抗-HCV,HCV RNA檢測在丙型肝炎中的應用價值探討

呂金娥，陶婭琳，馬麗娟，李婭萍，尹春瓊，包艷

（曲靖市第二人民醫院檢驗科，云南 曲靖655000）

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引發的病毒性肝炎疾病,會導致機體肝臟慢性炎癥壞死及纖維化，最終造成肝硬化或癌變，對患者生命健康造成嚴重威脅,所以需盡早診斷和治療[1]。近年來隨著檢驗技術的不斷發展,丙型肝炎檢查方法已逐漸完善[2]。目前對丙型肝炎主要采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）及聚合酶鏈反應（PCR），前者用于檢測血清中HCV抗體,后者用于監測HCV RNA[3，4]。為探究抗-HCV以及血清HCV RNA在診斷丙型肝炎中的價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年5月-2018年12月來我院就診，檢驗科收集的143例抗-HCV初篩實驗陽性的患者標本，其中男87例，女56例,年齡19～81歲。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 取患者清晨空腹靜脈血3ml，3000 r/min離心10min，將血清轉移至無RNA酶的離心管置于-20℃冰箱內保存,每周四進行HCV RNA檢測,剩余血清當日進行抗-HCV及ALT的檢測。

1.2.2 儀器與試劑 ABI 7300熒光定量分析儀（美國ABI公司）、HCV RNA診斷試劑盒及質控品（中山大學達安基因股份有限公司）；MUltiskan MK3全自動酶標儀（Labsystem Dragon公司）；HCV抗體ELISA試劑（上海科華生物股份有限公司）及質控品（北京康徹恩坦生物技術有限公司）；日立7600全自動生化分析儀、ALT試劑（中申北控生物股份有限公司）。

1.2.3 實驗方法 嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.2.4 統計學處理 采用SPSS19.0統計學軟件進行分析。對結果進行t檢驗和χ2檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 在143例抗-HCV初篩陽性的樣本中，99例HCV RNA陽性（69.23%），44例HCV RNA陰性(30.76%),且陰性結果中有33例抗-HCV S/CO＞10；99例HCV RNA陽性樣本,隨著抗-HCV S/CO比值的增大HCV RNA的陽性率增加，差異有統計學意義(P＜0.01)；且在不同的S/CO比值區間HCV RN A載量水平增加出現的陽性率無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 HCV RNA陽性患者ALT異常率高于陰性患者，差異有統計學意義（0.01＜P＜0.05）；隨著HCV RNA病毒載量水平的增高ALT異常率沒有顯著性差異（P＞0.05）。見表2。

3 討論

表1 抗-HCV陽性結果在不同S/CO比值區間HCV RNA結果分析

表2 HCV RNA病毒載量與ALT結果分析

丙型病毒性肝炎是由HCV感染所引起的傳染性疾病，主要通過血液在人群中傳播，其發病率僅次于乙型病毒性肝炎[5]。丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引發的病毒性肝炎疾病，會導致機體肝臟慢性炎癥壞死及纖維化,最終造成肝硬化或癌變，對患者生命健康造成嚴重威脅，所以需盡早診斷和治療[1]。近年來隨著檢驗技術的不斷發展,丙型肝炎檢查方法已逐漸完善[2]。目前對丙型肝炎主要采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）及聚合酶鏈反應（PCR），前者用于檢測血清中HCV抗體，后者用于監測HCV RNA[3，4]。

本研究結果顯示：143例抗-HCV初篩陽性患者中有99例HCV RNA陽性，陽性率為69.23%，明顯高于福建林曉淵[6]報道的46.6%，這可能與地域差異及研究對象有關，但與貴州羅天永等[7]報道的67.7%及青海王春瑋[8]報道的70.44%結果相近。表1數據顯示隨著抗-HCV初篩陽性結果的S/CO比值的增大，HCV RNA的陽性率增高，差異有統計學意義（P＜0.01）與福建林曉淵[6]等較多國內研究報道一致；但在不同的S/CO比值區間HCV RNA載量水平增加出現的陽性率沒有統計學意義(P＞0.05），這與王春瑋等研究報道不一致[8]，可能與地區及個體差異有關及自身免疫功能及肝細胞再生等因素有關。在44例HCV RNA陰性（30.76%）結果中有33例的抗-HCV S/CO值＞10,這與濟南王燕等[9]報道的ELISA法抗-HCV S/CO＞10 HCV RN A的陽性率為100%差異較大,可能由于熒光定量PCR方法檢測HCV RNA的影響因素較多，特別是HCV為RNA病毒，容易被RNA酶降解，從而出現假陰性；另外機體丙肝復制呈間斷性，當病毒暫停復制時,HCV RNA濃度較低,可使檢測結果呈陰性,而抗-HCV會持續存在一段時間[10,11]。上述因素的存在,結合HCV RNA陰性肝功能ALT異常率為20.45%的證據，抗-HCV S/CO＞10、HCV RNA＜1.0×103IU/ml,不能排除HCV感染及病毒復制，在研究血清病毒載量與致病性的關系時,還應參考肝穿刺結果肝病理診斷及其他肝功能指標,以便得出更加準確的結論,用于指導治療，評估療效，判斷預后。

表2 結果顯示：HCV RNA陽性患者的ALT異常率高于HCV RNA陰性患者，差異有統計學意義（0.01＜P＜0.05），表明肝臟炎癥時HCV RNA檢出率高，ALT正常時HCV RNA檢出率較低，間接反映丙型肝炎病毒感染情況。然而，99例HCV RNA陽性患者中高達43.43%(43例)ALT正常,這可能與HCV對肝外組織的泛嗜性,尤其對單核細胞的作用,肝損害隱匿，臨床表現不典型，ALT升高不明顯甚至正常,對肝臟造成的炎癥反應輕仍有慢性化進展；也可能機體處于免疫耐受、應答平衡狀態。抗-HCV陽性并不代表感染HCV病毒，只能代表患者曾經感染過或正在感染；抗-HCV高低能間接反映感染情況，但不是絕對，還需檢測HCV RNA，且在HCV RNA陰性患者中仍存在ALT異常及S/CO＞10的情況。

綜上所述,單一檢測抗-HCV或者HCV RNA從而確定丙型肝炎感染存在病原學漏診,以HCV RNA為重要的檢測金標準時，應聯合檢測抗-HCV和ALT檢測,可降低丙型肝炎的漏檢率；在抗-HC V陽性,尤其S/CO＞10，HCV RNA陰性和ALT異常的情況下，應對HCV RNA連續檢測，降低HCV的漏診率，達到早診斷，早治療的目標。