺紅色，目前仍是檢測馬拉色菌相關疾病的常用方法。在臨床工作中發現，熒光染色法對馬拉色菌具有良好的檢測效果。因此，本研究旨在比較熒光染色法、派克墨水染色法及KOH濕片法對脂溢性皮炎患者中馬拉色菌感染及臨床診斷為馬拉色菌毛囊炎患者標本的檢測效果，探討三種檢測方法的優劣。

1 研究對象及方法

1.1 研究對象 采集2018年10月至2021年4月在本院皮膚科就診的344例臨床診斷為脂溢性皮炎及169例臨床診斷為馬拉色菌毛囊炎患者的臨床標本。

1.2 方法 采用濃度為75%的乙醇消毒患者的皮損部位后，刮取病變部位的皮屑或膿液，將其均分為三等份，分別進行熒光染色法、派克墨水染色法及KOH濕片法進行檢測。熒光染色法：將刮取的標本置于載玻片上，滴加1滴熒光染色液（江蘇萊芙時代生物科技有限公司），蓋上蓋玻片，輕壓蓋玻片，置于熒光顯微鏡（日本Olympus CX31）下觀察，先用低倍鏡（10×20）尋找視野中可疑的孢子或菌絲，再用高倍鏡（10×40）觀察菌絲或孢子的形態。派克墨水染色法：將刮取的標本置于載玻片上，滴入10%KOH溶液1滴，后再滴入派克墨水1滴，蓋上蓋玻片，酒精燈加熱標本，輕壓蓋玻片，置于光學顯微鏡下觀察。KOH濕片法：將刮取的標本置于載玻片上，滴入10%KOH溶液，蓋上蓋玻片，酒精燈加熱標本，輕壓蓋玻片，置于光學顯微鏡下觀察。

1.3 統計分析 采用SPSS 23.0軟件進行統計分析。采用多個樣本率的X2檢驗比較熒光染色法、派克墨水染色法及KOH濕片法的檢測效果，P＜0.05說明差異有統計學意義。

2 結果

344 例診斷為脂溢性皮炎的標本，采用熒光染色法、派克墨水染色法及KOH濕片法的陽性者分別為236例、232例及112例，其陽性率分別為68.60%、67.44%及51.16%。采用多個樣本率的X2檢驗進行統計分析，結果顯示熒光染色法的檢出率與派克墨水染色法無明顯差異（X2=0.11，P=0.81），熒光染色法的檢測效果明顯優于KOH濕片法（X2=21.78，P＜0.001），派克墨水染色法的檢出率顯著高于KOH濕片法（X2=18.89，P＜0.001），見表1。

169 例臨床診斷為馬拉色菌毛囊炎的標本，采用熒光染色法，陽性者129例，陽性率為76.33%，采用派克墨水染色，陽性者為126例，陽性率為74.56%，采用KOH濕片法，陽性者99例，陽性率為59.58%。采用多個樣本率的X2檢驗進行統計分析，結果顯示熒光染色法的檢測率與派克墨水染色法無明顯差異（X2=0.18，P=0.80），熒光染色法的檢出率比KOH濕片法高（X2=12.13，P=0.001），派克墨水染色的陽性檢測率明顯高于KOH濕片法（X2=9.69，P=0.003），見表1。

表1 三種檢測方法的檢測結果比較[n（%）]

3 討論

脂溢性皮炎是一種臨床上常見的慢性復發性炎癥性皮膚病，目前認為脂溢性皮炎的發生與馬拉色菌感染、性激素水平、皮脂腺分泌增多及免疫反應等因素有關[2、3]。馬拉色菌毛囊炎在臨床上常易與痤瘡、細菌性毛囊炎相混淆，僅通過觀察皮損特點，肉眼常無法區分是細菌性或真菌性毛囊炎[4]。因此，尋找一種快速、準確檢測馬拉色菌的方法，對探討脂溢性皮炎的病因和明確馬拉色菌毛囊炎的診斷，以及指導臨床醫生的用藥至關重要。

KOH濕片法具有操作簡單、成本低、檢測時間短等優點，背景中的雜質如脂滴、氣泡等常會干擾檢測者的判斷，用于馬拉色菌的診斷常易出現漏診或誤診。派克墨水在堿性環境中將菌絲與孢子染成淺藍色，皮屑不著色，背景呈淺紅色，臨床上常用于馬拉色菌的檢測。本研究發現采用熒光染色法、派克墨水染色法及KOH濕片法對馬拉色菌進行檢測，脂溢性皮炎中馬拉色菌的陽性檢出率分別為68.60%、67.44%及51.16%，馬拉色菌毛囊炎的陽性檢出率分別為76.33%、74.56%及59.58%，熒光染色法及派克墨水染色法的檢出率均明顯高于KOH濕片法，采用熒光染色法檢測時，背景中的脂滴、氣泡等雜質基本不著色，在淺藍色的背景下能快速分辨圓形或卵圓形出芽的亮藍色真菌孢子及菌絲，且孢子的形態清晰，能有效提高馬拉色菌檢測的陽性率，提高檢測效率。

綜上所述，熒光染色法及派克墨水染色法對馬拉色菌均有良好的檢測效果，對指導脂溢性皮炎患者的用藥及馬拉色菌毛囊炎的診斷十分重要，值得在臨床上廣泛推廣應用。