楊小芹,尹 苗,吳 倩,陳希文
(綿陽師范學院動物疫病防控與健康養殖工程技術研究中心,四川綿陽 621000)
牦牛的疫病種類多,不同的疫病之間存在緊密聯系。繼發感染或同時感染使防治工作的開展比較困難。很多養殖戶在牦牛的日常管理中存在諸多不足,如沒有制定完善的管理制度、對牦牛的生活環境衛生有所疏忽等,增加牦牛患各種病毒性疾病的風險。養殖人員除了做好牦牛的日常管理工作,也要注重對牦牛各種常見病毒病防控的理論知識的學習,將判斷失誤和處理不當造成的損失降到最低。文章對牦牛日常的病毒病的診斷及其防控進行綜述。
口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種傳染病。該病發病急,可接觸性傳播,是偶蹄動物常患疾病之一,同時也屬于一種人畜共患病,對公共衛生安全有極大影響。OIE 將該病列為A 類傳染性疾病。FMD 具有傳播速度極快、危害范圍極廣的特點,對犢牛的危害較為嚴重,病死率在70%左右,給養殖業造成極為嚴重的經濟損失。
FMD 的潛伏期一般為1~4 周。病牛在患病初期出現高熱、體溫升高至40~41 ℃、進食量減少或不進食、口角流涎等,此期間病牛的排毒量達到最大,毒力也最強[1]。隨著病情的加劇,在病畜的口腔、乳房、蹄部等部位會出現大小不一的水皰,此癥狀和水皰性口炎引發的癥狀類似,極難區分。水皰破裂后形成邊緣比較規則的潰瘍面,呈紅色。之后,成年牛的體溫逐漸恢復至正常水平,潰瘍面漸漸好轉,病程約為1 周,死亡率低于2%。而幼畜在上皮組織修復的過程中,常會出現病情突然惡化、反芻停止、肌肉戰栗、無法正常行走、食欲喪失、心律不齊等癥狀,最后因出血性腸炎或心肌麻痹而死,死亡率高達70%。
良性口蹄疫病畜常呈良性經過,極少死亡。主要病變部位為皮膚,可見其皮膚黏膜的棘細胞出現腫大的現象,形狀逐漸變圓。細胞的排列變得比較疏松,細胞間常積累漿液。隨著病情的嚴重,棘細胞腫大并逐漸壞死,最終完全溶解形成小泡狀體。
惡性口蹄疫多數是由于病畜抵抗力弱或病毒致病力強所致的急性病例,口腔病變不明顯,多數無水皰或糜爛病變,所以診斷較困難。心肌主要表現為柔軟、出現灰白色的條紋、觸診松軟如煮熟般[2]。鏡檢時可見心肌纖維腫大,有明顯的顆粒變性與脂肪變性,病情嚴重時呈蠟樣壞死并斷裂,崩解為碎片狀。骨骼肌的病變與心肌變化相似。
口蹄疫癥狀明顯,一般可以做出初步診斷。但由于水皰性口炎也會引發相似的臨床癥狀,口蹄疫病毒類型諸多,要確定具體的病原類型,需要通過實驗室技術進行確診。可取病畜病變部位的水皰皮或水皰液,置于50%甘油生理鹽水中,迅速進行補體結合反應;或者可以采取病牛康復期的血清,進行乳鼠中和試驗,鑒定出病毒的類型。
(1)保持牛舍衛生,為牦牛提供潔凈、舒適、干燥的環境。圈內經常通風換氣,避免過度擁擠,定期用燒堿等消毒。
(2)根據牦牛的養殖時間和年齡定期接種疫苗。
(3)做到早發現早隔離早治療的原則,一經發現感染此病,要全面封鎖疫區、徹底消毒、禁止外來人員隨意進出疫區、盡早遏制病毒蔓延。
(4)隔離、封鎖、消毒后,立即聯系獸醫前來治療,采取新鮮水皰皮或水皰液送實驗室進行病毒鑒定,在此期間做好牦牛飼養管理[3]。
牛瘟被國際公認為牛的主要病害,是由牛瘟病毒所致的傳染病,具有急性、高度接觸性、化膿性等特征。早在17 世紀的歐洲,該病在牛群中大范圍傳染,導致2 億頭牛死亡。牛瘟發病率高、傳染率高、影響范圍廣,被OIE列為A 類傳染病。牦牛為較易感染的對象,此病的發病率100%,病死率高達90%[4]。
牛瘟的潛伏期一般為3~9 d,臨床癥狀包括典型性和非典型性。典型性的癥狀為在患病初期病畜突然高熱,體溫達40 ℃以上、精神不佳、進食量減少或不進食、反芻停止;眼結膜腫脹、潮紅并分泌出膿性物質;口腔黏膜壞死、唾液分泌增加、可見氣泡或血絲。最初在病畜的下唇或齒齦等部位可見有堅硬、灰色的小顆粒,之后變成水泡狀;鼻鏡干燥且龜裂、有棕黃色痂皮,痂皮脫落之后形成邊緣不規則的鮮紅色爛斑;便干而黑、惡臭帶血,尿少色深[5]。非典型性癥狀則為少數牛在病初異常興奮、時常搖頭、帶有攻擊性。發病后的2~3 d,病牛的乳房或陰囊部位有很小的點狀出血現象。腹瀉時,股內、會陰和口鼻等部位出現丘疹和膿皰,之后便會破裂形成棕黃痂塊,最終脫落。
牛瘟的病理過程包括4個階段,即潛伏期、初期、黏液分泌期及恢復期。初期和黏液分泌階段表現出的癥狀最為明顯[6]。患病牦牛消化道黏膜有出血甚至是壞死,口腔、皺胃和大腸黏膜出現纖維素性壞死性假膜和出血性爛斑。回盲瓣腫脹,并有出血現象;盲腸內形成深紅色血塊;腎臟、膀胱、直腸等也有腫脹現象[7],與腸道相關的淋巴組織嚴重受損。
此病的臨床癥狀表現明顯,可以初步做出判斷。但由于牛惡性卡他熱等疾病的臨床癥狀和此病的癥狀極其相似,則需要借助實驗室交互免疫試驗的方法進行確診。取病牛新鮮的淋巴結和脾臟,研磨制成稀釋液,然后接種到健康兔體內,2 周后再接種牛瘟兔化毒,確定病毒情況,此方法是目前檢測牛瘟病毒的最佳辦法。
(1)為了防止牛群染上牛瘟病毒,養殖戶一定要對牛群接種疫苗,常見的疫苗包括牛瘟兔化疫苗、牛瘟綿羊兔化疫苗等。
(2)牛舍經常通風換氣,避免潮濕,對于病畜活動過的場所和使用過的器具進行徹底消毒。
(3)一經發現牦牛患病,及時封鎖疫區,將病牛和健康牛分開喂養,禁止疫區物品隨意帶出和外來健康牛進入疫區,制止疫情的擴大。
(4)立即請獸醫前往疫區進行診治,對病死牦牛進行無害化處理。
牛病毒性腹瀉(BVD)由牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)引起,可感染牛、羊、豬等多種家畜,又稱為牛病毒性腹瀉-黏膜病。病畜常出現腹瀉、繁殖障礙、免疫機能障礙等癥狀。BVD 發病率高,每年由BVDV 所導致的牛死亡數在500 萬頭左右[8]。近年來,我國的BVDV 感染情況逐漸增加,因此養殖人員應該引起高度重視,及時采取預防措施。
根據牛病毒性腹瀉的發病情況可將該病分為急性型和慢性型。急性型病初體溫上升至40~42 ℃、進食量減少、呼吸急促;口角流涎,呼出的氣體具有惡臭味,鼻鏡、舌、齒齦、腭、口腔黏膜充血并有潰瘍;之后出現腹瀉現象,糞便由水樣轉化為黏稠狀、帶有氣泡,甚至帶有血液或腸黏膜;幾天后,病畜便因機體大量脫水而死。慢性型不出現明顯的體溫上升現象、發病周期延長、死亡率升高、出現鼻部潰爛出血、眼角分泌物增加、牙齦充血但不潰爛、表現出間歇性腹瀉、腳趾皮膚潰爛、跛行、淋巴組織不腫大、頸部和耳部后面潰爛[9]。若患病母牛處于妊娠階段,將導致流產,犢牛也會患上先天性疾病。
將病死牛剖開后,可在其鼻鏡、舌頭兩面、齒齦、咽喉等部位發現有形狀不一的爛斑和不同程度的充血或出血現象,氣管黏膜表面有膿性分泌物。肺臟水腫、出血,腸系淋巴結腫大,腸黏膜可見有出血、壞死以及潰瘍等現象,空腸和回腸有斑點狀出血,盲腸和大腸末端有條紋狀出血[10]。
牦牛腹瀉的病因復雜,不能單憑其臨床癥狀進行確診,且該病的臨床癥狀和口蹄疫、水皰性口炎有相似之處。診斷時通常還需要對其血清和糞便進行檢測,常用的檢測方法有病毒分離、血清中和、ELISA、RT-PCR 以及免疫熒光等試驗,確定病因之后要對病畜及時進行治療。
(1)健全生物安全體系。為牛群打造干凈適宜的生活環境,養殖密度適中,對牛群經常活動的區域要進行嚴格地消毒,畜舍內保證新鮮空氣的供給。
(2)定期免疫接種,嚴格落實免疫接種計劃。
(3)目前暫未研制出治療牛病毒性腹瀉的特效藥可治療,臨床上主要采用收斂止瀉、清腸補液的原則進行對癥治療。
(4)一旦確診該病,要立即撲殺病牛和無公害化處理,對病牛活動過的區域以及用過的器具進行徹底地消毒。封鎖疫區,以防疫病蔓延。
藍舌病(BT)是由藍舌病病毒(BTV)引起的一種非接觸性、以昆蟲(庫蠓)為傳播媒介的急性傳染病。BT 的特征性病理變化為舌頭充血呈青紫色,因此被命名為藍舌病。若病畜處于妊娠期可導致流產或死胎現象。該病一旦流行,傳播速度快、死亡率極高、不易消滅,很難得到有效控制,被OIE 劃為A 類疾病,是必須通報的疾病之一。我國于1979年首次在云南的綿羊中發現該病。
該病的潛伏期為3~8 d。病初體溫急劇升高,達到40 ℃以上。口角流涎,口唇、面部水腫,眼角有淚痕,口鼻部位有出血現象,接著轉化為淤血。不久后,這些組織會出現壞死性結痂面,脫落形成較淺的潰瘍面。眼結膜充血、腫脹或外翻。隨著病情的加重,病畜舌充血呈青紫色、口腔黏膜糜爛、有惡臭味、鼻腔出現炎癥、病牛呼吸困難、睡覺時有鼾聲、偶爾因蹄部出現炎癥造成不同程度的跛行。如果壞死部位在食道中,則會引起食道麻痹,使食道喪失括約力,病畜吃下去的食物可能會通過口、鼻倒流出來,很容易在呼吸時誤吸入肺,引起肺炎[11]。
牦牛感染藍舌病后,在其口腔、瘤胃、心臟、皮膚等部位均會發生病變。可見病牛的口腔糜爛、唇內側和舌面表皮脫落;在淋巴結、鼻腔、消化道黏膜表面可看到明顯的水腫現象,有時還會出現充血、出血、糜爛等癥狀。瘤胃內可觀察到顏色較暗的紅色區域,表面有空泡變性甚至是壞死。心臟內皮壞死導致血管閉塞、肺泡嚴重水腫、脾臟腫大、腎有輕微發炎現象。真皮充血、出血和水腫。蹄部有時會出現蹄葉炎[12]。
牛藍舌病的實驗室診斷方法有多種,其一是病原學診斷,將病畜的白細胞接種于細胞中,如果細胞發生病變,再將培養物與已知標準陽性血清進行中和試驗,便可以判斷出是否為藍舌病。第2種是血清學診斷方法,主要包括補體結合、酶聯免疫吸附、免疫熒光、病毒中和試驗等。第3 種方法是借助PCR、RT-PCR、核酸分子雜交技術、寡聚核苷酸指紋圖譜分析、基因芯片檢測技術等方法進行確診。
(1)做好牛舍的清潔、消毒工作。牛舍經常通風換氣,保證新鮮空氣的供給。禁止將發霉變質的草料喂食牦牛,加強對牦牛的訓練,增強身體的抗病能力。
(2)制定免疫接種計劃,定期接種。
(3)禁止從病區引進牛,做好國內疫情監控和防治工作,對需要進行人工授精的精液進行嚴格的檢查,降低染病概率。
牦牛傳染性鼻氣管炎又名紅鼻病或傳染性壞死性鼻炎,由牛傳染性鼻氣管炎病毒感染引起。此病發病率高,傳染性強,在20~60 日齡的犢牛中易感性最強,致死率較高,對牦牛的正常采食和健康成長造成極大的威脅。此病發病突然,傳播速度非常快,一旦出現,整個牛群都將染上此病。此病不易根除,將會在環境中長久存在。
牦牛傳染性鼻氣管炎的潛伏期一般為4~6 d,臨床上主要分為呼吸系統型、生殖系統型、流產型、眼結膜炎型等。
呼吸系統型:牦牛精神狀態日漸下降、食欲下降、反芻減弱。眼角出現清澈分泌物、眼結膜潮紅、鼻腔黏膜充血或壞死、分泌清澈黏性鼻液。口角流涎、呼出惡臭氣體、呼吸困難,患病母牛產乳量下降。
生殖系統型:母牛主要出現排尿頻繁且疼痛難忍,可在其陰道表面觀察到很多散在的灰黃色顆粒大小的膿包,膿包破裂后從陰道中流出大量膿性分泌物。公牛主要表現為龜頭炎、包皮炎、陰莖潰瘍病變、精囊腺出現壞死性病變[13]。
流產型:母牛在妊娠階段染上此病后極易出現早產或胎死腹中的現象。
眼結膜炎型:病畜在患病初期眼瞼出現水腫、眼結膜嚴重充血、角膜輕度渾濁。病情嚴重后,在病畜的眼結膜上可觀察到針頭大的灰黃色顆粒,致使眼瞼黏著與眼結膜外翻[14]。
此病以鼻腔和呼吸道為主要病變部位。可以觀察到病畜鼻黏膜潮紅、鼻甲骨上出現大量壞死病灶。氣管內有大量黏性液體、氣管壁上有大量出血點。肺臟水腫,切開后會發現有大量泡狀液體。肝臟腫大,可見有灰白色或灰黃色的壞死病灶,分布疏松。十二指腸、空腸、回腸有出血現象[15]。母牛陰道有充血現象,分泌灰黃色黏性液體。公牛龜頭發炎,陰莖潰瘍病變。
此病在診斷時要與牛流行熱和巴氏桿菌病相區別。因此,通過其臨床癥狀只能做出初步判斷,此后可用鼻腔拭子無菌采集鼻腔膿性分泌物或采集其他病變組織進行病毒分離、病毒中和、ELISA 及其他分子生物學技術等進行檢測。
(1)此病暫未研制出治療的特效藥。因此,預防工作變得極其重要。養殖戶應嚴格按照計劃進行免疫接種,保證機體內的抗體水平達到標準。
(2)重視牦牛的飼養管理工作。
(3)在治療過程中,需要結合實際情況,并遵循抗病毒、防止脫水、預防繼發感染的原則。
牛輪狀病毒病是由呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬的成員引起的急性腸道傳染病,屬于一種人畜共患病。能夠引起新生犢牛腹瀉的病原種類諸多,輪狀病毒就是其中之一,由輪狀病毒引起的發病率在60%~80%,死亡率在30%左右[16]。目前,仍未發現有特效藥可以對該病進行治療。一旦環境條件適宜,將會引起該病的暴發或流行。
此病常在天氣變化大的季節出現,發病突然,以7日齡的牦牛為易感對象。病初病畜表現為精神狀態不佳、口角流涎、采食量下降、不愿站起。隨著病情的加劇,病畜眼睛凹陷、腹瀉現象逐漸明顯,出現白色或者黃白色的黏稠狀糞便,有時還會在糞便中觀察到血液,四肢乏力,大量脫水。如果不進行及時治療,病畜會因心力衰竭、代謝性酸中毒而死亡[17]。
幼齡牦牛感染輪狀病毒后,病變部位主要在小腸,腸壁變得菲薄,顏色呈半透明,可見灰黃色或者灰黑色的物質,有時也會出現小腸出血、腸系膜淋巴結腫大的現象。小腸絨毛細胞遭受破壞,絨毛萎縮、隱窩細胞增生,并逐漸取代原來的小腸絨毛細胞,導致小腸絨毛細胞的吸收功能失去平衡。此外,在胃內積累有凝乳塊和乳汁。
由于多種病毒、細菌等都會導致犢牛腹瀉,給診斷帶來很大的難度。通常用于輪狀病毒的檢測技術包括免疫電鏡、乳膠凝集反應、酶聯免疫吸附、聚丙烯酰胺凝膠電泳、反轉錄-環介導等溫擴增、RT-PCR、實時熒光定量PCR、多重PCR 等,但這些技術對儀器設備的要求通常較高,很難在臨床上進行推廣。
(1)該病毒主要侵害剛出生不久的牦牛。因此,多采用被動免疫的方法,牦牛出生后盡早讓其吃到初乳,母乳中的抗體可以對其進行保護。
(2)加強飼養管理,特別是剛出生的幼畜,免疫力都比較差,需要悉心照顧,保證其生活在一個溫馨、舒適的環境中。
(3)對于已經虛脫或者嚴重失水的病畜要及時補水,但是要注意防止酸中毒。
(4)接種疫苗在很大的程度上能夠有效地保護牦牛不受到輪狀病毒的侵害,目前推薦使用的疫苗主要有滅活疫苗和減毒活疫苗。目前,該病疫苗的研究還面臨著巨大的挑戰,特別是安全性問題,既要保護牦牛不感染上輪狀病毒,又要保證不發生腸套疊等問題[18]。
牛凸隆病毒病是由牛凸隆病毒(BToV)引起的一種主要導致犢牛腹瀉的病毒病。BToV 屬于套式病毒目、冠狀病毒科、凸隆病毒屬的成員。該病毒于1982年首次在美國的腹瀉犢牛糞便中分離得到,以前人們稱之為布雷達病毒,其基因組為28.475 kb。
該病毒通常感染2~5日齡的犢牛。病牛常出現腹瀉、虛弱無力、食欲下降、站立困難或不能站立等癥狀。
犢牛感染該病毒后,在空腸、回腸以及結腸的遠端半部的上皮均可能發生病變;小腸絨毛下半部的腸細胞出現壞死和絨毛萎縮,小腸底部細胞出現空泡變性、壞死和脫落,腸絨毛融合和萎縮。有些細胞還出現腔網擴張、高爾基體腫脹、線粒體退化或者消失等現象。
目前,檢測該病毒的技術包括血凝抑制、酶聯免疫吸附、血清中和、放射免疫沉淀以及免疫電鏡等。這些方法各有其優缺點。隨著分子生物學技術的發展,檢測的敏感性、特異性等都有很大程度的提高,但這些技術對儀器的要求非常高,不適合于臨床檢測。
目前,國內對牛凸隆病毒的研究還比較少,暫無人對該病毒的防控措施做出闡述,關于該病的治療方法也暫無報道。因此,養殖戶在日常生活中一定要加強對牦牛的飼養管理,如不能將發霉變質的飼料喂食牦牛,保證其生活環境的質量,降低牦牛的發病率。
牛腸道病毒病是由牛腸道病毒(BEV)感染引起的一種傳染病。BEV 是小核糖核酸病毒科、腸道病毒屬的成員,該病毒在我國的牛群中普遍存在。該病毒于2011年首次在內蒙古腹瀉的牦牛中分離得到。此后其他各地相繼分離出不同基因型的BEV。該病毒通常會和其他病毒一起混合感染或繼發感染,進而引起牛多種疾病的暴發,造成極高的致死率。目前,對BEV 的研究仍處于起步階段,對其致病機理和病理變化仍不清楚。
牛環曲病毒病是由牛環曲病毒(BToV)引起的一種導致牛腹瀉的傳染性疾病。BToV屬于冠狀病毒科環曲病毒屬,其基因組為大小約25~30 kb 的單股正鏈RNA[19]。1979年,美國首次分離鑒定出BToV,之后再全球范圍內從腹瀉犢牛糞便中檢測出2.9%~36.4%的BToV[20]。牛感染環曲病毒后,會引起腹瀉和呼吸系統疾病,排黃、白色半固體或大量水樣稀糞。與冠狀病毒相似,BToV 引起犢牛腹瀉可能是病毒感染造成腸道吸收不良或體液分泌過多所致。目前,我國對BToV的研究處于早期,很多問題尚未解決,需要加大研究力度。
牛諾如病毒病是由杯狀病毒科、諾如病毒屬的成員牛諾如病毒(BNoV)引起的一種犢牛腹瀉病。BNoV 是一種單股正鏈RNA病毒,基因組全長7.3~7.5 kb,能引起人和多種動物的腸道胃腸炎[21]。該病毒首次在英國的犢牛腹瀉糞便中被發現,此后在其他國家也相繼出現,我國于2017年首次檢測出該病毒,因此BNoV是國內引發犢牛腹瀉的新發病原。牛感染BNoV后會出現吸收不良、精神不振、輕度腹瀉、短暫性厭食等臨床癥狀,3 周齡的犢牛比新生犢牛發病嚴重。目前,還沒有合適的細胞類型用于培養BNoV,健康牛的腸道也可攜帶BNoV。因此,BNoV 對犢牛腹瀉的致病機制尚不清楚[22]。
牛庫布病毒病是由牛庫布病毒(BKoV)引起的一種可能導致牛腹瀉的疾病,該病毒首次是在胎牛血清中被發現,后來在泰國、韓國、比利時、匈牙利、荷蘭、意大利、巴西等國家都有牛感染該病毒的報道[23]。目前,該病毒只在日本被分離得到。有學者對我國遼寧、河南、青海、西藏和四川等的牦牛腹瀉樣本進行檢測。結果發現,其中幾個養殖場牦牛腹瀉樣本中BKoV 的檢出率較高,表明可能存在BKoV 的流行[24]。國內對BKoV 的檢測技術仍不成熟,學者們在努力探索一套有效、快速地檢測體系以促進BKoV的后續研究。
在養殖過程中,牦牛常染上各種疫病,給臨床診斷與防控增加極大的難度。為解決這一難題,需要制定一套完整的管理方案。當前在國內牦牛的某些病毒病研究處在初級階段,不清楚其致病機理,也未研制出相應的疫苗和特效藥,因此需要加大研究力度和投入。