血清NGAL水平預(yù)測急性缺血性腦卒中的臨床價(jià)值*

馬利明,劉運(yùn)雙△，唐宇鳳，羅立梅，張 彬，石 睿，吳泳樺

四川省綿陽市中心醫(yī)院:1.檢驗(yàn)科;2.神經(jīng)內(nèi)科,四川綿陽 621000

腦卒中是全球范圍內(nèi)致死和殘疾的第二大原因[1]。急性缺血性腦卒中占我國腦卒中的69.6%～70.8%[2]。目前，指南建議從急診就診到開始溶栓應(yīng)爭取在1 h內(nèi)完成[3]。急性缺血性腦卒中的病理學(xué)機(jī)制主要表現(xiàn)為動(dòng)脈狹窄性閉塞和動(dòng)脈栓塞，兩者都主要與動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展密切相關(guān)。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)是心血管疾病的一個(gè)危險(xiǎn)因素[4]。NGAL在人類動(dòng)脈粥樣硬化組織中的表達(dá)與有癥狀的頸動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)[5]。血液中NGAL可以作為頸動(dòng)脈粥樣硬化患者斑塊易損性的生物標(biāo)志物[6]。本文主要探討血清NGAL水平對(duì)急性缺血性腦卒中的預(yù)測價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 從2019年1—12月本院收治的急性缺血性腦卒中患者中選取222例作為觀察組，其中男性148例，女性74例。納入標(biāo)準(zhǔn)：急性缺血性腦卒中符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[3]的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：急性腎損傷、慢性腎病和惡性腫瘤。根據(jù)改善全球腎臟病預(yù)后組織(KDIGO)的定義排除急性腎損傷。使用KDIGO推薦的成人基于胱抑素C(CysC)的公式計(jì)算出估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)，使用KDIGO的標(biāo)準(zhǔn)[eGFR>60 mL/(min·1.73 m2)]排除慢性腎病。在同期來本院進(jìn)行健康體檢者中選取156例心臟、肺、肝臟、腎臟等器官影像學(xué)、血液及尿液檢查結(jié)果正常者作為健康對(duì)照組，其中男性90例，女性66例。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2儀器與試劑 儀器：羅氏 C8000生化分析儀。試劑：德國羅氏公司超敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、同型半胱氨酸(Hcy)、肌酐(Cr)和CysC檢測試劑、校準(zhǔn)物和Hcy質(zhì)控物。四川邁克生物科技有限公司NGAL檢測試劑、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物。美國伯樂公司液體多項(xiàng)常規(guī)化學(xué)質(zhì)控物和液體多項(xiàng)免疫質(zhì)控物。

1.3方法 使用美國BD公司生產(chǎn)的含有分離膠和促凝劑的真空采血管(SSTTM Ⅱ Advance)采集血液，按照要求分離血清用于檢測。免疫透射比濁法檢測NGAL、hsCRP和CysC水平，酶法檢測TC、TG和Cr水平，循環(huán)酶法檢測Hcy水平，直接法檢測HDL-C和LDL-C水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS19.0和MedCalc12.7軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用Kolmogorov-Smirnov法進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，非正態(tài)分布計(jì)量資料以M(P25,P75)表示,非雙變量正態(tài)分布的比較采用非參數(shù)獨(dú)立樣本Mann-Whitney檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，率的比較使用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。非雙變量正態(tài)分布相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。采用二元Logistic回歸進(jìn)行因素分析。采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)的曲線下面積(AUC)、靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值、陽性似然比和陰性似然比表示診斷效能，以最佳約登指數(shù)獲取最佳臨界值。

2 結(jié) 果

2.1觀察組和健康對(duì)照組血清相關(guān)指標(biāo)比較 觀察組患者血清NGAL、hsCRP、TC、LDL-C和Hcy水平高于健康對(duì)照組，HDL-C水平低于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；TG水平在觀察組與健康對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 觀察組和健康對(duì)照組血清相關(guān)指標(biāo)比較

2.2相關(guān)性分析 急性缺血性腦卒中患者血清 NGAL水平與hsCRP、TC、LDL-C、Hcy水平呈正相關(guān)(r=0.356，P<0.001；r=0.169，P=0.012；r=0.239，P<0.001；r=0.220,P<0.001)，與TG和HDL-C水平無相關(guān)性(r=-0.120,P=0.074；r=-0.086，P=0.199)。

2.3因素分析 二元Logistic回歸分析結(jié)果顯示，NGAL、hsCRP、 TC、TG、 LDL-C、和 Hcy是影響急性缺血性腦卒中發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素(P<0.05)。性別、年齡和HDL-C與急性缺血性腦卒中的關(guān)系不明顯。見表2。

表2 急性缺血性腦卒中患者的二元Logistic回歸分析結(jié)果

2.4ROC曲線分析結(jié)果 以141.0 mg/L為最佳臨界值，血清NGAL預(yù)測急性缺血性腦卒中的靈敏度和特異度分別為63.1%和85.9%，AUC為0.81。對(duì)預(yù)測急性缺血性腦卒中，血清NGAL的診斷效能與hsCRP相似，但優(yōu)于TC、LDL-C和Hcy。見表3。

表3 ROC曲線分析結(jié)果

3 討 論

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，短暫性大腦中動(dòng)脈閉塞后，急性誘導(dǎo)NGAL，血清中NGAL最早在1 h出現(xiàn)，23 h達(dá)到峰值，48～72 h降低[7]。臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，急性缺血性腦卒中患者血液NGAL水平在發(fā)病后24～72 h升高[8]。本研究結(jié)果表明，由于在入院時(shí)即采集血液測定NGAL水平，發(fā)生急性缺血性腦卒中后，患者血清NGAL水平明顯升高。

體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在人類巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞內(nèi)，NGAL上調(diào)白細(xì)胞介素6、白細(xì)胞介素8和單核細(xì)胞趨化蛋白-1的釋放。作為人類動(dòng)脈粥樣硬化組織中炎癥環(huán)境的一個(gè)直接啟動(dòng)因子，NGAL參與了動(dòng)脈粥樣硬化的形成[5]。此外，NGAL與動(dòng)脈硬化斑塊的易損性相關(guān)。對(duì)頸動(dòng)脈硬化患者動(dòng)脈粥樣硬化組織中NGAL水平的研究發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞內(nèi)均檢測到NGAL，有癥狀的頸動(dòng)脈粥樣硬化組織中NGAL的mRNA表達(dá)高于無癥狀者[5]。依據(jù)美國心臟協(xié)會(huì)的組織學(xué)分類為動(dòng)脈粥樣硬化Ⅵ型和超聲結(jié)果為低回聲斑塊的患者，NGAL的水平更高；與無癥狀或狹窄度<90%的患者比較，有癥狀或狹窄度≥90%的患者NGAL水平更高[6]。在人類頸動(dòng)脈粥樣硬化組織中，NGAL的表達(dá)與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定表型相關(guān)[5-6]。

血液中的NGAL可以作為頸動(dòng)脈狹窄患者動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的一個(gè)生物標(biāo)志物[6,9]。頸動(dòng)脈斑塊的易損性是很重要的預(yù)測腦血管事件的標(biāo)志物，如果無癥狀患者血液中NGAL水平超過臨界值，結(jié)合無回聲斑塊和高度狹窄，可以進(jìn)行早期手術(shù)[9]。以往的研究[7-8]和本文均證實(shí)，發(fā)生急性缺血性腦卒中后，血液中NGAL水平升高。此外，本文使用ROC曲線對(duì)血清NGAL預(yù)測急性缺血性腦卒中的診斷效能進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，血清NGAL具有較好的預(yù)測急性缺血性腦卒中的效能，與hsCRP相似，優(yōu)于TC、LDL-C和Hcy。

hsCRP與急性缺血性腦卒中獨(dú)立相關(guān)[10]，能夠用于急性缺血性腦卒中的早期診斷，可以預(yù)測動(dòng)脈狹窄和阻塞、死亡風(fēng)險(xiǎn)和急性缺血性腦卒中病原學(xué)亞型[11]。TC和 LDL-C與急性缺血性腦卒中有直接的相關(guān)性[12-13]。HDL-C與急性缺血性腦卒中的關(guān)系是有爭議的，有研究顯示，HDL-C與急性缺血性腦卒中呈負(fù)相關(guān)[12,14]，另有研究認(rèn)為，HDL-C與腦血管疾病的相關(guān)性是HDL-C亞組分的功能，HDL2-C與斑塊的厚度直接相關(guān)，HDL3-C與斑塊的面積呈負(fù)相關(guān)[15]。小和中等大小HDL顆粒與降低的急性缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，而HDL2-C與急性缺血性腦卒中無相關(guān)性[16]。有研究結(jié)果顯示，TG與急性缺血性腦卒中具有相關(guān)性[13]，也有研究結(jié)果認(rèn)為TG與急性缺血性腦卒中無相關(guān)性[14]。這主要?dú)w因于標(biāo)本是否在空腹?fàn)顟B(tài)下采集[12]。Hcy水平升高是公認(rèn)的人類血管疾病和急性缺血性腦卒中的危險(xiǎn)因素[17]。血液中的Hcy與急性缺血性腦卒中密切相關(guān)，高水平預(yù)測高急性缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)[18]。上述研究已經(jīng)明確了血液中hsCRP、TC、LDL-C和Hcy與急性缺血性腦卒中的直接相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，血清NGAL與hsCRP、TC、LDL-C、Hcy呈正相關(guān)，表明血清NGAL與急性缺血性腦卒中有直接的相關(guān)性。二元Logistic回歸分析結(jié)果也表明，NGAL是影響急性缺血性腦卒中發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素。

由于NGAL是一個(gè)腎損傷的標(biāo)志物[19]，并且與人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)[20]。因此，在選擇觀察對(duì)象時(shí)，排除了有急性腎損傷、慢性腎病和腫瘤的患者。此外，NGAL是一個(gè)急性時(shí)相蛋白，對(duì)各種炎癥敏感。所以，在應(yīng)用NGAL預(yù)測急性缺血性腦卒中時(shí)，要考慮腎臟疾病、腫瘤和炎癥這些因素。

急性缺血性腦卒中患者血液中NGAL水平與發(fā)病后3個(gè)月時(shí)較差的臨床后果和發(fā)病后發(fā)生感染相關(guān)，有助于預(yù)測急性缺血性腦卒中后3個(gè)月時(shí)的臨床效果[21]。作為一個(gè)急性時(shí)相蛋白，NGAL在急性缺血性腦卒中后調(diào)節(jié)再灌注損傷，發(fā)生腦卒中后，NGAL水平升高可以加重腦梗死，并且通過增強(qiáng)炎性細(xì)胞的滲入和促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡使得病情繼續(xù)惡化[7]。NGAL在急性缺血性腦卒中的預(yù)后方面具有潛在的價(jià)值，需要進(jìn)一步的研究探討。

血清NGAL具有較好的預(yù)測急性缺血性腦卒中的性能，是預(yù)測急性缺血性腦卒中的生物標(biāo)志物。