牦牛常見細菌病的診斷及其防控

彭中美，尹 苗，吳 倩，向乾春，陳希文

（綿陽師范學院動物疫病防控與健康養殖工程技術研究中心，四川綿陽 621000）

1 巴氏桿菌病

巴氏桿菌病又稱牛出血性敗血病（牛出敗），主要由多殺性巴氏桿菌引起的一類細菌性傳染病的總稱。常見的家畜、家禽、野生動物和人類是巴氏桿菌感染的主要宿主[1]。人的病例罕見，且多呈傷口感染。動物急性病例以敗血癥和炎性出血為主要患病特征；慢性病例表現為結締組織、關節及各臟器的炎癥等化膿性病灶[2]。牦牛的巴氏桿菌病是一種較為常見的牦牛細菌病。秋末、春初是患病的高峰期。該病的潛伏期極其短、傳播迅速、死亡率高[3]。

1.1 臨床癥狀

牦牛感染后潛伏期一般為2～5 d。巴氏桿菌病根據具體臨床癥狀表現可分為急性敗血型、水腫型、肺炎型。其中，后兩者是在前者的基礎之上發展而來[4]。

急性敗血型巴氏桿菌病：急性敗血型巴氏桿菌病較為常見。病牛初期體溫升高至41～42 ℃、精神狀態不佳、食欲減退、動作遲緩、臥地不動、肌肉抽搐、眼結膜大片充血變紅、鼻內流出淡黃色含有血絲的膿性分泌物[5]。病程一般為1～2 d。一般情況下，牦牛來不及查清致病原因且未進行后續治療就迅速死亡[6]。

水腫型巴氏桿菌病：病牛在咽喉以及頸部發生炎性水腫是最明顯的癥狀，舌頭及周圍組織高度腫脹、呼吸異常困難、伴隨著流口水，一般會由于窒息而發生死亡，病程僅1～3 d[7]。

肺炎型巴氏桿菌病：病牛主要表現為體溫升高、咳嗽、呼吸急促，之后逐漸顯露出肺炎的體征，咳嗽時伴有痛感，嚴重時會出現頭頸前伸、張口呼吸的現象，該類型病程持續時間較長，一般超過7 d[8]。

1.2 病理變化

敗血型巴氏桿菌病：全身存在急性敗血癥變化時，患病牛皮下組織、肌肉、全身黏膜有密集出血點；在咽喉位置有明顯的急性炎性水腫特征[9]。全身淋巴結充血水腫、肺臟瘀血水腫，心外膜和心內膜出血[10]、脾出血但不腫大、胃腸黏膜出血性炎癥、肌肉有散狀出血點。

水腫型巴氏桿菌病：患病牛的咽喉水腫部位流出渾濁或黃色的液體。水腫部位可以擴展到舌根、咽喉、頸部甚至前肢的皮下組織等，切開頸部皮膚時，可見大量膠凍樣橙黃色液體。體腔內積有大量漿液纖維素性滲出物。

肺炎型巴氏桿菌病：患病牛有纖維素性胸膜肺炎，肺部會有大面積的充血、淤血以及不同程度的肝變等癥狀，肺臟切面顏色從暗紅到灰白色呈大理石樣[11]。胸膜中有大量的纖維素性的黏附物，間質間的水腫會擴張增寬，病情較為嚴重時心包與胸腔有積液。肺泡中的白細胞數量異常，并且伴隨著化膿和壞死。

1.3 診斷

根據病牛的流行性病學調查研究、發病情況、病理變化等方面可作出初步診斷評估。此類疾病確診需要實驗室進行診斷。鏡檢、細菌分離培養、分子生物學檢查以及動物接種試驗等都是常見的實驗室診斷方法。將病死牛的病變組織等帶回實驗室，制作若干的涂片，分別使用革蘭氏染色法和瑞士染色法進行固定染色[7]。通過顯微鏡可以觀察到，革蘭氏染色的涂片有大量的革蘭氏陰性的短小桿狀菌。瑞氏染色法染色涂片后有兩極濃染的小球桿菌，細菌分離培養包括觀察生長特性、菌落的形態特征（半透明黏液型菌落）、進行生化鑒定等。此菌不能在麥康凱瓊脂上生長，但在血液瓊脂平板上生長良好[12]。在試驗條件允許的情況下，可進行分子生物試驗以及動物接種試驗。

1.4 防控措施

（1）加強日常管理，牦牛巴氏桿菌病主要由各種不良因素引起。改善衛生條件，平時保持飼舍良好的衛生，舍內各種用具及時清洗消毒，細節問題尤其要注意，降低各種刺激牛應激反應發生的可能。

（2）定期帶牛群放牧，增強牛抵抗力。放牧時，應避免草場過濕，要讓牦牛喝干凈的水，時刻關注氣候的變化情況，做好牛群保暖防寒工作[9]。

（3）隔離消毒，一旦有感染病例出現，立即進行隔離，根據感染情況做進一步處理[13]。病死牦牛的尸體、排泄物要及時消毒，消毒后要進行深埋，妥善處理，不能隨意丟棄。

（4）避免病原的入侵，若必須引進新的牛種時，需隔離飼養，并觀察一個月以上。

2 傳染性胸膜肺炎

牦牛傳染性胸膜肺炎，又稱牛肺疫，俗稱“爛肺病”[13]。此病是一類嚴重的呼吸道傳染性疾病，是由牦牛絲狀支原體亞種SC 生物型霉菌所引起的[14]，主要以侵害牦牛肺部和胸膜為主。病牛常表現出漿液性肺炎、纖維素性胸膜炎的患病特征，病死率高達60%，在患病初期病牛干咳、鼻腔內有漿液流出[15]。如果沒有進行人為干預和治療，隨著時間的推移，病情加重，停止進食，呼吸急促，甚至發生窒息死亡[16]。更嚴重時，牦牛四肢關節將會發生水腫、死亡[17]。由于高原地區晝夜溫差極大，導致此病在青海省等高原地區頻發。此病的主要傳染源是病牛、帶菌牛和其排泄物。病牛康復后仍然帶有病毒，可通過飛沫接觸感染健康牦牛。發病情況和年齡、性別和季節無關。隨著養殖業的發展，傳染性胸膜肺炎的發病率呈上升趨勢，對養牛業造成重大經濟損失[18]。

2.1 臨床癥狀

牦牛傳染性胸膜肺炎潛伏期不等，短則一周，較長潛伏期可高達半年。根據其患病程度，此病可以大致劃分為3種類型：急性、亞急性、慢性。

急性型傳染性胸膜肺炎：病牛體溫可以高達40～42 ℃、咳嗽、鼻孔放大、呼吸急促、有漿液或膿性鼻液從鼻腔中流出。眼睛有大量分泌物、拒絕進食、排泄次數減少，并且伴隨著流淚[19]。后期心臟衰弱、脈搏細而無力，平均每分80～120次；胸腔積液嚴重時，進行肺部聽診，肺泡音時有時無、有胸膜摩擦音。病情惡化時，病牛胸前下部水腫嚴重、病牛表現為腹瀉便秘，呼吸極度困難，甚至窒息而死，死前體溫驟降[20]。急性型傳染性胸膜肺炎病例一般在癥狀明顯后一周左右死亡。也有病牛病勢趨于靜止，全身狀態改善、體溫下降，逐漸痊愈或轉為慢性。

亞急性型傳染性胸膜肺炎：癥狀與急性型較為類似，但病程更長，發病癥狀較緩，沒有急性型強烈明顯。

慢性型傳染性胸膜肺炎：通常是從急性型病例轉化而來，慢性患病牛病例的癥狀多數無明顯癥狀，氣溫降低時會發生偶爾干性短咳。對患病牦牛進行叩診，胸部有濁音區，且聲音大小不一[21]。雖然部分病例無明顯癥狀，但此類牦牛依然帶毒。慢性傳染性胸膜肺炎病程多數在半個月左右，延續至半年以上的病例并不常見[22]。如果飼養管理和治療得當、改善環境衛生，可以逐漸恢復[23]。成為帶菌的牦牛可長期排菌。如果飼養環境較差，則會導致病情惡化甚至傳播疾病。

2.2 病理變化

牦牛傳染性胸膜肺炎損害的是牛的胸腔和肺部。病牛在患病初期肺部患有小葉性肺炎，癥狀大多數是集中在牛的肺部右側。中期則為該病的典型癥狀，表現為漿液性纖維素性和纖維素性胸膜肺炎，是由于淋巴管擴張，產生大量淋巴組織液，導致淋巴和血液循環不暢，患病部位很快發生硬化[24]。大量的淋巴細胞壞死、肺小葉組織間隙增大，形成更嚴重的大葉肺炎；淋巴液滲出胸腔，胸腔內聚集大量由纖維素絮所形成的淡黃色渾濁滲出液，從而引起漿液性纖維素胸膜肺炎。在此過程中伴隨著不同程度的肝部病變，共同形成牦牛的典型大理石樣變[25]。在后期病牛肺部病灶嚴重壞死，結締組織增生，整個壞死病灶瘢痕化。

2.3 診斷

根據流行病學和病牛的表現癥狀，并對病牛解剖做出初步診斷，再借助實驗室診斷研究進行確診。實驗室診斷常見的技術包括分離培養鑒定、血清學診斷以及和分子生物學試驗。分離培養是目前使用較多的方法，是由于該菌在人工培養基上具有生長旺盛、生長速度快、容易分離等優點，是鑒定牦牛傳染性胸膜肺炎較有效的方法之一[26]。常見的血清學診斷方法中，敏感性較好的是酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。試驗過程中操作簡單、易于執行的是補體結合試驗。研究表明，被動血凝試驗和補體結合試驗相比較，在檢測牛傳染性胸膜肺炎過程中，前者敏感程度要高出大約20%，但是在較少發生傳染性胸膜肺炎的低風險區，此種方法檢出的假陽性率較高，易于誤判[27]。常見的分子生物學診斷方法主要包括聚合酶鏈式反應（PCR）和核酸探針。與核酸探針方法相比，聚合酶鏈式反應試驗操作簡捷、速度快、檢測靈敏度高，是目前實驗室診斷該類疾病過程中運用更廣泛的一種檢測方法[25]。核酸探針診斷方法現階段檢測手段操作過程較為困難、技術含量高，未能得到廣泛推廣，因此基本不使用此類檢測技術進行檢測[28]。

2.4 防控措施

（1）在非疫區，做到自繁自養，不從疫區引進病牛。必須引進時，要進行檢疫。

（2）加強飼養管理。在夏季，使圈舍內空氣流通順暢，加強通風管理，及時排出有害氣體，保持舍內空氣流通順暢。牦牛飼草中應添加適量蛋白質和維生素，保證牦牛能夠獲得充足的營養。

（3）制定嚴格的防疫消毒制度。牦牛傳染性胸膜肺炎對養殖業的危害較大，因此要重視其防控工作，必要時期可以成立專項防控小組，整體布局防控任務，確保防控效果。監督落實消毒工作，應在牛場構建規劃布局階段應該充分考慮消毒池的設置。日常工作中飼養人員要經過消毒才能開始工作。定期消毒牛舍、運動場以及放牧草場。對糞便和病死牦牛尸體要進行無害化處理。

（4）做好疫苗接種工作。接種疫苗是控制和消滅該病的主要措施。

（5）及時治療患病牦牛，牦牛傳染性胸膜肺炎目前無任何特效藥物能夠治療，發病早期使用四環素和鏈霉素對患病牦牛有一定的免疫抑制作用。

（6）及早組織藥防，加強對健康牛進行藥物保健。

3 沙門氏菌病（副傷寒）

牦牛沙門氏菌病，又稱牛副傷寒，主要由多種血清型的沙門氏菌（salmonella）引起。此類細菌性傳染疾病犢牛最易被感染、死亡率高。沙門氏菌在自然界中易于分離，屬于人畜共患的致病菌[29]，可以在自然環境中長時間存活，易引起食物中毒，導致人和動物產生腸胃炎或副傷寒等疾病。沙門氏菌病主要易感初生的犢牛，引起病牛發熱、腹瀉、短時間內脫水嚴重、迅速死亡。成年牦牛患病基本無明顯癥狀，但妊娠母牛患病后，會導致流產。因此，該病又稱作為“小牛瘟”[30]。該病一年四季皆可發生，但由于氣候原因，夏季更易流行，給養牛業和相關的畜牧業帶來巨大的經濟損失。

3.1 臨床癥狀

犢牛作為易感種群，通常在1周歲容易發病，潛伏期大概為7～15 d。開始發病時，體溫可高達41 ℃；1～2 d 后，體重驟降、迅速脫水、病牛開始腹瀉、排出含有血絲或黏液惡臭稀便[31]、食欲驟降、臥地拒絕走動。常在病癥出現后5～7 d死亡，死亡率高達60%。

成年牛發病后，也伴隨發熱癥狀。大部分牛在染病12～24 h 后，鼻翼擴張、呼吸急促、拒絕進食、精神萎靡不振、糞便惡臭稀薄并且含有血絲。急性病牛在發病1 d 后死亡，大部分是在1～5 d 內發生死亡[32]。少數的病牛可自行自愈恢復。病程長的病牛會出現體型快速消瘦、眼窩下陷、眼結膜變黃、關節炎和附關節發生不可逆性腫大，導致病牛跛行等典型癥狀[33]。懷孕母牦牛會發生流產，從流產胎兒中可以分離出沙門氏菌。

3.2 病理變化

對死亡病牛進行實驗室剖檢，可以觀察到病牛的胃和腸道癟平無內容物，淋巴結水腫、充血，大腸黏膜發生大片脫落、出現壞死區域，脾臟出現不同程度的充血、水腫[31]。有部分急性病例可見看到病牛的胃、胸腔內壁、小腸以及膀胱黏膜有細微的出血點。病程較長的牦牛病例，可以看到肝臟的色澤異常、膽汁黏稠。肝、脾和腎臟等區域都出現壞死性病灶。牦牛關節受到嚴重損害，關節腔里有膠體樣液分泌[33]。流產的母牦牛胎盤出現水腫、出血，子宮內充血、腫脹，有大量壞死的組織。

3.3 診斷

根據流行病學和病牛的表現癥狀，做出初步診斷，確診要采集病料送到有相應檢測能力的實驗室進行檢測[34]。實驗室診斷方法包括鏡檢、細菌分離培養、PCR 檢測等。采取患病牦牛肝肺等器官制作涂片，革蘭氏染色，進行鏡檢，可以觀察到沒有形成芽孢和莢膜的兩端橢圓的革蘭氏陰性短桿菌[35]。細菌分離培養，用鮮血平板培養基在37 ℃條件下培養24 h，培養基上長出濕潤、邊緣整齊、周圍無溶血的小菌落。

3.4 防控措施

（1）加強流行病學調查、檢測以及病原的診斷，按時可以對牦牛群進行檢查，及時檢出帶菌牦牛并進行隔離治療。

（2）做好生物安全工作，給牦牛注射的針頭等器具禁止一針多用，防止病原的機械性傳播，一次性用具要及時清理。

（3）加強藥物預防，在本病高發的地區，可進行定期預防用藥。但在用藥過程中應注意劑量，分配要合理，每間隔一段時間內，需更換藥物，避免產生依賴性，降低藥效[36]。

（4）給牦牛提供單獨舍圈，不要多種動物混養，造成疾病的交叉感染，增加患病概率。

（5）妊娠母牛的環境要格外注重，對母牦牛加強飼養管理工作，喂養蛋白質含量豐富的飼料。

（6）處在康復期的牦牛需隔離飼養，是因為即使是康復期的牦牛，排泄物和分泌物仍然含有具有活性的病原菌，病原菌會污染飼料、飲水、環境，進而間接傳播本病。

4 展望

牦牛細菌性傳染病還有很多，但以上是牦牛最常見和易感的3種細菌傳染性疾病。控制好這些常見傳染病對提高牦牛產業生產水平、降低疫病損失和保障人民健康等具有重要的現實意義。但隨社會的發展，環境污染、土壤污染和水污染等日益嚴峻，牦牛感染各種傳染疾病的概率也急劇上升。因此，需要采取科學嚴格的凈化和防治措施，并加強對病例的監測和研究，通過科學技術手段為牦牛產業的提質增效和持續健康發展保駕護航。