食道癌患者血清CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平聯合檢測的診斷價值及與T淋巴細胞亞群表達的相關性研究

鄭 榮，何三軍，朱宏才，馮仕川

(漢中市中心醫院a.檢驗科；b.腫瘤內科；c.全科醫學科,陜西漢中 723000)

食道癌(esophageal cancer,EC)是由食道上皮黏膜細胞病變導致的惡性腫瘤，EC 約占全部惡性腫瘤的2%，患者以中老年群體為主，臨床主要表現為進行性吞咽困難和咽下疼痛等[1-2]。我國是EC的高發地區之一，每年約有15 萬人死于EC[3]。目前，EC 仍以手術治療為主，但由于傳統的手術治療會對患者產生較大的身體創傷和心理恐懼，再加上疾病本身和副作用等的影響常致使整體治療效果和預后欠佳[4]。早發現、早治療是降低EC 發病率和病死率的有效手段，腫瘤標志物(tumor marker,TM)在EC 早期診斷、治療監測、預后評估等環節發揮重要作用。本研究擬探討細胞角蛋白19 片段(cytokeratin-19-fragment,CYFRA21-1)、糖類抗原19-9(carbohydrate antigen19-9,CA19-9)、β- 人 絨毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-hCG)聯合檢測在EC 中的診斷價值及其對患者T淋巴細胞亞群水平的影響，以期為EC患者的臨床診療和預后提供合理參考，現具體報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2018年1月～2020年1月我院收治的110例EC患者為EC組，其中男性56例，女性54例；年齡31～73歲，平均年齡為51.63±7.54歲。按照EC 病灶部位分為：胸上段42例，胸中段27例，胸下段41例。按照EC 病理分期分為鱗癌49例和腺癌61例。另選取我院同期80例健康志愿者為正常組，其中男、女性各40例；年齡33～71歲，平均年齡51.59±7.48歲。本試驗經我院倫理委員會審批通過，受試者自愿參加且均簽署知情同意書。

納入標準：① EC組患者均經消化道內鏡和CT等檢查確診為EC者；② 臨床資料完整者；③ 未見腫大融合的縱膈淋巴結者；④EC組患者均接受食管癌根治術+食管胃吻合術，未發現遠處轉移病灶。排除標準：①并發肝、腎臟及心臟器官功能障礙者；②并發嚴重肺功能障礙者；③有心理障礙和精神異常者；④不配合本試驗和中途退出者。

1.2 儀器與試劑 CYFRA21-1 放射免疫分析 (radioimmunoassay,RIA)試劑盒和CA19-9 與β-hCG酶聯免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒均購自北京市福瑞生物工程公司。Allegra X-15R 臺式冷凍離心機購自美國貝克曼庫爾特有限公司。

1.3 方法 樣本采集：入院第二日清晨，分別采集兩組空腹靜脈血3 ml，3 000 r/min 離心5 min 后取上層血清，于-70℃保存待測。采用RIA法檢測CYFRA21-1含量。采用ELISA 檢測CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+的水平。具體操作嚴格按照說明書進行。

1.4 統計學分析 采用SPSS19.0 統計學軟件分析和處理數據，計量資料以均值±標準差(±s)表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，采用Spearman相關分析探究相關性，以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比較 見表1。EC組患者血清中CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG 的含量顯著高于正常組，其差異具有統計學意義(均P＜0.05)。EC組患者T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+和CD8+的水平顯著低于正常組，其差異均具有統計學意義(均P＜0.05)。

表1 兩組患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比較（±s）

表1 兩組患者CYFRA21-1，CA19-9，β-hCG，CD3+，CD4+和CD8+水平的比較（±s）

檢測指標 EC組（n=110） 正常組（n=80） t P CYFRA21-1 (ng/ml) 38.21±19.81 1.91±0.13 13.283 0.000 CA19-9 (U/ml) 76.63±47.32 27.45±4.33 1.271 0.032 β-hCG (U/ml) 62.37±21.46 21.38±4.46 11.261 0.000 CD3+ (%) 51.13±5.38 68.73±6.01 7.520 0.014 CD4+ (%) 29.68±4.60 43.83±4.96 4.118 0.029 CD8+ (%) 28.95±3.17 46.93±5.04 4.128 0.024

2.2 CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG聯合檢測在EC 診斷中的價值 CYFRA21-1 診斷EC 的靈敏度和特異度分別為35.50%和81.50%，約登指數0.174 5；CA19-9 診斷EC 的靈敏度和特異度分別為32.50%和83.25%，約登指數0.265 8；β-hCG 診斷EC 的靈敏度和特異度分別為59.75%和61.25%，約登指數0.241 7；CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG 聯合檢測在EC 診斷中靈敏度和特異度分別為72.00%和83.50%，約登指數0.241 2，高于單一的檢測指標。

2.3 T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+，CD8+水平與CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG 的相關性分析 采用Spearman 相關分析探究CD3+，CD4+，CD8+水平與CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG 的相關性，結果顯示CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG與T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+，CD8+水平呈負相關(r=-0.432，P＜0.05；r=-0.461，P＜0.05；r=-0.408，P＜0.05)。

3 討論

EC 是我國常見的惡性腫瘤，其發病率和死亡率分別居我國惡性腫瘤的第5位和第4位[5]，目前認為EC 是多因素作用、多基因參與、多階段發展的疾病，但是其發生、發展的確切機制仍不清楚[6]。大量的流行病學數據顯示，化學物質(如亞硝胺、酒精、毒品等)、營養缺乏、物理因素(如進食粗糙和過熱食物)、生物因素均與EC 的發病密切相關。TM 在EC 早期診斷、治療監測、預后評估等環節發揮重要作用。

CYFRA21-1廣泛存在于肺癌、EC等單或浮層上皮腫瘤細胞的胞質中，尤其對中晚期EC，CYFRA21-1 是一個重要的腫瘤標志物（tumormarkers，TM）。CA19-9 主要分布在正常胎兒胰腺、膽囊和正常成年人胰腺、膽管上皮等處，有研究報道指出其是消化道惡性腫瘤較好的檢測指標，血清濃度與EC 的發展階段相關[7]。李道明等[8]使用免疫組織化學法(immunohistochemical method,IHC)檢測EC患者癌組織中β-hCG 的表達，結果顯示β-hCG 呈高表達，提示β-hCG 可能與EC 的發生、發展有關。本研究中涉及的三個TM 都與EC 的診斷、發展及預后有密切關系，單一指標并不能明確EC 的診斷，另外EC 發病來源復雜、病因與發病機制不明確，因此需要多種TM 聯合檢測以提高診斷水平。本研究結果指出EC組患者血清中CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG 的含量均顯著高于正常組，三者聯合檢測在EC 診斷中的靈敏度和特異度高于單一TM 檢測。說明三個指標在診斷EC 上均有一定價值，而聯合檢測可提高EC 診斷準確率，有很好的敏感度。

本研究結果顯示，EC組患者T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+和CD8+的水平顯著低于正常組，其主要是由于手術創傷、術中麻醉類藥物的使用、臟器長時間的暴露等因素，再加之患者術后的禁食禁水會導致患者營養水平和免疫功能的失調[9-12]，因此提高患者的免疫功能有助于EC患者病情的恢復和改善預后。Spearman 相關分析結果顯示CYFRA21-1+CA19-9+β-hCG與T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+，CD8+水平呈負相關，即有效降低CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平，使免疫功能得以調節。

綜上所述，CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG聯合檢測可提高EC 診斷的靈敏度和特異度，降低CYFRA21-1，CA19-9和β-hCG水平可提高T淋巴細胞亞群CD3+，CD4+，CD8+水平，改善EC患者的免疫功能，有助于患者病情的恢復。