復雜型熱性驚厥患兒血清BDNF、NSE和HSP70水平變化及意義

牛臻

（河南省焦作市婦幼保健院小兒內科，河南焦作 454000）

熱性驚厥（febrile convulsion,FC）作為小兒常見的驚厥類型，發病率為2%～5%，約占小兒各類驚厥的30%［1］，多由外界刺激導致大腦異常興奮致使神經細胞異常放電所致，可導致患兒腦損傷，且與驚厥發作次數及持續時間有關。研究表明［2］，多次FC 發作可導致學習記憶力及運動功能受損，是孤獨癥和注意缺陷多動障礙重要危險因素。目前，FC 發生機制以及對腦組織損傷作用機制尚未完全清楚。研究顯示［3］，免疫、炎性反應、細胞因子、遺傳、腦組織物質改變、神經系統發育障礙等均可能參與了FC 及其對腦組織的損傷作用。腦源性神經營養因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）作為神經營養因子家族成員，在調控中樞和周圍神經元生長、分化及維持神經元正常生理功能發揮關鍵性作用［4］，神經元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase,NSE）作為維持神經元細胞膜生理供能必需物質，是腦內神經元損傷特異性客觀指標［5］，熱休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）作為應激相保護性蛋白，可保護神經元免受損傷［6］。本研究擬對FC 患兒血清中BDNF、NSE 和HSP70 水平變化進行檢測，探討它們與復雜型FC 發生的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014 年2 月至2015 年8 月在河南省焦作市婦幼保健院兒科住院治療的FC 患兒117 例，其中男63 例，女54 例；年齡3 個月～9 歲，平均（3.1±1.1）歲，其中3 個月～1 歲18 例，1～3 歲63例，3～6 歲25 例，6～9 歲11 例。所有患兒均符合第二版《小兒神經系統疾病》［7］中關于FC 診斷標準，通過臨床癥狀、體征、影像學檢查等排除腦部其他器質性改變疾病或中樞神經系統炎癥性疾病并發的發熱伴驚厥。其中單純型熱性驚厥患兒（SFC 組）57 例，年齡5 個月～6 歲，平均（3.0±1.2）歲；病程2 h～4 d，平均（0.9±0.2）d；發作時出現全身性肌肉痙攣或強直，體溫37.4～41.2 ℃，平均（39.5±0.9）℃；發熱24 h 內出現驚厥1 次51 例，2 次6 例，7 例于發熱24 h 后出現驚厥，抽搐持續時間1～7 min，平均抽搐持續時間（4.2±1.3）min。復雜型熱性驚厥（CFC 組）60 例，發病年齡3 個月～9 歲，平均（3.2±1.0）歲；病程1 h～6 d，平均（1.1±0.3）d；體溫37.5～40.0℃，平均（38.8±0.6）℃，1 次發熱過程中，8 例出現驚厥1 次，21 例2 次，31 例2 次以上，抽搐持續時間4～22 min，抽搐持續時間（12.4±3.7）min，39 例出現全身性發作，21 例出現局部性發作。同期，在河南省焦作市婦幼保健院兒保體檢中心選取健康兒童45 例作為對照組，其中男25 例，女20 例，年齡4 個月～9 歲，平均（3.3±1.3）歲，與SFC 組和CFC 組在性別、年齡差異無統計學意義（P<0.05）。本研究通過醫院倫理委員會批準，所有患兒家屬均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 FC 患兒于入院24 h 內，對照組于體檢時，分別抽取靜脈血6 mL，于4 ℃條件下，3 000 轉/min 離心15 min，留取血清，保存于-20 ℃冰箱中以備檢。

1.2.2 利用酶聯免疫吸附法（ELISA 法）檢測血清中BDNF、NSE 和HSP70 水平 利用雙抗體夾心ELISA 法對患兒及對照血清中BDNF、NSE 和HSP70 水平進行檢測，BDNF 試劑盒購自上海拜力生物科技有限公司、NSE 試劑盒購自上海信裕生物科技公司，HSP70 試劑盒購自上海基免實業有限公司，所有操作均按照試劑盒說明進行。

1.3 統計學方法

利用SPSS 21.0 統計分析軟件進行統計學處理，計量資料采用均數±標準差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，利用Spearman 或Pearson 相關分析對變量間相關關系進行分析，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 FC 患兒和對照組血清BDNF、NSE 和HSP70 水平比較

CFC 組患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平均高于SFC 組和對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）；而SFC 組患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 CFC 組患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平與其他臨床指標相關性

CFC 組患兒血清BDNF 水平與HSP70 水平、抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關（r=0.410、0.414 和0.619,P<0.05），NSE 水平與HSP70 水平、抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關（r=0.558、0.602 和0.454,P<0.05），HSP70 水平與抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關（r=0.873 和0.492,P<0.05）。見表2。

表1 FC 患兒和對照組血清BDNF、NSE 和HSP70 水平比較 （,ng/mL）

表1 FC 患兒和對照組血清BDNF、NSE 和HSP70 水平比較 （,ng/mL）

注：1）與對照組比較，P<0.05；2）與SFC 組比較，P<0.05。

表2 CFC 組患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平與其他臨床指標相關性

3 討論

FC 作為小兒常見疾病類型，可對發育期腦形態及功能產生近、遠期影響，使腦功能處于驚厥易感狀態，且反復出現FC 可發展為癲癇，尤其是復雜型驚厥，日后進展為癲癇的概率較大［8］。目前，FC 具體發生機制尚未完成清楚，有研究指出［9］，環境和遺傳因素導致γ-氨基丁酸（GABA）受體功能障礙，使其對抑制性突觸抑制作用降低，從而打破神經元興奮和抑制平衡，引發驚厥發生。BDNF 作為神經營養因子，具有雙重作用，不僅可維持神經元正常的生理功能、促進神經元再生和修復，而且可減少GABA 型神經元突出后Cl-釋放而降低GABA 受體介導的抑制性突出后電流，提高大腦神經元興奮性而產生毒性損傷［10］。本研究顯示，CFC 組患兒血清BDNF 水平均高于SFC 組和對照組，說明復雜型熱性驚厥患兒血清中BDNF水平顯著升高。相關分析顯示，CFC 組患兒血清BDNF 水平與抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關，提示隨著抽搐次數和抽搐持續時間延長，復雜型熱性驚厥患兒血清中BDNF 水平越高。分析原因，BDNF 表達增高可提高腦神經元興奮性，使神經軸突和肌膜對Na+的通透性增加，易發生除極化而降低驚厥閾值，使驚厥反復發作且持續時間延長［11］。同時，BDNF 易可抑制神經元凋亡，促進神經元再生及修復，復雜型熱性驚厥患兒血清中BDNF 水平升高，亦提示體內正在進行神經元修復和再生。

NSE 是神經元受損的特異且敏感標志物，與神經元損傷嚴重程度及腦損傷不良預后有關，血清中NSE 水平升高可反映中樞神經系統急性腦損傷［12］。HSP70 作為應急相蛋白，是一種保護性蛋白，可保護神經元免受應激原的損傷作用，抑制神經元凋亡的發生［13］。本研究顯示，CFC 組患兒血清NSE 和HSP70 水平均高于SFC 組和對照組，CFC 組患兒血清NSE 水平與HSP70 水平、抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關，HSP70 水平與抽搐次數和抽搐持續時間均呈正相關。說明復雜型熱性驚厥患兒血清NSE 水平與HSP70 水平顯著升高，且與抽搐次數和抽搐持續時間有關，提示患兒發生急性腦損傷；同時，機體啟動了自我保護作用，且隨著患兒抽搐次數增多和抽搐持續時間延長，往往預示患兒預后較差。本研究顯示，SFC組患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），說明單純型熱性驚厥患兒腦損傷程度較為輕微，預示患兒預后良好。本研究亦發現，CFC 組患兒血清BDNF水平與HSP70 水平呈正相關，而并未發現與NSE水平有關。筆者認為可能與BDNF 的雙重作用有關，這也可能為FC 患兒治療提供了新的線索，通過促進機體BDNF 產生，以趨向于其有利的一面，或許可減少腦損傷的發生，而促進神經元修復。同時，通過檢測FC 患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平變化，亦可對卻別患兒類型提供參考指標。

綜上所述，復雜型熱性驚厥患兒血清BDNF、NSE 和HSP70 水平升高，且與抽搐次數及抽搐持續時間有關。