塵肺職業(yè)病患者血清MMP19、8-OHdG和CC16與其病情進展程度及肺功能的關系分析

榮興華，丁興龍

徐州礦務集團總醫(yī)院：1.塵肺科；2.檢驗科，江蘇徐州 221006

塵肺職業(yè)病是常見的在職業(yè)活動中吸入粉塵并在肺部潴留導致肺組織出現(xiàn)彌散性纖維化病變，并可能由肺部彌散性纖維化逐漸發(fā)展至全身性的疾病。職業(yè)性塵肺的發(fā)病機制相對復雜，且目前臨床中尚無對塵肺病進行鑒別診斷的特異性指標，缺乏特異性治療方法和藥物[1]?；|金屬蛋白酶19(MMP19)、8-羥基脫氧鳥苷酸(8-OHdG)和克拉拉細胞蛋白(CC16)是近年來廣泛研究的重要生物學標志物[2-3]，本研究選擇本院收治的塵肺職業(yè)病患者作為研究對象，分析塵肺職業(yè)病患者血清MMP19、8-OHdG和CC16與患者病情進展程度及肺功能的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 將本院2018年1月至2019年9月收治的97例塵肺職業(yè)病患者作為塵肺職業(yè)病組，所有患者均為男性，且符合《肺塵病診斷標準：GBZ70—2015》[4]。其中Ⅰ期塵肺職業(yè)病患者47例，年齡(57.36±4.97)歲，工齡(18.38±2.84)年，實際接塵工齡(14.39±3.28)年，農民工41例，有吸煙史40例;Ⅱ期塵肺職業(yè)病患者31例，年齡(58.06±5.14)歲，工齡(18.62±2.91)年，實際接塵工齡(15.18±4.19)年，農民工37例，有吸煙史35例；Ⅲ期塵肺職業(yè)病患者19例，年齡(57.97±5.37)歲，工齡(18.49±3.03)年，實際接塵工齡(15.03±3.73)年，農民工16例，有吸煙史16例。選擇同期50例體檢健康者作為健康對照組，年齡(56.89±5.21)歲，工齡(18.46±2.90)年。2組受試者年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。參與本組研究的所有受試者均排除心、肝、腎、肺等臟器纖維化或器質性病變。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2方法 采集所有受試者5 mL空腹靜脈血，室溫靜置0.5 h，3 000 r/min離心10 min分離血清，將血清分裝至3個離心管中并置于-80 ℃冰箱中保存，統(tǒng)一檢測。在檢測時采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血清中MMP19、8-OHdG和CC16水平，所用試劑盒均購自杭州聯(lián)科生物科技有限公司，并嚴格遵照試劑盒說明書進行操作和質控。所有受試者入組后均采用Autospiro-507肺功能儀對其肺功能進行檢測，采用坐姿檢測受試者第1秒用力呼氣量(FEV1)、用力肺活量(FCV)，并計算FEV1/FCV。依照《職工工傷與職業(yè)病致殘程度鑒定標準:GB/T16180—2006》[5]中相關標準對患者的肺功能損傷程度進行分級評估，其中正常(13例)：FVC≥80%，F(xiàn)EV1≥80%，F(xiàn)EV1/FVC≥70%；輕度損傷(44例)：FVC 60%～<80%，F(xiàn)EV160%～<80%，F(xiàn)EV1/FVC 55%～<70%；中度損傷(29例)：FVC 40%～<60%，F(xiàn)EV140%～<60%，F(xiàn)EV1/FVC 35%～<55%；重度損傷(11例)：FVC<40%，F(xiàn)EV1<40%，F(xiàn)EV1/FVC<35%。

2 結 果

2.1塵肺職業(yè)病組患者與健康對照組血清MMP19、8-OHdG、CC16結果比較 塵肺職業(yè)病組患者血清MMP19、8-OHdG、CC16水平明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 塵肺職業(yè)病組患者與健康對照組血清MMP19、 8-OHdG、CC16結果比較

2.2不同病情進展程度塵肺職業(yè)病患者血清MMP19、8-OHdG、CC16結果比較 不同病情進展程度患者血清MMP19、8-OHdG及CC16水平存在明顯差異，隨著患者病情嚴重程度的加重，患者血清MMP19、8-OHdG、CC16水平隨之升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同病情進展程度塵肺職業(yè)病患者血清MMP19、8-OHdG、CC16結果比較

2.3不同肺功能患者血清MMP19、8-OHdG、CC16結果比較 不同肺功能患者血清MMP19、8-OHdG、CC16水平存在明顯差異，隨著患者肺功能損傷程度加重，患者血清MMP19、8-OHdG、CC16水平隨之升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同肺功能患者血清MMP19、8-OHdG、CC16結果比較

2.4MMP19、8-OHdG、CC16與病情進展程度及肺功能的關系 Logistic回歸分析結果顯示，患者血清中高MMP19、高8-OHdG和高CC16水平是影響患者疾病進展程度和肺功能的獨立危險因素，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 MMP19、8-OHdG、CC16與病情進展程度及肺功能的Logistic回歸分析結果

2.5MMP19、8-OHdG、CC16鑒別診斷塵肺職業(yè)病的診斷效能 ROC曲線結果顯示，MMP19、8-OHdG和CC16聯(lián)合檢測鑒別診斷塵肺職業(yè)病的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積(AUC)均明顯高于各指標單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 MMP19、8-OHdG和CC16鑒別診斷塵肺職業(yè)病的診斷效能

3 討 論

塵肺職業(yè)病是近年來逐漸引起人們重視的嚴重職業(yè)病之一。有研究指出，塵肺職業(yè)病的發(fā)生和發(fā)展與炎癥因子釋放量增加、炎癥細胞聚體等導致免疫應激、膠原沉積、成纖維細胞增殖、血管上皮和內皮細胞損傷等相關，且多種因素相互制約、相互聯(lián)系[6-7]。此外，有研究結果顯示，塵肺職業(yè)病與體內的自由基失衡及脂質過氧化損傷等密切相關[8]。

MMP19在健康者肺組織中呈現(xiàn)明顯的低表達狀態(tài)，但在多種肺部疾病患者體內均呈現(xiàn)明顯的異常表達趨勢，如慢性阻塞性肺疾病(COPD)、特發(fā)性肺纖維化、哮喘等[9]。有研究指出，肺組織損傷與MMP19密切相關，在COPD患者體內隨著病情嚴重程度的加重患者血清MMP19水平也逐漸升高[10]。MMP19可有效靶向血漿酶原，抑制微血管內皮細胞增生，降低毛細血管狀結構和間質表皮轉化因子磷酸化。有研究指出，MMP19可誘導過氧化物酶2促進傷口愈合，且在特發(fā)性肺纖維化鄰近纖維化區(qū)域增生上皮細胞中MMP19水平明顯增加[11]。

DNA損傷是重要的氧化損傷表現(xiàn)之一，其主要包括堿基氧化修飾、無堿基位點、DNA鏈交聯(lián)和斷裂等。其中堿基氧化修飾是最常見的DNA氧化損傷形式，由于鳥嘌呤分子軌道能級較高，當氧自由基攻擊DNA時鳥嘌呤更易被氧化，并形成8-OHdG[12]。有報道指出，通過檢測8-OHdG水平可反映氧化應激程度，8-OHdG成為最常用的生物標志物[13]。相較于脂類和蛋白質氧化損傷，DNA損傷可更為直接有效地反映體內氧化應激損傷，8-OHdG是重要的DNA損傷產物，且8-OHdG也是體內重要的致突變劑，可導致G-T和A-C突變。有研究顯示，DNA損傷也是導致塵肺職業(yè)病發(fā)生、發(fā)展的重要發(fā)病機制，且在塵肺職業(yè)病的發(fā)生、發(fā)展過程中8-OHdG可能起重要作用[14]。

CC16具有抗炎、抗纖維化、免疫調節(jié)等多種生物學活性，有研究發(fā)現(xiàn)在肺纖維化患者體內，CC16可作為潛在的生物標志物[15]。CC16主要由終末細支氣管黏膜和細支氣管的無纖毛柱狀上皮細胞合成并分泌，屬于重要的組織特異性蛋白[16]。有研究指出，CC16主要在肺組織中表達屬于內源性的肺部抗炎因子，可有效抑制磷脂酶A2活性而起到抗炎作用，且CC16可作為評估患者的早期診斷標志物[17]。

本研究結果顯示，相較于健康對照組，塵肺職業(yè)病組患者血清中MMP19、8-OHdG和CC16水平明顯升高，且隨著患者病情嚴重程度和肺功能損傷程度的加重，其血清中各指標水平也隨之升高。進一步分析發(fā)現(xiàn)，患者血清中高MMP19、高8-OHdG和高CC16水平是影響患者疾病進展程度和肺功能的獨立危險因素。對各指標的鑒別、診斷價值進行分析發(fā)現(xiàn)，MMP19、8-OHdG和CC16聯(lián)合檢測鑒別診斷塵肺職業(yè)病的靈敏度、特異度和AUC均明顯高于各指標單獨檢測。分析認為，隨著塵肺職業(yè)病患者病情進展程度和肺功能損傷程度的加重，患者體內的氧化應激狀態(tài)和炎癥狀態(tài)也明顯惡化，導致體內多種氧化應激因子和炎癥因子水平升高，進而導致DNA損傷加重，引起患者體內MMP19、8-OHdG和CC16水平升高。此外，隨著MMP19、8-OHdG和CC16水平的升高則可能進一步阻礙肺部微血管修復并加重患者DNA損傷和炎癥狀態(tài)形成惡性循環(huán)，通過聯(lián)合檢測血清中MMP19、8-OHdG和CC16水平可綜合反映和評估其體內狀態(tài)，進而可有效提高診斷和鑒別塵肺職業(yè)病的價值。

綜上所述，塵肺職業(yè)病患者血清MMP19、8-OHdG和CC16水平明顯升高，且各指標是患者病情進展程度及肺功能的獨立影響因素。但本研究并未對患者進行長期隨訪且并未分析各指標與患者長期預后的關系，有待后續(xù)深入追蹤分析。