血清白細胞介素-8、環氧化酶-2、血管內皮生長因子-A水平變化與三陰性乳腺癌患者術后復發的關系及臨床意義

張露文

(焦作市第二人民醫院 甲狀腺乳腺外科，河南 焦作 454100)

三陰性乳腺癌的免疫組織化學檢查孕激素受體(progesterone receptor，PR)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)、原癌基因HER-2均為陰性，遠處轉移風險較高，預后較其他類型的乳腺癌差。乳腺癌發病呈年輕化，嚴重危害女性的身心健康。臨床多采用手術切除病灶治療，但癌細胞易脫落、游離，隨著血液、淋巴液擴散，形成遠端轉移。研究發現，乳腺癌細胞增殖、凋亡與某些細胞因子密切關系，其中白細胞介素-8(interleukin-8，IL-8)、環氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、血管內皮生長因子-A(vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A)在乳腺癌發生、發展過程中起重要作用[1-3]。本研究分析血清IL-8、COX-2、VEGF-A水平變化與三陰性乳腺癌患者術后復發的關系及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料將2017年3月至2018年9月焦作市第二人民醫院收治的67例三陰性乳腺癌患者納入乳腺癌組，將64例乳腺良性腫塊患者納入對照組。患者及家屬均簽署知情同意書。對照組：年齡22～46歲，平均(33.93±4.90)歲；體質量45～68 kg，平均(56.31±4.61)kg；良性腫塊病程1.0～5.5 a，平均(3.24±1.11)a。乳腺癌組：年齡22～48歲，平均(34.81±5.19)歲；體質量45～67 kg，平均(55.82±5.07)kg；乳腺癌病程1.5～6.0 a，平均(3.51±0.99)a；國際抗癌聯盟TNM分期Ⅰ期14例，Ⅱ期31例，Ⅲ期22例。兩組年齡、體質量、病程比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經焦作市第二人民醫院醫學倫理委員會審批通過。

1.2 選取標準(1)納入標準：①經病理學檢查、免疫組織化學檢查確診為三陰性乳腺癌；②臨床資料完整；③無手術與麻醉禁忌證，有手術治療指征，能耐受手術者；④能正常交流者。(2)排除標準：①合并其他惡性腫瘤者；②嚴重心肺功能不全者；③合并其他免疫系統、血液系統疾病者；④嚴重精神、心理疾病致認知、語言功能障礙者；⑤妊娠期、哺乳期婦女；⑥有乳腺手術史或既往有乳腺腫塊史者。

1.3 手術方法和病理檢測兩組術前均進行常規檢查，均未發現轉移灶。根據三陰性乳腺癌的臨床分期，對乳腺癌組患者采取改良根治術、保乳術治療。對照組患者接受微創手術切除腫塊。術后由病理科對患者腫瘤大小、性質、淋巴結狀態行病理檢查。使用中性甲醛固定患者病理標本，石蠟包埋，然后連續切片4 μm厚，使用免疫組織化學染色SP法檢測，嚴格按照說明書進行操作。以PBS代替一抗作陰性對照，已知陽性切片為表達陽性對照。IL-8陽性：連續選取20個高倍視野，光鏡下細胞質見棕黃顆粒，陽性細胞數占比>25%。COX-2陽性：細胞質內或核膜有棕黃色顆粒，陽性細胞數占比(5個高倍視野)>5%。VEGF-A陽性：細胞質呈現棕黃色顆粒，選取4個視野，陽性細胞>10%。

1.4 觀察指標分別于術前、術后3 d清晨抽取患者空腹靜脈血5 mL，以3 000 r·min-1離心5～10 min，取上清液，-20 ℃保存，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測COX-2、IL-8、VEGF-A水平。所用酶標儀來自美國MD公司，試劑盒來自上海依科賽生物制品有限公司，嚴格按照操作標準檢測。統計乳腺癌組1 a內復發情況，并于1 a后再次檢測乳腺癌組患者的血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平。

2 結果

2.1 血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平術前，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于對照組(P<0.05)；術后3 d，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)；術后3 d，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平低于術前(P<0.05)；術后3 d，對照組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平與術前比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組手術前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比較

2.2 復發者與未復發者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平術后1 a，乳腺癌組復發4例，未復發63例。術后3 d、術后1 a，復發者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于未復發者(P<0.05)；復發者術后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于術后3 d(P<0.05)。見表2。

表2 復發者與未復發者術后3 d、術后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比較

3 討論

乳腺癌屬于常見的惡性腫瘤，三陰性乳腺癌為其中一種分型。與其他類型的乳腺癌相比，三陰性乳腺癌遠處轉移率較高，主要表現為晚期階段易出現肝轉移、肺轉移，影響患者的生存質量。三陰性乳腺癌的發生、進展受各種因素的影響，如細胞增殖、凋亡過程紊亂，或腫瘤周圍微血管的形成。腫瘤細胞增殖、凋亡與機體某些細胞因子有重要聯系。

三陰性乳腺癌浸潤、轉移的先決條件為血管新生。本研究結果顯示，術前乳腺癌組血清COX-2、IL-8水平高于對照組，術后3 d乳腺癌組血清COX-2、IL-8水平低于術前。這表明三陰性乳腺癌患者體內血清COX-2、IL-8呈高表達狀態，而手術切除癌組織后機體血清COX-2、IL-8水平降低，提示血清COX-2、IL-8可反映手術治療效果。COX-2可刺激癌細胞增殖和血管生成，抑制宿主免疫功能，為腫瘤生長提供優勢條件，增強癌細胞的侵襲力[4-5]。IL-8可與細胞表面趨化因子受體1(CXC-chemokine receptor-1，CXCR1)、趨化因子受體2(CXC-chemokine receptor-2，CXCR2)結合發揮生物學效應，而CXCR1、CXCR2存在于癌細胞和新生血管內皮細胞中，IL-8與CXCR1、CXCR2結合后能促進癌細胞增殖及血管生長[6]。除免疫抑制外，乳腺癌發生發展的另一關鍵為血管、淋巴管新生。VEGF-A為血管內皮細胞特異性有絲分裂原，可作用于血管內皮細胞，促進癌細胞增殖；提高血管通透性，導致血漿蛋白滲漏到血管外，形成纖維蛋白凝塊，以此作為新生血管支持物。因此，VEGF-A反映了癌組織血管生成能力，是目前特異性最高、作用最強的血管調控因子。本研究結果顯示，術前乳腺癌組血清VEGF-A水平高于對照組，術后3 d乳腺癌組血清VEGF-A水平低于術前。這表明VEGF-A參與三陰性乳腺癌的發生和進展過程。腫瘤的生長必須有新生血管形成為腫瘤細胞提供足夠營養。隨著癌細胞的分化，VEGF-A會呈現高表達，說明VEGF-A水平可提示患者預后情況[7-9]。本研究結果表明，三陰性乳腺癌術后復發者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平可升高且處于持續升高狀態，提示定期監測血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解手術預后與腫瘤進展情況，預測復發風險。

三陰性乳腺癌患者手術前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A變化顯著，可據此判斷手術效果。監測三陰性乳腺癌患者術后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解預后，預測復發風險。