乳腺癌中PD-L1的表達狀況與臨床病理特征

王艷芳

吉林省前衛醫院病理科,吉林 長春 130021

BC是女性群體中發病率最高的惡性腫瘤，近些年患病群體有年輕化趨向，侵襲與轉移是造成治療失敗及患者死亡的主要因素。人體PD-L1也被稱之為CD279，位于染色體2q37.35，由細胞外區、跨膜區與胞內區共同構成。現有研究發現[1]，PD-L1在BC淋巴細胞、單核及巨噬細胞表面廣泛表達，在人類腫瘤細胞株內表達上調，這提示PD-L1和腫瘤發生、發展間存在密切相關性，程序性死亡分子1(PD-1)是PD-L1的受體。目前，關于PD-L1作為BC免疫治療預測標志物的研究偏少，故而探究其在BC組織內的表達情況有一定現實意義，本文基于以上宗旨做出分析報道。

1 資料與方法

1.1一般資料 采集2017.8～2019.8期間我院120份BC石蠟標本，基于腫瘤組織的核心區建設組織微陣列(TMA)。入選的120例患者年齡27～74歲；平均(51.8±10.9)歲；流體直徑0.7～7，平均(4.8±1.52)；結合《WHO乳腺腫瘤分類》[2]內標準判斷入組患者腫瘤分化程度:SBR I、II、III級分別有8、102、10例；把BC分為如下4組分子亞型：Luminnal A型15例、Luminnal B型47例、HER-2過表達型30例、TNBC型28例；TNM分期[3]：I+II期93例，III+IV期27例。

1.2方法 選用免疫組化SP法染色，用檸檬酸鈉溶液誘導5μm切片TMA組織抗原修復過程，過氧化氫抑制內源性過氧化物酶表達過程，滴入事前稀釋的PD-L1(E1L3N)單克隆抗體，安放在37℃溫箱內1h。采用標準DAB技術完成免疫染色，蘇木精溶液復染。

1.3判斷標準 局部或整個細胞膜染色(≥1+)腫瘤細胞在整個腫瘤中所占比例≥1%則判斷PD-L1為陽性，反之則為陰性；Ki67將20%設為截點，用于判斷PD-L1表達程度的高低。

2 結 果

2.1BC的臨床病理特征 出現淋巴結轉移、血管侵犯者分別有50例、25例，占41.7%、20.83%。SBR分類表明， I、II、III級分別有8、102、10例，占6.7%、85.0%、8.3%。免疫組織化學染色發現，ER、PR與HER-2陽性率依次為30.8%(37/120)、38.3%(46/120)、44.2%(53/120)。且還評估了Ki67的表達情況，高、低表達者依次有86例、54例，各占71.7%、28.3%。分子分型結果表明，Luminnal B型最為常見，占39.2%(47/120)。

2.2PD-L1表達和BC臨床病理參數間的相關性分析 PD-L1表達主要定位在腫瘤細胞細胞膜或細胞質。入選的120例乳腺患者PD-LI陽性率為16.7%(20/120)，在BC患者TNBC型內PD-L1的陽性率最高，為35.7%(10/28)，其次為HER-2過表達型，占16.7%(5/30)，Luminnal A型占13.3%(2/15)，Luminnal B型為6.3%(3/47)。不同分子分型者PD-L1表達情況之間有統計學意義。進一步分析表明，PD-L1表達情況和BC組織分化程度、分子分型、瘤體直徑、ER狀態、PR狀態、HER狀態以及Ki67表達存在相關性(P<0.05)，與病患年齡、TNM分期、淋巴結轉移與血管侵犯情況無相關性(P>0.05)。具體見表1。

表1 PD-L1表達和120例BC患者病理參數特征的相關性分析

3 討 論

程序性死亡分子1(PD-1)有兩個配體，即PD-L1與PD-L2，他們均是B7家族的成員。PD-L1蛋白在響應LPS與GM-CSF處置后的巨噬細胞與樹突狀細胞(DC)上被上調，且在傳導TCR與B細胞受體信號時上調T細胞與B細胞，在靜息狀態的小鼠體內，可以于心臟、、肺、胸腺、脾及腎內檢出PD-L1 mRNA。采用IFN-γ處理PD-L1時其基本上在全部鼠腫瘤細胞中表達，包括PA1骨髓瘤、P815肥大細胞瘤與B16黑素瘤內。

PD-L1屬于I型跨膜蛋白，在非造血細胞和非淋巴器官內組成型表達 ，且在多種惡性腫瘤微環境內上調。PD-L1誘導T細胞活化與增殖能力降低過程，抑制抗細胞凋亡分子表達，但促進炎性細胞因素釋放過程，進而削弱癌癥有關免疫細胞原性，抑制免疫應答，以上這種機制誘導疾病進展過程。

本次研究入選的120例乳腺患者PD-LI陽性率為16.7%，PD-L1表達情況和BC組織分化程度、分子分型、瘤體直徑、ER狀態、PR狀態、HER狀態以及Ki67高表達性等不良病理特征相關，HEQin等[4]部分研究結果相似，提示PD-LI為腫瘤侵入性偏高的指標，并且PD-LI在TNBC內的較高表達性可能會成為TNBC患者臨床靶向治療的靶標，且可能是TNBC患者預后的重要標志物之一。本次研究表明PD-L1表達和淋巴轉移之間無相關性，和過往文獻研究結果存在一定差異，分析其原因可能和納入樣本量偏少，患者較為單一相關。抗PD-LI單抗治療荷瘤小鼠模型提示明顯抑制腫瘤生長過程，腫瘤細胞被清除。局部完全緩解，聯合細胞毒性T細胞，和單純采用細胞毒性T細胞療法相比，較明顯提升了荷瘤小鼠的生存率，這提示PD-L1可能參與乳腺癌亞型的復發轉移過程。

TNBC是一類高度異質性腫瘤，盡管免疫表型均不表達ER、PR與HER-2，在其在生物學行為形成有很大異質性，在黏液癌與微乳頭癌上不表達。綜合本文論述的內容，可以看出PD-L1在TNBC內高表達，可以作為TNBC患者臨床免疫治療的靶標與預后標記物；腫瘤直徑大、Ki67增殖指數高是PD-L1表達的危險因素[5]。結合PD-L1在腫瘤細胞中的表達特征，筆者推測其可能和BC患者臨床治療效果相關，其可能會對后續幾年中BC患者免疫治療做出一定科學指導。