氣相色譜-質譜法檢測添加在餅干、巧克力、糖果中的△9-四氫大麻酚成分

張啟福 鄒曉莉 胡書豪 康 倫

①四川大學華西公共衛生學院 ②四川鼎誠司法鑒定中心 ③成都海關緝私局

本文建立了檢測餅干、巧克力、糖果中△9-四氫大麻酚成分的GC/MS分析方法。實驗過程中優化了色譜條件，并對提取溶劑進行了考察。樣本經溶劑提取離心后，采用DB-17MS毛細管色譜柱程序升溫分離，EI離子源、全掃描模式（SCAN）進行檢驗。在線性范圍內的相關系數R>0.999，方法檢出限為0.15 μg/g，樣品加標回收率為82%～105%。應用本方法成功檢出了案件中目標成分，該方法適用于巧克力糖果等復雜食品基質中添加大麻成分的快速鑒定。

大麻有鎮靜和興奮功能，在醫學上可用作止痛劑，大麻中精神活性最強成分為△9-四氫大麻酚，吸入大麻后會引起心理變化，對時間、空間發生錯覺，同時對機體的平衡功能發生損害，濫用嚴重者還會導致中毒性精神病的發生[1]。近年來，隨著快遞行業的快速發展，國際郵政服務的質量與效率顯著提升，這不僅給人們的生活帶來便利，也推動了國民經濟的發展，同時販毒人員深諳寄遞企業的監管漏洞，采取匿名投遞、虛實相間等方式大肆進行毒品走私販賣活動[2]，但將毒品添加在食品中進行走私販賣的情況較為少見，且添加在糖果、巧克力中后易流向青少年群體，對社會危害巨大。

已報到的檢測△9-四氫大麻酚的方法有氣相色譜質譜法、反相高效液相色譜法、液相色譜質譜法等[3-6]，上述報道中的方法檢測對象主要為尿液、火麻食品等[7-8]。將毒品加入食品中更具有隱蔽性，而在復雜基質中進行毒品分析具有一定的挑戰性。本文在方法[9]基礎上，對色譜條件和樣品前處理條件進行了優化，成功檢出了△9-四氫大麻酚成分。

1 案例

1.1 簡要案情

2018年，四川某海關駐郵局辦事處對來自加拿大的SPS快遞包裹查驗時發現其中10個包裹異常。因辦案需要，委托方委托我中心對送檢檢材（見圖1）中是否含有△9-四氫大麻酚成分進行檢驗鑒定。

圖1

1.2 現場初步勘察

海關人員在工作中發現郵包中疑似含有大麻成分的餅干、糖果及巧克力，隨即依法扣留，抽樣送檢進一步確認。

2 材料與方法

2.1 主要儀器與試劑

氣相色譜/質譜儀（GCMS-QP2020，SHIMADZU，日本）；△9-四氫大麻酚標準品（THC，純度＞99%，Cerilliant公司），SKF525A（純度＞99%，Aladdin公司），實驗所用甲醇、乙醇、乙腈均為色譜純，購自成都市科隆化學品有限公司。實驗用水均為超純水（18.2 MΩ·cm）。

2.2 溶液配制

精密稱取SKF 525A對照品50.0 mg，用甲醇配成1.0 mg/mL的內標儲備溶液，置于冰箱中冷凍保存，保存時間12個月。將內標儲備液用甲醇稀釋5倍，得200 μg/mL 的內標工作液，置于冰箱中冷藏保存，保存時間3個月。

2.3 色譜質譜條件

DB -17MS毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；流量控制方式為線速度（37.2 cm/sec），流速為1.0 mL/min；不分流進樣；進樣口溫度250 ℃；柱溫箱升溫程序：起始溫度為90℃，保持1.5 min，以25 ℃/min 升溫至280 ℃，保持6 min。進樣體積1 μL。采用EI 離子源（70 eV），離子源溫度230 ℃，接口溫度280 ℃，溶劑延遲3.5 min。采用全掃描模式（SCAN）進行定性，質量掃描范圍40～500 amu；選擇離子檢測模式（SIM）進行定量：內標物質（SKF525A）的m/z分別為86、99，定量離子m/z為86；△9-四氫大麻酚的m/z分別為231、271、299、314,定量離子m/z為299。上述兩種物質的標準溶液的色/質譜圖見圖2、圖3。

圖2 SKF525A標準溶液總離子流圖和質譜圖

圖3 △9-四氫大麻酚標準溶液總離子流圖和質譜圖

2.4 樣品快速前處理

樣本充分研磨混勻，分別稱取約20 mg待測樣本，加入5 ml甲醇，加入內標工作液20 μL，震蕩3 min，5000r離心1 min，取上清液進行檢驗，進樣量1 μL。

2.5 標準曲線的繪制

用甲醇將△9-四氫大麻酚標準應用液稀釋為0.50、1.0、5.0、10、20 μg/ml的系列標準溶液，各加20 μL內標工作液（200 ug/ml）。取1 μL進氣相色譜分析。以待測物的質量濃度（μg/mL）為橫坐標、待測物和內標峰的面積比值為縱坐標繪制標準曲線。

3 討論

3.1 方法的優化

（1）色譜條件的優化。

為改進待測物分離、改善峰型和減少分析時間，參考文獻[3]實驗采用程序升溫模式，多次實驗得到升溫程序為：起始溫度為90 ℃，保持1.5 min，以25 ℃/min 的速率升溫至280 ℃，保持5 min。該升溫程序下待測物與樣品雜質分離良好，基線平穩，在15 min內可完成整個分析。以分離度、峰型和分離時間為考察指標，優化了其余色譜條件，進樣口溫度考察范圍為200 ℃～300℃，最佳條件為250 ℃；分流比考察范圍為不分流～50:1，最佳條件為不分流。

（2）樣品前處理的優化。

本方法用溶劑直接提取待測物中的△9-四氫大麻酚成分，實驗對提取溶劑的種類和加入量進行了考察。針對△9-四氫大麻酚具有一定的極性這一特點，分別考察了甲醇、乙醇、乙腈三種溶劑對樣品的溶解度以及乳化情況，結果表明三種溶劑均不易產生乳化現象，采用甲醇時△9-四氫大麻酚的溶出最好。因此實驗選取甲醇作為溶劑，并在1 ml～10 ml的范圍內考察了溶劑體積對待測物提取效率的影響。結果表明，隨著提取溶劑體積的增加，待測物的提取效率逐漸增加，當提取溶解達到4 ml后，提取效率趨于穩定，實驗采用5 ml甲醇作為提取溶劑。

3.2 方法學評價

（1）線性范圍和檢出限。

按照2.4步驟繪制標準曲線，△9-四氫大麻酚在0.50 μg/mL～20 μg/mL濃度范圍內線性良好，相關系數r=0.9999；以3倍噪聲對應的待測物濃度作為檢出限，檢出限為0.15 μg/g。

（2）精密度檢驗。

將待檢巧克力樣品稱取8份，按照上述方法進行樣品前處理和色譜質譜分析，用測得的△9-四氫大麻酚含量的相對標準偏差（relateive standard derivation，RSD）考察方法的精密度，RSD值為1.75%。

（3）樣本加標回收率。

取案件中的糖果、巧克力、餅干檢材各15份，其中3份用于測定本底，另外12份分別添加0.50 μg/mL、5.0 μg/ml和10.0 μg/mL的△9-四氫大麻酚標準，均按照本方法進行樣品處理和色譜質譜測定，計算得到的加標回收率范圍為82%～105%。

3.3 樣本定性結果

10份樣本中，1號、2號、4號、6號、8號為軟糖果，3號、7號、9號為餅干，5號、10號為巧克力，除7號檢材外，其余檢材中均檢出△9-四氫大麻酚成分，檢驗結果與警方調查結果相吻合。

4 結語

建立的GC/MS方法靈敏，分離度高、重現性好，成功的檢測出了案件樣本中△9-四氫大麻酚成分，適合巧克力糖果等復雜食品基質中添加大麻成分的快速鑒定。