瘦素基因rs2167270G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系

楊姣姣　張舒龍　高學(xué)仁

摘 要：目的：分析瘦素基因rs2167270G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系。方法：收集100例結(jié)直腸癌患者和100例性別、年齡匹配的健康個(gè)體。采用Sanger測(cè)序法分析個(gè)體rs2167270 G>A位點(diǎn)基因型。結(jié)果：患者組rs2167270位點(diǎn)AA、AG和GG基因型數(shù)為1、22和77，健康組為7、33和60，兩組基因型數(shù)分布具有顯著差異。與攜帶rs2167270 GG基因型的個(gè)體相比，攜帶AA基因型的個(gè)體和攜帶AG基因型的個(gè)體患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著降低。此外，與攜帶rs2167270 G等位基因的個(gè)體相比，攜帶A等位基因的個(gè)體患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著降低。結(jié)論：瘦素基因rs2167270 G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性相關(guān)。

關(guān)鍵詞：瘦素; rs2167270; 結(jié)直腸癌; 易感性

中圖分類(lèi)號(hào)：R735.37? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? 文章編號(hào)：1006-3315（2021）3-196-002

結(jié)直腸癌是全球最常見(jiàn)的癌癥之一，診斷時(shí)約有20%的患者發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。盡管基于5-氟尿嘧啶的全身治療顯著改善了轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的預(yù)后，但整體效果仍然不理想[1]。更好地了解結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，可為預(yù)防甚至逆轉(zhuǎn)現(xiàn)有狀況開(kāi)辟新的途徑。

瘦素是一種主要由脂肪細(xì)胞分泌的具有飽腹功能的蛋白質(zhì)類(lèi)激素，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。瘦素作為結(jié)腸上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移并抑制細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)位于瘦素基因上的rs2167270 G>A多態(tài)性位點(diǎn)不僅與血清瘦素水平有關(guān)，還與多種腫瘤的遺傳易感性有關(guān)[2]。本文通過(guò)收集100例結(jié)直腸癌患者和100例健康個(gè)體的外周血標(biāo)本，采用病例對(duì)照研究方法探討了rs2167270 G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系。

1.材料與方法

1.1研究對(duì)象

選取100例結(jié)直腸癌患者，其中男性56例，女性44例，平均年齡58.7±6.2。選取健康體檢者作為對(duì)照組，其中男性56例，女性44例，平均年齡57.5±5.8。兩組性別和年齡分布均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。分別采集患者和健康個(gè)體外周血1mL。

1.2基因組DNA提取和基因分型

采用Chelex-100法提取外周血中白細(xì)胞DNA，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增含rs2167270 G>A位點(diǎn)的片段，最后利用Sanger法對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序和基因分型。

1.3統(tǒng)計(jì)分析

利用logistic回歸計(jì)算比值比（OR）和95%置信區(qū)間（CI），分析rs2167270 G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系。

2.結(jié)果

2.1兩組外周血中rs2167270位點(diǎn)基因型分布頻率的比較

結(jié)直腸癌組和對(duì)照組組AA、AG和GG基因型數(shù)目分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中患者組為1、22和77，健康組為7、33和60（P=0.005）。見(jiàn)表1。

2.2 rs2167270位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)系

與攜帶rs2167270 GG基因型的個(gè)體相比，攜帶AA基因型的個(gè)體和攜帶AG基因型的個(gè)體患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著降低（AAvs.GG：OR=0.11，95%CI=0.01～0.93，P=0.016;AGvs.GG：OR=0.52，95%CI=0.27～0.98，P=0.042;（AA+AG）vs.GG：OR=0.45，95%CI=0.24～0.83，P=0.009）。

此外，與攜帶rs2167270 G等位基因的個(gè)體相比，攜帶A等位基因的個(gè)體患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著降低（Avs.G：OR=0.44，95%CI=0.26～0.76，P=0.003）。

3.討論

結(jié)直腸癌是一種源自結(jié)腸或直腸的胃腸道惡性腫瘤，流行病學(xué)證據(jù)表明結(jié)腸癌和肥胖之間有明顯的聯(lián)系。這兩種疾病都與久坐不動(dòng)的生活方式、高能量飲食以及對(duì)蔬菜、水果和纖維的攝入有限有關(guān)。許多研究指出肥胖和超重是結(jié)直腸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。因此，肥胖/超重相關(guān)基因可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生相關(guān)。

人體內(nèi)95%的瘦素都是由脂肪細(xì)胞產(chǎn)生，肥胖和超重機(jī)體的瘦素水平明顯高于正常人。目前已有大量數(shù)據(jù)表明瘦素和瘦素受體結(jié)合可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，血管生成，間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，抗凋亡作用，而這正是腫瘤發(fā)生的必要條件[3]。2012年，Ho等報(bào)道說(shuō)，高水平的瘦素更易導(dǎo)致結(jié)直腸癌的發(fā)生[4]。此后Song等研究發(fā)現(xiàn)血漿中可溶性瘦素受體的水平與直腸癌風(fēng)險(xiǎn)增加顯著相關(guān)[5]。這些研究表明，瘦素與結(jié)直腸癌之間有密切關(guān)系。

單核苷酸多態(tài)性是人類(lèi)可遺傳的變異中最常見(jiàn)的一種，它在人類(lèi)基因組中廣泛存在。結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制至今仍未被闡明，但是大多數(shù)研究者發(fā)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性與結(jié)直腸癌的易感性有關(guān)[6]。rs2167270是瘦素基因上位于5非翻譯區(qū)的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)。目前關(guān)于瘦素基因rs2167270與癌癥之間關(guān)系的研究多集中在白人中。關(guān)于rs2167270G>A與亞洲人群之間的關(guān)系研究較少且有爭(zhēng)議。Zhang等[7]報(bào)道rs2167270G>A變異可能增加肝癌的風(fēng)險(xiǎn)。Yang等[8]首次發(fā)現(xiàn)rs2167270G>A基因多態(tài)性降低了亞洲人患食管胃交界腺瘤的風(fēng)險(xiǎn)。目前尚不清楚這種單核苷酸多態(tài)性與亞洲人患結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)的潛在關(guān)系。

本研究結(jié)果表明，瘦素基因中的一個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs2167270G>A與結(jié)直腸癌遺傳易感性有關(guān)。攜帶rs2167270 AA基因型的個(gè)體和AG基因型的個(gè)體發(fā)生結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)較攜帶GG基因型的個(gè)體分別降低了89%和48%。鑒于rs2167270 G>A位點(diǎn)位于瘦素基因的5非翻譯區(qū)，不能翻譯成氨基酸肽，我們推測(cè)其可能通過(guò)影響影響RNA的翻譯，穩(wěn)定性和轉(zhuǎn)錄，然后改變瘦素蛋白的表達(dá)，進(jìn)而影響個(gè)體患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)。然而這一假設(shè)需要通過(guò)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。總之，當(dāng)前研究表明瘦素基因rs2167270 G>A位點(diǎn)多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的降低顯著相關(guān)，該位點(diǎn)有望作為預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌遺傳易感性的生物標(biāo)志物。

基金項(xiàng)目：本文為2020年度山西省研究生教育改革（指令性）研究課題，2020YJJG123

參考文獻(xiàn)：

[1]Heinemann V，von Weikersthal LF，Decker T，etal.FOLFIRI plus cetuximab versus FOLFIRI plus bevacizumab as first-line treatment for patients with metastatic colorectal cancer （FIRE-3）：a randomised，open-label， phase 3 trial.Lancet Oncol. 2014;15（10）：1065-1075

[2]Qiu H，Lin X，Tang W，etal.Investigation of TCF7L2， LEP and LEPR polymorphisms with esophageal squamous cell carcinomas. Oncotarget.2017;8：109107-109119

[3]Ghasemi A，Saeidi J，Azimi-Nejad M，Hashemy SI.Leptin-induced signaling pathways in cancer cell migration and invasion.Cell Oncol （Dordr）. 2019;42（3）：243-260

[4]Ho GY，Wang T，Gunter MJ，et al. Adipokines linking obesity with colorectal cancer risk in postmenopausal women. Cancer Res.2012;72：3029-3037

[5]Song M， Zhang X，Wu K，et al.Plasma adiponectin and soluble leptin receptor and risk of colorectal cancer： a prospective study. Cancer Prev Res （Phila） 2013;6：875-885

[6]Gao XR， Wang HP， Zhang SL， Wang MX， Zhu ZS. Pri-miR-124 rs531564 polymorphism and colorectal cancer risk. Sci Rep. 2015;5：14818

[7]Zhang S， Jiang J， Chen Z， et al. Investigation of LEP and LEPR polymorphisms with the risk of hepatocellular carcinoma： a case-control study in Eastern Chinese Han population. Onco Targets Ther. 2018;11：2083-2089

[8]Yang J， Zhong ZHH， Tang WF， Chen JP. Leptin rs2167270G > A（G19A） polymorphismmay decrease the risk of cancer： A case‐control study and meta‐analysis involving 19 989 subjects. J Cell Biochem. 2019;120（7）：10998-11007