微柱卡與試管法在新生兒溶血三項試驗中的應用效果

穆耶賽爾·艾尼

（喀什地區第二人民醫院，新疆 喀什）

0 引言

新生兒溶血病又被稱之為母子血型不合疾病，實質是同族免疫性溶血，這會使胎兒在母體中或出生后出現大量紅血球破壞，此類疾病是致使新生兒出現黃疸和貧血的主要原因之一，并且隨著黃疸的加重會增加病情發展，誘發呼吸衰竭、心力衰竭等表現，并且還有部分嚴重病癥者可能直接出現死胎等表現[1-2]。本次研究為了探尋溶血三項試驗的有效檢測方式特別選取2019 年10 月至2020 年10 月90 例疑似溶血病新生兒進行研究觀察，最終得到了較為科學有效的成效，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經我院倫理委員批準后，特別選取2019 年10 月至2020 年10 月于我院進行溶血三項試驗的90 例疑似溶血病新生兒作為本次研究的主要對象，其中有男48 例，女42 例，年齡為0.5～8 d，平均（4.59±0.69）d，新生兒出現黃疸、貧血以及血紅蛋白降低等疑似溶血病的表現，本次研究全部操作過程均按照嚴格的規范流程實施，在倫理委員會的監督下保證此次研究順利完成的情況下，并且確保實驗結果的規范性以及可信度，本次研究入選的新生兒家屬必須知情并簽署同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器配備

儀器：全自動血型儀器、正反定型血型試劑卡、自動判讀機、離心機、恒溫水箱以及移液器。

試劑：1% 木瓜酶、PBS 緩沖液、0.9% 生理鹽水、0.2% 半胱氨酸溶液。

1.2.2 試管法

（1）使用生理鹽水將受檢的紅細胞進行反復洗滌3 次以上配置為3% 的紅細胞懸液，取其中1 滴加入抗人球蛋白試劑，進行離心處理；（2）再另取3 支無菌干燥試管，分別滴入兩滴新生兒血清，然后分別標識A、B、O 不同試劑，放入恒溫水箱之中將溫度調節到37 ℃，大約孵育1 h 左右再使用生理鹽水進行沖洗，然后加入抗人球蛋白試劑進行離心處理后觀察。

1.2.3 微柱卡

（1）抽取新生兒靜脈血進行離心處理，將其中紅細胞進行壓積，同樣使用生理鹽水將受檢的紅細胞進行反復洗滌3次以上配置為1%的紅細胞懸液，將懸液放置于微柱凝膠孔之中，再次離心后放入自動判讀機進行判讀結果，如若紅細胞最終凝聚在凝膠帶上部則表示為（+）；（2）在微柱凝膠卡中分別加入A、B 以及O 三種紅細胞，然后加入同劑量的新生兒血清，在37 ℃的恒溫水箱中孵育15 min，最后離心觀察結果即可；（3）將洗滌4 次以上的紅細胞同等量的生理鹽水進行融合放置于干燥試管之中，在56 ℃的恒溫水箱中孵育10 min，進行離心操作后取上層清液為放散液備用，然后分別在3 個微柱凝膠之中放入等量的放散液以及A、B 以及O 三種紅細胞，再次放入37 ℃的恒溫水箱中孵育15 min，取出后進行低速離心后即可觀察性質。

1.3 效果判定

直抗實驗、放散實驗以及游離實驗均為（+）均可判定為陽性，如若檢驗結果出現差異則以放散實驗結果為診斷標準[3-4]。

1.4 統計學方法

應用SPSS 15.0 軟件包建立相關數據庫，然后進行數據計算分析，計量資料均以（±s）表示，采用t檢驗；計數資料采用（%）表示，采用χ2進行檢驗，P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

通過不同方式進行檢測后，微柱卡在直抗實驗、放散實驗、游離實驗以及ABO-HDFN 等均優于試管法，差異具有統計學意義（P＜0.05）；其他抗體-HDFN 的檢驗中兩組檢驗方式無明顯差異（P＞0.05），具體見表1。

表1 對比兩種檢驗方式不同試驗結果[n(%)]

3 討論

新生兒溶血病實質是屬于免疫性溶血性疾病之一，母體同胎兒之間的紅細胞IgG 血型不合從而誘發免疫疾病的出現，此類疾病出現的主要因素是由于夫妻血型不合或者母體同胎兒在妊娠時段中出現血液成分交換[5-6]。通常在妊娠時段病癥便會開始出現，可造成流產、死胎等表現，存活的新生兒容易出現黃疸、貧血以及智力低下等表現。

溶血三項試驗是能夠有效判斷此類疾病的方式，即是直抗實驗、放散實驗以及游離實驗，以上檢驗聯合臨床表現通常可以確診疾病。最早是使用試管抗球蛋白進行檢驗，此類檢查方式是早期應用較為廣泛的技術，但是手工操作過程較為復雜，并且容易受到血清、離心處理以及時長等多種因素的影響，并且很難反復使用，需要較多的標本用量。而微柱卡是一個固定的使用方式以及用量，很容易達到標準化的目的，對于實驗人力、物力要求相對較小，并且操作簡單容易普及，是利用凝膠顆粒對于分子進行排阻和表現，因此最終結果能夠直觀得到。并且微柱卡在一層層的檢驗操作之中極大程度避免了人為的參與，就減少影響最終結果的可能，增加了最終結果的真實性和可靠性[7-8]。

綜上所述，使用微柱卡在新生兒溶血三項試驗之中的應用效果更加明顯，操作以及判定更加簡便標準，具有極強的敏感性、特異性，連較弱的抗體都能夠顯示出，為臨床進行治療溶血疾病的過程中提供了真實有效的支持，能夠做到早診斷、早治療，值得在臨床之中廣泛應用并推廣。