腫瘤及血液病患者血清sTRAIL表達及與IL-6和Hepcidin水平的相關性研究

王秋云，嚴 敏，程 珍，潘湘濤

（蘇州大學附屬太倉醫院，江蘇蘇州 215400）

腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）是腫瘤壞死因子家族成員,能快速誘導不同種類的轉化細胞、腫瘤細胞和病毒感染細胞凋亡。TRAIL有膜結合型和可溶性（sTRAIL）兩種形式，大量研究表明sTRAIL 在各種感染、自身免疫性疾病中可以發生明顯變化，提示其與自身免疫等相關疾病的發生發展有關。腫瘤相關性貧血是一種特殊的慢性病貧血，其發病機制主要與腫瘤患者的慢性炎癥狀態導致細胞因子過度表達有關[1]。現有的研究表明白介素-6（interlukin-6,IL-6）是腫瘤患者重要的炎癥因子之一，可引起鐵調素（hepcidin,Hepc）的高表達，繼而導致機體對鐵的失利用和貧血[2]。目前Hepc 與腫瘤相關性貧血之間的關系已基本明確，而對sTRAIL 在腫瘤和血液疾病中的表達情況及特點的研究目前還不多見。因此本研究檢測了51例患者的血清sTRAIL，Hepc，IL-6，血清鐵蛋白（serum ferritin,SF）及血紅蛋白（Hb）水平，以探討sTRAIL，IL-6和Hepc 在腫瘤及血液病中的表達特點及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 本研究共納入2018年8月～2019年6月期間我院鐵代謝異常的腫瘤及血液病34例及17例健康志愿者（對照組）作為研究對象，其中男性17例，女性34例，年齡21.0～85.0歲（平均年齡52.5歲）。34例患者均為住院病例，其中實體腫瘤患者18例（包括卵巢癌4例、腸癌4例、肺癌3例、乳腺癌3例、胃癌2例、宮頸癌和汗腺癌各1例）；血液系統疾病16例，其中再生障礙性貧血（AA）6例，骨髓異常增生綜合征（MDS）3例，自身免疫性溶血性貧血、急性髓系白血病和巨幼細胞性貧血各2例，G6PD缺乏癥1例。對照組17例進行全面檢查排除各種疾病，特別是影響鐵代謝的疾病。

1.2 儀器與試劑 sTRAIL 和Hepc試劑由蘇州躍亞生物技術有限公司提供，檢測儀器為芬蘭labsystems Multiskan MS(型號352型)。SF和IL-6檢測試劑由羅氏公司提供，儀器為羅氏公司COBAS601 電化學發光儀。Hb 測定應用Coulter-Beckman 五分類血細胞檢測儀。

1.3 方法 sTRAIL 和Hepc 檢測應用ELISA 方法。SF 和IL-6 檢測應用電化學發光法測定。Hb 應用常規方法檢測。

1.4 統計學分析 采用SPSS 23.0 軟件，分別采用單因素方差分析（F檢驗）比較多組之間均值差異，多個均數之間的兩兩比較采用q檢驗，數據之間的相關性分析采用Pearson 相關分析。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象血清sTRAIL，IL-6，Hepc 和SF 測定結果 見表1。三組研究對象的Hb 均值為109.7±21.56g/L（95%CI 為100.68～118.77g/L），sTRAIL 均值為269.91±89.74pg/ml（95%CI 為236.81～303.00pg/ml），Hepc 均值為54.37±6.19μg/L（95%CI為48.12～60.62μg/L），IL-6 均值為6.10±1.32mg/ml（95%CI 為3.18～9.02mg/ml）和SF 均值 為475.24±115.69ng/ml（95%CI 為341.72～608.76ng/ml）。三組之間比較應用方差分析F檢驗，差異均有統計學意義（F=5.69～31.53，均P＜0.05）。

表1 腫瘤、血液和志愿者分組各項指標的測定結果和比較（±s）

表1 腫瘤、血液和志愿者分組各項指標的測定結果和比較（±s）

檢測項目 腫瘤組(n=18)血液病組(n=16)對照組(n=17) F值 P值對照組/血液病組 對照組/腫瘤組 血液病組/腫瘤組q P q P q P Hb(g/L) 112.72±20.40 76.31±27.42 138.00±10.54 37.71 0.000 8.05 0.000 4.74 0.000 4.03 0.000 sTRAIL（pg/ml) 357.97±101.88 297.44±78.72 150.74±43.08 31.53 0.000 6.67 0.000 7.76 0.000 2.11 0.043 Hepc（μg/L） 61.16±19.64 67.54±19.50 34.78±11.91 1.74 0.000 8.14 0.000 6.21 0.000 2.55 0.616 IL-6(mg/ml) 4.60±3.14 12.49±11.69 1.66±0.28 5.69 0.009 4.62 0.032 3.42 0.039 1.29 0.865 SF（ng/ml） 530.50±381.91 807.44±543.12 104.06±88.28 14.10 0.000 6.90 0.000 5.26 0.000 2.17 0.511

2.2 相關分析結果

2.2.1 Hb與SF，Hepc 和sTRAIL之間的相關性：分別對51例研究者的Hb與SF，Hepc 和sTRAIL之間，SF與Hepc和sTRAIL之間，以及Hepc與sTRAIL之間進行相關性分析。結果顯示，HP與SF，Hepc，sTRAIL呈顯著負相關（r=?0.487，?0.379，?0.308，P=0.000，0.000，0.028）；SF與Hepc，sTRATL呈正相關（r=0.350，0.544，P=0.012，0.000） ；Hepc 與sTRAIL呈正相關（r=0.321，P=0.022），差異均有統計學意義。

2.2.2 IL-6 與Hb，SF，Hepc和sTRAIL之間的相關性：對IL-6與Hb，SF，Hepc和sTRAIL 之間進行相關分析，結果顯示IL-6 與Hb 呈負相關（r=?0.341，P=0.021），與SF和sTRAIL均呈正相關（r=0.342，0.311，P=0.020，0.025），而與Hepc無相關性（r=?0.002，P＞0.05）。

3 討論

貧血是腫瘤患者最常見的并發癥，其嚴重影響患者的生活質量，并且是腫瘤患者的獨立不良預后因素[3]。目前國內外對于腫瘤患者血清Hepc 水平與SF 和Hb 水平之間關系等方面的研究較多[4-5]，已經證實炎癥介導腫瘤相關性貧血患者的Hepc 水平偏高，繼而造成鐵失利用而表現為SF水平升高和Hb 水平下降。炎癥指標的升高主要表現為血清IL-6 水平和C 反應蛋白（CRP）升高。本研究表明腫瘤和血液病組患者的血清IL-6，Hepc 與SF水平均明顯高于對照組，而Hb 水平則明顯低于對照組，差異均有統計學意義；同時Hb 與SF，IL-6和Hepc 呈負相關，SF 與IL-6和Hepc 呈正相關，差異均有統計學意義。上述結果和我們既往的研究相一致[2-3，4-6]。但IL-6 與Hepc之間的相關分析結果無統計學意義，與既往研究不同[2]，可能與本組資料中疾病種類較多而總病例數相對較少有關，特別是AA 和MDS 患者本身因為大量的輸血等因素而造成鐵過載，從而掩蓋了IL-6，SF 與Hepc之間的真實關系。

我們發現血液病和腫瘤患者血清sTRAIL 水平均顯著高于對照組，差異有統計學意義，并且與IL-6，SF 和Hepc 均呈正相關，而與Hb 水平呈負相關，提示sTRAIL表達與鐵代謝有一定關系，可能是通過參與了IL-6 升高導致Hepc 升高，從而使SF 升高、Hb 下降這一慢性病貧血（包括腫瘤相關性貧血）的發生發展的途徑而發揮作用。有文獻報道，無論是在正常生理或病理條件下，幼稚有核紅細胞均易受sTRAIL 誘導細胞凋亡的影響[7]；也有學者[8]在研究MDS 與TRAIL之間的關系時發現，MDS 患者骨髓血中TRAIL 水平升高會影響紅細胞的生成，同時也會加重貧血的程度，而在急性白血病和正常對照組中均無相似結果[9]，本研究結果與上述文獻結果基本一致。另外，LIU 等[10]在研究重型再生障礙性貧血（SAA）時發現NK 和Treg 細胞的TRAIL表達高于正常對照組，但在CD8+細胞的表達則低于正常組，他們認為SAA 患者NK 和Treg 細胞受到信號抑制無法發揮正常免疫調控作用，但過度激活的CD8+細胞則可以逃逸這一抑制作用，從而激活骨髓造血細胞損傷TRAIL 信號通路失調、促進CTL 活化、加快疾病的進展這一通路。韓曦瑤等[10]通過對17例炎癥性疾病和18例腫瘤患者的研究發現sTRAIL 和Hepc 均高于正常對照組，并且兩者有相關關系。從現有文獻報道結果看，sTRAIL 參與了感染性相關疾病、自身免疫性疾病、腫瘤和血液病患者的造血過程，對Hb 水平有負調控作用[9-10]。

由于本組中血液病和實體腫瘤的病例數均較少，因此未能對sTRAIL 和Hepc表達與貧血的程度、腫瘤的臨床分期和預后等之間的關系作進一步分組分析，對此有待于今后擴大病例數進一步深入研究。

總之，在腫瘤和血液病患者中，血清sTRAIL表達與IL-6和Hepc 等之間有相關性，sTRAIL 可能參與了體內紅系祖細胞增殖分化及對鐵的調控機制，并對Hb 水平有負調控作用。