UF-1000i自動尿液分析儀對尿路感染的診斷價值

李果，張馳，黃銘，胡衛紅

（華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院檢驗科，湖北 武漢430030）

尿路感染（urinary tract infection,UTI）是尿道內大量微生物繁殖而引起尿頻、尿急、尿痛、發熱、腎區不適等癥狀的一種臨床綜合癥,不及時治療常會導致慢性感染。它的檢測“金標準”是尿液培養，但從尿液標本的留取到獲得細菌培養的報告，需要3～4d時間,不能及時的對臨床診斷提供參考意見。本研究運用UF-1000i檢測細菌數與中段尿細菌培養結果的比較,旨在找到一個靈敏度與特異度均佳的菌值區間,為臨床早期診斷尿路感染提供更準確的信息。

1 材料和方法

1.1 一般材料265份來自我院的疑似UTI的患者尿樣（被懷疑的條件：第一次尿沉渣檢查WBC≥20/μl，細菌計數≥1000/μl），其中男性5名，女性260名，年齡18～80歲，留取中段尿，女性均要求清潔外陰后留取標本,按照無菌操作原則將患者的標本留于無菌杯中并送檢。

1.2 試劑與儀器SYSMEX公司生產的UF-1000i自動尿液分析儀及配套試劑和質控品、Cled培養基。

1.3 標本采集 按照無菌操作原則，留取清潔中段尿于無菌杯中送檢,留取標本前女性均要求清潔外陰。

1.4 UF-1000i細菌計數 通過UF-1000i自動尿液分析儀對標本進行細菌定量計數,所有標本在3h內完成檢測。

1.5 細菌培養 充分混勻標本后，用一次性定量接種環取標本中的尿液10μl,采用3區劃線法劃到XLD選擇性培養基中,置于37℃孵育24h，通過檢驗人員對細菌形態、菌落狀況、生化反應進行菌種鑒定，無細菌生長的標本延遲培養24h。

1.6 統計學分析 采用SPSS 12.0統計軟件進行數據處理,應用ROC曲線確定男性和女性細菌計數的cut-off值。運用卡方χ2檢驗判斷兩種方法之間差異有統計學意義。

2 結果

2.1 細菌培養結果 臨床上泌尿系統感染診斷的“金標準”是中段尿培養，革蘭氏陽性菌（G+）以菌落計數≥104CFU/ml為陽性，而革蘭氏陰性菌（G-）以計數≥105CFU/ml為陽性。如果標本的培養結果有三種以上的細菌,則判定為雜菌污染，標本不合格，則剔除該數據。培養結果顯示，陽性結果有64例，陽性率為29.4%（G+菌24例，G-菌有40例），陰性結果為154例,檢出三種以上細菌的標本47例，則被剔除。

2.2 UF-1000i自動尿液分析儀細菌計數結果對尿路感染的診斷評價 將上述218份標本用UF-1000自動尿液分析儀檢測細菌計數和白細胞計數。將尿細菌培養結果為金標準，與UF-1000i分析儀檢測的白細胞計數繪制ROC曲線,其下面積為0.712，見圖1，利用約登指數最大值來確定白細胞計數對尿路感染診斷的cut-off值為30.56 cell/μl。采用相同方式，細菌計數的ROC曲線下的面積為0.849，見圖2，得到細菌量的cut-off值為細菌量≥710.43/μl。在WBC≥30.56/μl和細菌量≥710.43/μl，對218份標本進行評價，與細菌培養結果,見表1,其對尿路感染的診斷性能，見表2。

圖1 儀器WBC計數與細菌培養結果的比較

圖2 儀器細菌計數與細菌培養結果的比較

表1 儀器WBC與細菌計數雙陽與細菌培養結果的比較

3 討論

目前，診斷尿路感染必須依據對中段尿的細菌定量培養的結果。然而，一份尿液標本從采集到獲取報告需要3d的時間，另外，被懷疑為尿路感染并被送檢細菌培養的標本有很大部分培養結果陰性，給病人帶來不必要的經濟損失和資源浪費。有研究顯示[1-4],UF-1000i尿液分析儀對尿路細菌性感染疾病的診斷有一定臨床意義。本研究以細菌定量培養結果作為金標準,另外應用UF-1000i尿液分析儀對中段尿標本進行了細菌定量計數，以期找到一個靈敏度與特異性度均佳的細菌值區間，能夠快速的篩查陰性結果。

表2 WBC與細菌計數的臨界值評價

本研究采用UF-1000i自動尿液分析儀對218份中段尿進行了細菌計數,并與公認的診斷尿路感染（UTI）的金標準細菌培養結果進行了比較，細菌培養陽性結果為真菌時，未納入此次研究。細菌培養是確診UTI的可靠并且普遍的方法,但費時且費用較高，因此如何早期預見并篩查出UTI，是臨床期待實驗室急需解決的問題[5]。UF-1000i采用半導體激光流式細胞/核酸熒光染色計數、細胞和細菌計數雙檢測通道、特異性核酸熒光染色，能準確快速地對尿液中紅、白細胞以及細菌進行定量分析[6],已成為大多數醫院進行尿液分析的檢測手段。本研究運用UF-1000i尿液分析儀對中段尿進行檢測，選擇了與尿路感染關系緊密、與炎癥產生密切相關的參數（細菌計數、白細胞計數）進行了對比分析，并與診斷尿路感染的“金標準”細菌培養進行了比較，共檢出64份陽性標本，其中大腸埃希菌有24例，占很大一部分，與文獻報道一致[7]，其次為變形桿菌8例、葡萄球菌5例和糞腸球菌2例和其他菌種。

UF-1000i對WBC計數、細菌計數的檢測值與細菌培養結果呈正相關關系。通過ROC曲線分析，結合特異性和靈敏度兩者之和最大原則，計算出WBC計數的cut-off值為30.56個/μl,細菌計數的cut-off值為710.43個/μl（P<0.05）。所以當WBC計數和細菌計數為雙陽性時，UF-1000i診斷尿路感染的真陽性率為42.9%，其不能夠準確篩選陽性標本，而其真陰性率為91%，因此能夠準確的篩選陰性標本。

本研究中假陽性有52例，發生率較高，這可能與尿液成分復雜，干擾因素較多有關，如儀器攜帶污染過高[8-10]；儀器對染色后的活菌和死菌均能不加區別的計數[11]，而培養只針對活菌；尿中過多的結晶超過了儀器的鑒別能力,其將部分非晶型結晶誤認為細菌；患者在培養前服用了抗生素；患者使用了非潔凈容器留取尿標本等。假陰性有11例,經鏡檢有7例為細菌體積增大或聚集成團,可能被儀器誤認為其他顆粒,有4例鏡下見細菌體積微小且數量少，可能為尿液儲留時間過短，導致菌群數量不足，未達到儀器檢出限。

綜上所述,本次實驗雖未找到可靠的篩查陽性標本的證據，但卻發現當細菌計數與WBC計數均為陰性時，能夠快速的篩查陰性標本。對于癥狀較為明顯的患者和疑似為陽性的標本,就算細菌計數與WBC計數沒有達到閾值，也應結合其他指標如亞硝酸鹽，尿白細胞酯酶[12-14]等綜合判斷，必要時做尿培養，UF-1000i尿液分析儀主要用于尿路感染的篩查，不能替代尿培養，尿培養仍是診斷尿路感染的金標準。