P63 、P120ctn在Her-2陽性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義

陳劉鎮(zhèn) 王在國 鄭驚雷

東莞市人民醫(yī)院普外科 (廣東 東莞 523000)

乳腺癌根據(jù)基因表達(dá)的差異，分為四型，其中最常見的為Her-2過表達(dá)型，研究顯示Her-2的高表達(dá)是乳腺癌患者轉(zhuǎn)移的主要因素之一，而乳腺癌患者轉(zhuǎn)移又是患者死亡的因素[1]。目前關(guān)于Her-2高表達(dá)型乳腺癌的分子尚不清楚。p120ctn在正常的細(xì)胞中表達(dá)，但是在上皮性的惡性腫瘤中表達(dá)缺失，其表達(dá)缺失與腫瘤的侵襲增強、分化減弱以及患者預(yù)后差有密切的關(guān)系[2]。有研究表明，p63的缺失與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移也有密切的關(guān)系[3]。因此，本研究將選取我院2019年1月到2020年1月我院普外科收治的乳腺癌患者60例，進行深入的對比研究，進一步探討 p63、p120ctm在Her-2陽性的乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2019年1月至2020年1月普外科收治的乳腺癌患者60例，均為女性，病理分級：Ⅰ級9例，Ⅱ級11例，Ⅲ級19例。年齡45～75歲，平均年齡(58.36±6.29)歲。左側(cè)31例，右側(cè)29例。所有患者均在我院行乳腺癌根治術(shù)切除腫物，并在本院病理科檢查確診為乳腺癌，所有患者均行Her-2檢查，所有病例手術(shù)前均未進行放療或化療，患者簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 免疫組化方法 組織經(jīng)福爾馬林固定超過24h，浸蠟與石蠟包埋。將5μm厚度的組織切片放置載玻片上。用二甲苯脫蠟30min，并經(jīng)梯度酒精水化，隨后用PBS緩沖液沖洗干凈。用 0.3%過氧化氫浸泡10min消除內(nèi)源性過氧化物酶，血清封閉15min。滴加第一抗體：除去血清，用1∶100的抗體4°C孵育過夜。PBS 沖洗3次，每次5min。加入生物素標(biāo)記的二抗，在37°C條件下繼續(xù)孵育30min；滴加DAB染色。蘇木精復(fù)染，樹膠封片。

1.3 結(jié)果判斷 p120ctn結(jié)果判定：在癌細(xì)胞細(xì)胞膜中呈陽性表達(dá)，陽性細(xì)胞率≥75% 則為正常表達(dá)，＜75% 則為減弱，若陽性定位于胞質(zhì)，且陽性細(xì)胞數(shù)≥10% 則為異位表達(dá)。膜表達(dá)減弱及異位表達(dá)統(tǒng)一定義為異常表達(dá)。P63、Her-2染色結(jié)果判定：陽性細(xì)胞數(shù)≥30% 為陽性，＜30%為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，著性檢驗水準(zhǔn)α值規(guī)定為0.05，定量資料比較采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 P63 、P120ctn在Her-2陰性乳腺癌中的表達(dá) 在21例Her-2陰性組中，P63的陽性表達(dá)率為38.09%，P120ctn的異位表達(dá)率為47.62%，與Her-2陽性組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 P63 、P120ctn在Her-2陰性乳腺癌中的表達(dá)

2.2 P63 、P120ctn的表達(dá)與Her-2陽性組中乳腺癌患者病理分級的關(guān)系 在39例Her-2陽性患者中，隨著乳腺癌病理分級的增加，P63的陽性率增加，在Ⅲ中的陽性率達(dá)94.74%，而P120ctn異位表達(dá)率亦隨之增加，Ⅲ中的異位率達(dá)84.21%，組間比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 P63 、P120ctn的表達(dá)與Her-2陽性組中乳腺癌患者病理分級的關(guān)系

3 討論

乳腺癌是較為常見的惡性腫瘤，而乳腺癌患者出現(xiàn)轉(zhuǎn)移和侵潤是影響患者預(yù)后的主要因素。Her-2是表皮生長因子受體家族的成員，具有酪氨酸蛋白酶活性，Her-2的高表達(dá)，不但增加了乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力，而且與雌激素和孕激素受體狀態(tài)及患者不良預(yù)后有關(guān)[4]。Her-2蛋白的過表達(dá)促進了細(xì)胞的惡性增殖，Her-2的增高也是患者預(yù)后的獨立危險因素。 同時也被研究證實是目前可以對乳腺癌患者靶向治療的分子靶點之一。因此，本研究將進一步探討Her-2陽性的乳腺癌患者潛在相關(guān)的靶向分子。

本研究進行了60例的乳腺癌組織P120ctn的檢測和相關(guān)分析，結(jié)果顯示，在 Her-2陽性組中，P120ctn異位表達(dá)率為均明顯高于21例Her-2陰組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，P120ctn與Her-2的表達(dá)具有明顯的相關(guān)性，可能是因為P120ctn表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為有關(guān)。因此在Her-2陽性的乳腺癌組織中，病理分級較高，并且在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中，P120ctn蛋白通常具有較高的異位表達(dá)率[5]。國外的研究顯示，P120ctns是惡性腫瘤患者早期復(fù)發(fā)的危險因素[6]。P120ctn是新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)分子和一種新型的靶分子，E與-Cadherin分子結(jié)合而產(chǎn)生生物效應(yīng)。P120ctn在正常細(xì)胞中表達(dá)，并且可以與E-Cadherin蛋白一起維護細(xì)胞的粘附功能。然而研究證實，P120ctn控制的E-Cadherin的表達(dá)水平, P120ctn的表達(dá)下降之后，可以下調(diào)E-Cadherin的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞間黏附能力下降，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞間的侵襲和轉(zhuǎn)移的發(fā)生[7]。研究表明，在分化較差、惡性程度較高的惡性腫瘤患者中，P120ctn多異常表達(dá)，而異常表達(dá)P120ctn是腫瘤發(fā)生侵襲、浸潤、轉(zhuǎn)移的主要因素[8]。大量研究顯示, P120ctn的異常表達(dá)于人體多種實體腫瘤如胃癌、肺癌、乳腺癌中，并與腫瘤的惡性生物學(xué)行為均有關(guān)[9]，本研究結(jié)果也顯示，P120ctn異位表達(dá)率與Her-2的表達(dá)具有密切的相關(guān)性，進一步與病理分級的研究也發(fā)現(xiàn)，在39例Her-2陽性患者中，隨著乳腺癌病理分級的增加，P120ctn異位表達(dá)率亦隨之增加，Ⅲ中的異位率達(dá)84.21%，可見，P120ctn是反映Her-2陽性乳腺癌惡性腫瘤行為的一項指標(biāo)之一。P63是腫瘤的P53家族成員之一，具有高度的同源性，且與腫瘤的轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系[10]，P63正常表達(dá)于肌上皮細(xì)胞中，雖然與P53有同源性，但是P53被研究證實是一種抑癌基因，但P63在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機制尚存在爭議[11]。本研究結(jié)果顯示，在21例Her-2陰組中，P63的陽性表達(dá)率38.09%；在39例Her-2陽性患者中，隨著乳腺癌病理分級的增加，P63的陽性率增加，在Ⅲ中的陽性率達(dá)94.74%。P63表達(dá)與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系，反映乳腺癌具有更高的侵襲性和容易轉(zhuǎn)移的特點。

綜上所述，P63的高表達(dá)以及P120ctn的異常表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展起到了協(xié)同作用。聯(lián)合檢測對評估患者預(yù)合、靶向治療具有重要的臨床意義。深入研究乳腺癌的分子分型生物標(biāo)志，以期提供更為準(zhǔn)確有效的治療，更重要的參考依據(jù)。