姜黃素對人乳腺癌MCF-7 細胞抗增殖作用的探討

田麗麗，閆全志，索菲婭，趙慧英

（內蒙古自治區腫瘤醫院，內蒙古 呼和浩特）

0 引言

隨著飲食結構及社會壓力等因素，腫瘤發病率逐年上升，其中乳腺癌成為威脅女性健康的惡性腫瘤，目前治療乳腺癌的主要方法是以化學治療為主。現行的化療藥物存在毒副作用大、患者生活質量下降等缺點，因此替代化療藥物，找到毒副作用小、療效好的新型抗腫瘤藥物有必要的現實意義。姜黃素（Curcumin）是從姜黃的根莖中提取的酚性色素。近年來，諸多研究表明，姜黃素具有顯著的抗癌活性[1]，對體內及體外腫瘤的生長具有較好的抑制作用，同時可以誘導腫瘤細胞凋亡，目前已成為腫瘤預防和治療的一個研究熱點[2]。本實驗通過觀察人乳腺癌細胞MCF-7 細胞在不同姜黃素濃度作用條件下增殖抑制變化，為姜黃素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理論基礎與實驗依據。

1 內容與方法

1.1 一般資料

MCF-7 細胞購自上海生物制品研究所。姜黃素購于Sigma 公司，以少量二甲亞砜（DMSO）溶解姜黃素粉劑，配成1 mmol/L 溶液（儲備液），放置-20 ℃冰箱保存，使用時稀釋至所需濃度（DMSO 終濃度＜0.1%）。

1.2 方法

選取對數生長期且狀態良好的乳腺癌MCF-7 細胞，將細胞消化、計數，稀釋終濃度為5×l04/mL，接于96 孔板中，每孔10 μL，放入細胞培養箱中培養；待細胞貼壁后加入姜黃素，使其終濃度分別為10 μM/L、20 μM/L、40 μM/L、80 μM/L，同一濃度設定3 個平行復孔，設細胞對照組；在細胞培養箱中培養時間分別為24 h、48 h、72 h，每孔加入5 mg/mL 的MTT 15 μL，培養4 h，棄上清液，每孔加入150 μL 的DMSO，酶標儀震蕩3 min，570 nm 處檢測吸光值。

實驗結果按以下公式計算：細胞存活率=實驗組光吸收值/對照組光吸收值×100%。

藥物抑制率=(1-實驗組光吸收值/對照組光吸收值)×100%。

1.3 統計學方法

使用EXCEL 分析軟件，實驗結果以均數±標準差表示，應用t檢驗統計方法，以P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 姜黃素作用MCF-7 細胞的OD 值

對照組的細胞隨著時間的延長明顯增長，24 h 后，20 μM/L、40 μM/L、80μM/L 組的OD 值與對照組有顯著性差異（P＜0.05），10 μM/L 與對照組相比較，非顯著性差異（P＞0.05）；48 h 后，各實驗組的MCF-7 細胞均受到姜黃素的抑制，與對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；72 h 細胞抗增殖作用更為明顯，與對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05），隨著姜黃素濃度的增加，抑制作用增強，具有劑量依賴性的趨勢，結果見表1。

隨著姜黃素濃度的升高及作用時間的延長，細胞的存活率呈下降趨勢，具體見圖1。

圖1 姜黃素作用MCF-7 細胞的存活率（%）

表1 姜黃素作用MCF-7 細胞的OD 值（±s, μM/L）

表1 姜黃素作用MCF-7 細胞的OD 值（±s, μM/L）

注：a：與對照組比較，P＜0.05；b：與10 μM/L 比較，P＜0.05；c：與20 μM/L 比較，P＜0.05；d：與40 μM/L 比較，P＜0.05。

時間24 h 48 h 72 h對照組 0.942±0.029 1.456±0.065 1.696±0.063實驗組10 0.941±0.027 0.771±0.081a 0.862±0.099a 20 0.668±0.0771ab 0.717±0.044a 0.795±0.029a 40 0.557±0.042ab 0.498±0.067abc 0.493±0.108abc 80 0.416±0.072abcd 0.401±0.085ab 0.263±0.105abc組別

2.2 姜黃素對MCF-7 的細胞抑制率

不同濃度姜黃素在不同時間內對細胞的抑制程度不同，其抑制率與濃度呈正相關，與時間亦呈正相關（P＜0.05），結果見圖2。

圖2 姜黃素對MCF-7 的細胞抑制率（%）

2.3 姜黃素對MCF-7 的細胞作用不同時間的IC50 值

三個不同時間點內，MCF-7 細胞對姜黃素有劑量依賴的趨勢，其IC50值在隨著時間的延長有下降趨勢，以48h 作用點尤為明顯，具體結果見圖3。

圖3 姜黃素對MCF-7 的細胞作用不同時間的IC50 值（μM/L）

3 討論

姜黃素是從中藥姜科植物根莖里提取的化合物，能特異性的誘導乳腺癌細胞凋亡、影響乳腺干細胞以及抑制乳腺癌細胞代謝等影響，在預防乳腺癌及協同化療藥物治療方面能有效的促進細胞的凋亡。姜黃素的藥理作用很多，如具有消炎、抗氧化、抗增殖及抗腫瘤[3]等作用，抗癌譜較廣[4]、毒副作用小，是一種非常有前景的抗腫瘤新藥。本實驗研究發現，姜黃素對MCF-7 細胞具有較好的抗增殖作用，細胞存活率與濃度及時間呈負相關；不同濃度的姜黃素在不同時間內對細胞的抗增殖程度不同，其抑制率與濃度呈正相關，與時間亦呈正相關；在不同的時間點其IC50值呈下降趨勢。

綜上所述，姜黃素對MCF-7 細胞有很好的抗增殖作用，姜黃素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理論基礎與實驗依據。