昆明地區兒童血清25羥基維生素D水平檢測及維生素D營養狀態分析

潘永圣，蒲 丹，汪佳婕，許小靚，徐宏忍，尹利民

(昆明市第一人民醫院檢驗科，昆明 650011)

維生素D是身體發育過程中所必需的一種脂溶性維生素，也是兒童骨骼健康發育的重要決定因素，其主要生理作用是促進腸道內鈣和磷的吸收，機體在缺乏維生素D的狀態下，僅有10%～15%的膳食鈣和約60%的磷被吸收[1]。流行病學調查顯示，世界各地不同地區兒童普遍存在維生素D缺乏或不足的現象[2]。維生素D缺乏或不足導致兒童佝僂病和生長遲緩等疾病。近年來研究還發現維生素D還與癌癥、傳染病、心血管疾病、糖尿病、自身免疫性疾病和精神系統疾病等的發生密切相關[5]。25羥基維生素D[25（OH）D]是維生素D在人體內主要的循環和儲存形式，其半衰期長以及合成不受激素直接調節，且在血液中濃度較高，檢測血清25-（OH）D 水平是評估兒童體內維生素D營養狀態的最佳指標[6]。維生素D水平受居住地區、季節、性別、年齡等因素的影響，不同地區維生素D水平及營養狀況不同[7]，回顧近幾年研究發現昆明地區兒童維生素D營養狀態研究的相關報道不多，因此本研究對昆明地區0～14歲兒童血清25（OH）D 水平進行分析，評估兒童維生素D營養狀態，為該地區預防兒童維生素D缺乏提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2016年11月～2019年10月昆明市第一人民醫院兒保科門診常規檢查血清25-（OH）D 的0～14歲兒童600例為研究對象，其中男性314例，女性286例。0～1歲51例，1～3歲239例，3～6歲169例，6～14歲141例。將來院檢查的月份按季節劃分：3～5月為春季，6～8月為夏季，9～11月為秋季，12～次年2月為冬季，其中春季125例，夏季250例，秋季105例和冬季120例。所選實驗對象均為無維生素D依賴性佝僂病、先天性遺傳代謝性疾病、肝腎疾病、內分泌系統疾病等。

1.2 儀器和試劑 實驗設備主要包括美國AB SCIEX 公司的串聯質譜儀API3200 和日本島津公司的液相色譜儀，檢測試劑由上海可力梅塔有限公司提供（含校準品和質控品），采血管采用美國碧迪醫療器械有限公司生產的帶分離膠真空采血管。

1.3 方法 于清晨空腹采集靜脈血2～3ml 至帶分離膠真空采血管中，在4h 內3 000r/min 離心10min分離血清，將血清保存于-20℃冰箱待測。嚴格按照儀器和試劑盒說明書進行檢測操作。

1.4 判斷標準[8]血清25（OH）D＜20 ng/ml為缺乏；20～30 ng/ml 為 不 足；30～150 ng/ml 為 充 足，＞150 ng/ml 為中毒。

1.5 統計學分析 采用SPSS19.0 統計軟件進行數據分析，計量資料采用均值±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析（ANOVA），計數資料用例數和百分率表示，多組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兒童血清25（OH）D 總水平 600例0～14歲兒童血清25（OH）D 水平為27.44±8.82 ng/ml。血清25（OH）D缺乏率為19.33%（116/600），不足率為47.67%（286/600），充足率為33.00%（198/600）。其中男性314例，血清25（OH）D 水平為28.37±8.77 ng/ml；女性286例，血清25（OH）D 水平為26.42±8.77 ng/ml。男女兒童間血清25（OH）D 水平差異有統計學意義（t=2.707，P=0.007）。男性兒童血清25（OH）D缺乏率為14.33%（45/314），不足率為48.73%（153/314），充足率為36.94%（116/314）；女性兒童血清25（OH）D缺乏率為24.83%（71/286），不足率為46.50%（133/286），充足率為28.67%（82/286）。血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在男女兒童間差異有統計學意義（χ2=11.784，P=0.003）。

2.2 不同年齡段兒童血清25（OH）D 水平比較見表1。兒童體內血清25（OH）D 水平隨年齡的增長呈下降趨勢，不同年齡段兒童血清25（OH）D水平差異有統計學意義（F=93.447，P=0.000）。6～14歲兒童血清25（OH）D缺乏率高于0～1歲、1～3歲和3～6歲兒童，充足率低于0～1歲、1～3歲和3～6歲兒童。血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在不同年齡段上差異有統計學意義（χ2=188.515，P=0.000）。

表1 不同年齡段兒童血清25（OH）D 水平及營養狀態[n（%）]

2.3 不同季節兒童血清25（OH）D 水平比較 見表2。春、秋季的兒童血清25（OH）D 水平高于夏、冬季，差異有統計學意義（F=3.403，P=0.017），其中冬季與春季以及秋季差異均有統計學意義（t=3.020，P=0.003；t=2.607，P=0.010）。夏、冬季的兒童血清25（OH）D缺乏率高于春、秋季，血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在不同季節差異有統計學意義（χ2=14.492，P=0.025），其中冬季與春季和秋季兒童血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率差異均有統計學意義（χ2=8.276，P=0.016；χ2=9.313，P=0.009）。

表2 不同季節兒童血清25（OH）D 水平及營養狀態[n（%）]

3 討論

維生素D是一組脂溶性的類固醇衍生物，與人類健康密切的是維生素D2（麥角鈣化醇）和維生素D3（膽鈣化醇） ，兩者都可以從不同的食物中獲得，但維生素D3 還可以通過紫外線照射后在皮膚中合成。維生素D通常沒有生物活性，需在體內經過兩次羥化后生成1，25（OH）2D，并通過與其核受體維生素D受體（VDR）相互作用來發揮其功能[9]。全球不同人群普遍處于維生素D不足或缺乏狀態，兒童是維生素D缺乏高危人群，食物中添加維生素D的美國，1～5歲和6～11歲的兒童25（OH）D ＜30ng/ml 的分別占50%和70%，而在食物中未添加維生素D的歐洲、中東、南美、中國、印度等地區，兒童維生素D缺乏和不足率更高[5]。因此，了解本地區兒童體內維生素D水平和營養狀態，對預防兒童維生素D缺乏或不足具有重要意義。

本研究采用LC-MS/MS 法對0～14歲600例兒童進行血清25（OH）D 檢測，結果顯示昆明地區血清25（OH）D缺乏率和不足率分別為19.33%和47.67%，兒童普遍存在維生素D缺乏和不足現象，但未發現維生素D中毒現象。本地區缺乏率低于北京（30.20%）、黑龍江大慶市（27.00%）、重慶（21.60%）、廣西（47.10%）等[10-13]地區，可能原因是昆明地處云貴高原中部，常年日照時間長，紫外線照射強，以及重工業少，空氣污染程度較輕，經皮膚合成的維生素D多。本研究還顯示，女童的血清25（OH）D缺乏率高于男童，差異有統計學意義（P＜0.05），與國內其他研究報道[7]一致，主要原因可能是男童比女童較為活潑，戶外活動多，日光暴露時間長，由紫外線經皮膚合成的維生素D更多。

本研究發現，昆明地區不同年齡段兒童血清25（OH）D 水平隨著年齡的增長呈下降趨勢，其差異有統計學意義（P＜0.01）。6～14歲兒童血清25（OH）D缺乏率高于0～1歲、1～3歲和3～6歲兒童，不同年齡段兒童血清25（OH）D缺乏、不足和充足率差異有統計學意義（P＜0.01），隨年齡增長兒童維生素D缺乏率逐漸增加，與王晶等[8]的研究一致。可能原因為：①隨著兒童保健行業的發展，加強了維生素D缺乏的宣傳力度，家長對生長發育較快的嬰幼兒維生素D補充意識逐步增強，使得嬰幼兒期維生素D水平達到良好的狀態。②1歲后兒童逐漸脫離母乳或配方奶，并且身體生長迅速，對維生素D的需求量大，但飲食中維生素D的來源很少，以及家長忽略1歲后兒童維生素D的補充，導致1歲后兒童體內維生素D水平出現欠佳現象。③3歲后兒童主要時間集中在學業和智力發展等方面，戶外活動減少，日光暴露不足，并且減少維生素D補充或停用等諸多因素，出現隨著年齡增長維生素D水平逐漸下降現象。研究還發現，本地區3歲后兒童血清25（OH）D 充足率僅為13.55%，因此，應重視3歲后兒童的維生素D補充，加強防治兒童維生素D缺乏或不足現象。

體內維生素D大約90%的來源是經日光照射后皮膚合成，但皮膚合成維生素D的量主要取決于緯度、季節、日照角度和日照時間等因素[6]。本研究比較不同季節來院體檢的兒童的血清25（OH）D水平及營養狀態，發現春、秋季的兒童血清25（OH）D 水平高于夏、冬季（P＜0.05），而夏、冬季的兒童血清25（OH）D缺乏率高于春、秋季（P＜0.05），昆明屬北緯低緯度亞熱帶-高原山地季風氣候，氣候溫和，四季日照充足，夏季溫度相對較高和冬季溫度相對較低，兒童戶外活動時間少，日照暴露不足，而春、秋季氣溫較為涼爽，氣候適宜，兒童戶外活動時間長，日照暴露充足。本地區四個季節兒童血清25（OH）D 充足率均不足40%，顯示單純靠日光照射后經皮膚合成維生素D的量可能滿足不了兒童對維生素D的營養需求，應重視兒童維生素D的補充。

綜上所述，昆明地區兒童血清25（OH）D營養狀況欠佳，本研究中50.00%以上兒童都存在維生素D缺乏現象。因此，應加強維生素D健康宣傳工作，提高兒童血清25（OH）D 的監測，增加攝入富含維生素D食物，結合本地區情況注重不同性別、年齡以及季節的維生素D補充。