系統性紅斑狼瘡患者血清 25羥基維生素D 3的表達及其與自身抗體的關系

黃麗冰，皮紅泉，林啟航（廣東省東莞市東部中心醫院檢驗科，廣東東莞 523573）

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種發病原因未明的慢性系統性自身免疫病炎性疾病，好發于女性，目前認為與樹突狀細胞(DC)、T淋巴細胞和B淋巴細胞有關。維生素 D屬于人體必需的維生素，可以調節骨和磷的代謝，維持人體的骨量平衡，防止骨質疏松。研究發現，維生素 D還具有調節免疫系統的功能，對 SLE的病情也有一定的調控作用[1-2]。本研究通過檢測 SLE患者血清 25羥基維生素D3[25-(OH)D3]的表達水平，分析其與自身抗體的關系，為SLE的治療提供參考。

1 資料和方法

1.1 病例與分組

選取2017年6月至2019年10月 SLE患者 80例，年齡為17～65歲，平均(37.5±14.0)歲；其中男 2例，女78例，均符合美國風濕病學會(ACR)1997年推薦的SLE分類診斷標準[3]。根據 SLE疾病活動度評分(SLEDAI)，80例患者分為 SLE活動期組(32例，SLEDAI≥ 10分)和SLE穩定期組(48例，SLEDAI＜10分)。排除標準[4-5]：(1) 近1個月內接受過糖皮質激素治療者；(2)合并其他自身免疫性疾病者；(3)合并其他慢性疾病如高血壓、糖尿病、甲功異常性疾病等患者；(4) 近 3個月內接受維生素 D及其類似物治療者。同時選取同期體檢健康者 80例作為對照組，其中男 5例，女 75例，年齡為15～62歲，平均(36.0±15.5)歲。3 組研究對象的性別、年齡比較差異無統計學意義(P＞0.05)。所有參與者均簽署知情同意書。本研究獲得醫院倫理委員會批準并監督執行。

1.2 方法

抽取受試者空腹靜脈血3 mL 用 EDTA抗凝管保存，6 h內分離出血清，并于－70℃凍存，標本收集完整后統一進行25-(OH)D3及自身抗體檢測。采用化學發光免疫分析法檢測25-(OH)D3水平，試劑盒購于深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；采用間接免疫熒光法檢測抗核抗體(ANA)，免疫印跡檢測ANA譜，抗核抗體檢測試劑盒購于北京和杰創新生物醫療有限公司；采用酶聯免疫吸附法測量抗雙鏈DNA抗體，試劑盒購于上海科新生物技術股份有限公司。各指標具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

依據參考文獻[6]把血清25-(OH)D3濃度分為 3個層次：缺乏(＜20 μg/L)、不足(20～30 μg/L)、正常(＞30 μg/L)，比較 SLE活動期組、SLE穩定期組和對照組25-(OH)D3的表達情況；同時根據 ANA滴度的不同將 80 例 SLE患者分為低滴度組(1:100～1:320)、中滴度組(1:1000)和高滴度組(＞1:3200)[7]，比較不同ANA滴度組間血清25-(OH)D3水平的差異。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 血25-(OH)D3水平

SLE活動期組和SLE穩定期組患者的血清25-(OH)D3水平均低于對照組，且SLE活動期組降低更顯著(P＜0.01)，見表1。3組血清25-(OH)D3的表達差異有統計學意義(P＜0.01)。SLE活動期組血清25-(OH)D3缺乏的患者最多，其次是 SLE穩定期組(P＜0.01)。見表2。

表1 3組血清25-(OH)D3水平的比較(±s，μg/L)

表1 3組血清25-(OH)D3水平的比較(±s，μg/L)

與SLE穩定期組比較：aP＜0.01：與對照組比較：bP ＜0.01

表2 3組血清25-(OH)D3表達情況的比較例(%)

2.2 血清25-(OH)D3水平與自身抗體的關系

ANA高滴度組患者的血清25-(OH)D3水平顯著低于中滴度組和低滴度組，差異有統計學意義(P＜0.01)，見表3。根據 SLE患者血清自身抗體是否陽性進行分組，抗 Sm抗體、抗干燥綜合征 A抗體(抗SSA抗體)、抗干燥綜合征 B抗體(抗 SSB抗體)、抗線粒體抗體(抗AMA抗體)和抗核糖核蛋白抗體(抗rRNP抗體)陽性患者的25-(OH)D3水平與陰性患者比較差異無統計學意義(P＞0.05)，抗雙鏈 DNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體陽性患者的25-(OH)D3水平顯著低于抗體陰性患者(P＜0.05或 0.01)。見表4。

表3 不同ANA滴度組血清25-(OH)D3水平比較(±s，μg/L)

表3 不同ANA滴度組血清25-(OH)D3水平比較(±s，μg/L)

與低滴度組比較：aP＜0.01；與中滴度組比較：b P＜0.01

3 討論

SLE是一種自身免疫性炎癥性結締組織病，好發于青年女性，發病原因與遺傳、環境、雌激素等密切相關，發病機制復雜，目前并無明確發病原因。SLE患者體內的免疫功能多異常，誘導免疫細胞異常增生，形成大量的抗原抗體免疫復合物，引起多系統的慢性炎癥及組織壞死[8]。SLE患者異常的免疫反應形成的抗原抗體復合物可沉積在皮膚、黏膜、關節以及各大重要器官中，如心、肺、腎等。目前研究認為，SLE造成的異常免疫應答過剩為持續的，可持續性地引起機體組織的損傷。當前臨床主要使用激素沖擊治療來抑制免疫應答，減輕患者組織及器官的損害[9-10]。

表4 血清25-(OH)D3水平與自身抗體的關系(±s，μg/L)

表4 血清25-(OH)D3水平與自身抗體的關系(±s，μg/L)

SLE發病的免疫應答中，T淋巴細胞和B淋巴細胞占據重要地位。在免疫應答的過程中，T 淋巴細胞出現數量減少以及功能下降現象，相反的是 B細胞功能亢進以及過度增殖。B淋巴細胞產生的大量抗體與相應的抗原結合，可以沉積在組織和氣管中，形成急慢性炎癥反應，對機體造成損傷。這是目前SLE最重要的免疫應答機制，臨床上抑制 B淋巴細胞免疫應答的治療都取得了顯著療效[11-14]。

維生素 D為固醇類衍生物，在預防骨質疏松、調節機體鈣磷代謝中發揮著重要的作用，同時研究發現，維生素 D可以通過調節免疫細胞的增殖來影響免疫系統。在免疫反應中，維生素 D活化形成1,25二羥基維生素 D3(1,25-(OH)2D3)，通過抑制胸腺基質樹突狀細胞的分化成熟影響免疫反應。1,25-(OH)2D3可通過對 DC細胞成熟的抑制影響 T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖[15-16]。維生素 D還可以誘導淋巴 B細胞的凋亡及免疫球蛋白的產生[17]，維生素 D的缺乏可能會加重SLE患者的免疫反應。

本結果顯示，SLE活動期患者血清25-(OH) D3水平較SLE穩定期患者和對照組明顯降低，說明SLE患者較正常人相比缺乏維生素 D，隨著病情的惡化，血清25-(OH)D3水平進一步降低。原因可能如下：(1)SLE患者需使用免疫抑制劑和激素長期治療，可能會造成維生素 D代謝障礙；(2)SLE患者常并發多器官損害，尤其是腎臟最常受累，容易造成腎功能不全，從而影響腎臟產生 1-α羥化酶，而此酶是活化25-(OH)D3必需的酶；(3)SLE患者皮膚常常對光過敏，而患者日常生活避免光照會影響人體自身維生素D 的 合成，從而使機體維生素 D合成減少。

本研究結果顯示，SLE患者 ANA滴度越高，25-(OH)D3水平越低。維生素 D的缺乏也影響患者自身抗體的表達，SLE患者抗雙鏈 DNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體陽性的25-(OH)D3水平低于陰性患者(P＜0.05或0.01)。AHA是 SLE的非特異性抗體，抗雙鏈 DNA 抗體、抗核小體抗體是SLE的特異性抗體，其滴度與病情有關，滴度增高提示病情加重。這可能與維生素 D的免疫調節作用有關，維生素 D缺乏，對 B細胞的抑制作減弱，疾病活動性增強，出現高滴度的DNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體，但 SLE的標志性抗體抗 Sm抗體與疾病活動度無關。

綜上所述，SLE患者普遍缺乏維生素 D，SLE活動期指標的水平越高，25-(OH)D3水平越低。25-(OH)D3與抗雙鏈 DNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體有關，能從另一方面反映 SLE患者的疾病活動度，對SLE診療有重要價值。