金雙歧聯(lián)合嗎丁啉治療小兒胃腸炎對(duì)患兒免疫功能、氧化應(yīng)激水平影響分析

楊輝，李小芹，于靜，王向輝，高若飛，路鈺夏

（鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院消化內(nèi)科，河南 鄭州450000）

小兒胃腸炎的發(fā)生率明顯的上升,流行病學(xué)研究證實(shí)，小兒胃腸炎的發(fā)病率可達(dá)283~493/1萬(wàn)人左右[1]。臨床上小兒胃腸炎的發(fā)生能夠顯著影響患兒的生活和學(xué)習(xí),給家長(zhǎng)帶來(lái)了較為嚴(yán)重的心理負(fù)擔(dān)[2,3]。

藥物治療在小兒胃腸炎的治療過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用，常規(guī)的胃腸道動(dòng)力性藥物如嗎丁啉，雖然能夠改善胃腸道平滑肌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),減輕患兒的消化道癥狀表現(xiàn)。但長(zhǎng)期的臨床隨訪研究發(fā)現(xiàn)，嗎丁啉治療后,小兒胃腸炎的臨床病情緩解率不足40%，治療后半個(gè)月內(nèi)的復(fù)發(fā)率仍然較高[4]。金雙歧能夠通過(guò)雙歧桿菌的生理性作用,進(jìn)而改善胃腸道屏障、修復(fù)胃腸道黏膜上皮、改善胃腸道酸堿環(huán)境等，進(jìn)而輔助治療小兒胃腸炎。部分研究者探討了金雙歧治療小兒胃腸炎的臨床效果,認(rèn)為金雙歧能夠提高疾病的治療總體有效率,改善患兒的近期消化道癥狀[5]，但對(duì)于金雙歧治療后的氧化應(yīng)激性指標(biāo)和免疫功能的分析較少。為了揭示探討金雙歧輔助治療小兒胃腸炎的臨床效果,本次研究選取我院2015年12月-2018年2月收治的小兒胃腸炎患兒82例，探討了金雙歧聯(lián)合嗎丁啉輔助治療小兒胃腸炎的臨床效果，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年12月-2018年2月收治的小兒胃腸炎患兒82例病例進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)治療方法不同分為對(duì)照組和觀察組。對(duì)照組41例，男24例，女17例；年齡4～12歲，平均8.98±2.02歲；病程2個(gè)月～2年，平均0.91±0.22年。觀察組41例，男22例，女19例；年齡4～12歲,平均9.04±2.01歲；病程2個(gè)月～2年，平均0.90±0.25年。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴經(jīng)上消化道鋇餐檢查（氣鋇雙重造影）確診為胃腸炎；⑵存在腹脹、惡心、嘔吐、食欲不振等癥狀；⑶基礎(chǔ)生命體征平穩(wěn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并嚴(yán)重器質(zhì)性疾病者；⑵合并胃腸道出血性疾病者；⑶存在血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及精神系統(tǒng)疾病；⑷過(guò)敏體質(zhì)。兩組胃腸炎患兒一般資料比較，具有均衡性（P>0.05）。

1.2 治療方法 對(duì)照組:采用嗎丁啉(批號(hào)0502203 11南京揚(yáng)子江藥業(yè))，口服，0.3mg/kg，每日3次，飯前30min口服，連續(xù)治療14d；觀察組在采用嗎丁啉治療的同時(shí)，聯(lián)合金雙歧（內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司,產(chǎn)品批號(hào):20051202）,小于4歲,1.5片,每日3次，飯前30min口服，4歲至8歲，2.0片，每日3次,飯前30min口服,大于8歲，2.5片，每日3次，飯前30min口服，連續(xù)治療14d。

1.3 檢測(cè)方法 采集患者清晨空腹血5ml,置于肝素鈉抗凝管中，采用流式細(xì)胞儀雙標(biāo)法進(jìn)行CD4+/CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的檢測(cè)。相關(guān)標(biāo)記操作于5ml抗凝管中進(jìn)行，100UL全血與CD4-FITC/CD8-PE抗體室溫反應(yīng)25min,采用紅細(xì)胞裂解液optiLYse C溶血素溶解紅細(xì)胞,PBS液體洗滌三遍,每次5min，生理鹽水重新懸浮細(xì)胞，上機(jī)檢測(cè)。(FACS calibur流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)BD公司）。

分別在入院后48h內(nèi)和治療后48h內(nèi)均采集患兒靜脈血,1000r/min離心5min，離心半徑10cm，離心后收集上清液，采用免疫發(fā)光法檢測(cè)NO、SOD水平，加入檢測(cè)試劑，檢測(cè)儀器為美國(guó)Bio-Bad全自動(dòng)酶標(biāo)儀，配套試劑盒購(gòu)自羅氏檢測(cè)公司；收集上清液后加入采用ELISA法檢測(cè)IL-1β、PCT值，加入IL-1β、PCT檢測(cè)試劑盒,配套試劑盒購(gòu)自南京碧云天生物檢測(cè)公司,微型離心機(jī)HITETIC購(gòu)自上海精密儀器有限公司。

1.4 觀察指標(biāo) 觀察兩組患兒臨床療效、治療期間不良反應(yīng)情況及治療前后免疫指標(biāo)、NO、SOD、IL-1β、PCT水平變化情況。

臨床療效標(biāo)準(zhǔn)：⑴顯效：經(jīng)治療后臨床癥狀3d內(nèi)緩解，7d內(nèi)完全消失；⑵有效：經(jīng)治療后臨床癥狀14d內(nèi)緩解；⑶無(wú)效：沒(méi)達(dá)到上述要求。總有效率=顯效率+有效率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量指標(biāo)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）進(jìn)行描述，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒治療后臨床療效比較 觀察組患兒總有效率為95.12%,對(duì)照組為75.61%，觀察組患兒總有效率高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。見表1。

表1 兩組患兒治療后臨床療效比較（n）

2.2 兩組患兒治療前后NO、SOD、IL-1β、PCT水平變化情況 治療前，兩組患兒NO、SOD、IL-1β、PCT水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，觀察組患兒SOD水平高于對(duì)照組，NO、IL-1β、PCT水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。見表2。

2.3 兩組患兒治療前后免疫功能指標(biāo)水平變化情況 治療前,兩組患兒免疫功能指標(biāo)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后,觀察組患兒CD4+、CD4+/CD8+水平高于對(duì)照組，CD8+水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。見表3。

2.4 兩組患兒不良反應(yīng)情況比較 觀察組患兒不良反應(yīng)率為7.32%，對(duì)照組為4.88%，兩組患兒不良反應(yīng)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表4。

3 討論

不規(guī)律的進(jìn)食時(shí)間、不衛(wèi)生的飲食及過(guò)度攝入碳酸類飲料，均能夠促進(jìn)小兒胃腸炎的發(fā)生，特別是在合并有自身免疫力下降的兒童中,小兒胃腸炎的發(fā)生率可進(jìn)一步的上升[6,7]。小兒胃腸炎的發(fā)生，不僅能夠?qū)е路磸?fù)腹瀉、食欲不振等臨床癥狀，同時(shí)還能夠增加遠(yuǎn)期其他胃腸道疾病的發(fā)生率[8,9]。臨床上通過(guò)抑制胃酸分泌內(nèi)藥物、胃腸道動(dòng)力性藥物及胃黏膜保護(hù)劑等,雖然能夠顯著改善患兒短期內(nèi)的臨床癥狀，但一項(xiàng)囊括了36例樣本量的小兒胃腸炎治療隨訪研究可見,常規(guī)藥物如嗎丁啉治療后,小兒胃腸炎的頭暈乏力等非消化系統(tǒng)癥狀仍然較為明顯，疾病的總體治療有效率不足40%[2]。因此臨床上尋找可靠的輔助性治療藥物,對(duì)于改善小兒胃腸炎的臨床結(jié)局具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

表2 兩組患兒治療前后NO、SOD、IL-1β、PCT水平變化情況（±s）

表2 兩組患兒治療前后NO、SOD、IL-1β、PCT水平變化情況（±s）

組別 例數(shù)NO(μmol/l)治療前 治療后SOD(IU/ml)治療前 治療后IL-1β(pg/ml)治療前 治療后PCT(ng/ml)治療前 治療后對(duì)照組觀察組t P 41 41 14.21±3.20 14.25±3.18 0.057 0.477 12.98±2.75 11.38±2.52 2.747 0.004 38.66±5.85 38.49±5.65 0.134 0.447 48.04±5.86 55.26±6.01 5.508 0.000 18.20±2.65 18.14±2.70 0.102 0.460 11.02±1.33 8.52±1.10 9.275 0.000 2.05±1.01 2.02±1.06 0.131 0.448 0.97±0.18 0.45±0.11 15.784 0.000

表3 兩組患兒治療前后免疫功能指標(biāo)水平變化情況（±s）

表3 兩組患兒治療前后免疫功能指標(biāo)水平變化情況（±s）

組別例數(shù)CD4+治療前治療后CD8+治療前 治療后CD4+/CD8+治療前 治療后對(duì)照組觀察組t P 41 41 35.62±1.34 35.60±1.41 0.073 0.471 40.52±1.45 45.21±1.39 14.951 0.000 32.12±1.89 32.11±1.92 0.024 0.491 28.11±1.64 25.16±1.55 8.371 0.000 1.18±0.18 1.17±0.20 0.238 0.406 1.50±0.26 1.71±0.32 3.261 0.001

表4 兩組患兒不良反應(yīng)情況比較（n）

金雙歧內(nèi)含有數(shù)量較多的雙歧桿菌、保加利亞乳酸桿菌，其主要成分為滅活的雙歧桿菌，能夠在口服后迅速產(chǎn)酸并適應(yīng)腸道環(huán)境。雙歧桿菌能夠通過(guò)促進(jìn)腸道黏膜上皮腺體細(xì)胞的修復(fù),降低腺體的炎癥性損傷，抑制腺體細(xì)胞的凋亡[10]。雙歧桿菌能夠提高腸道內(nèi)的有益菌的活性和數(shù)量,抑制其他細(xì)菌的繁殖和擴(kuò)增，同時(shí)相關(guān)方面的研究還認(rèn)為，雙歧桿菌能夠降低腸黏膜局部的PH值水平，降低腸道平滑肌的閾電位水平,改善腸道的蠕動(dòng)功能[11]。部分研究者揭示了金雙歧輔助常規(guī)藥物治療后,小兒胃腸炎患者的炎癥因子指標(biāo)的改善效果[12],但對(duì)于氧化應(yīng)激性指標(biāo)如超氧化物歧化酶Orgotein(Superoxide Dismutase,SOD)及一氧化氮（Nitric Oxide,NO）的分析研究不足。

本次研究對(duì)于不同治療方式的探討發(fā)現(xiàn)，觀察組患兒聯(lián)合金雙歧及嗎丁啉治療后,患兒的總體治療有效率明顯上升，高于單純嗎丁啉治療組，差異較為明顯,提示了金雙歧在輔助治療小兒胃腸炎過(guò)程中的作用。通過(guò)匯集不同的相關(guān)文獻(xiàn)，筆者認(rèn)為這主要由于金雙歧的下列幾個(gè)方面的作用有關(guān)[13]：⑴金雙歧能夠產(chǎn)生多種有機(jī)酸，抑制其他致病細(xì)菌的繁殖，改善胃腸道黏膜的生理屏障作用；⑵金雙歧能夠通過(guò)產(chǎn)酸，穩(wěn)定胃腸道的環(huán)境，降低了炎癥性因子IL-6釋放導(dǎo)致的胃腸道黏膜的損傷。吳小華等[14]研究者也認(rèn)為，金雙歧治療小兒胃腸炎，能夠提高20%左右的臨床總體治療有效率，特別是在金雙歧治療時(shí)機(jī)較早或者治療時(shí)機(jī)較長(zhǎng)的患兒中,其治療后的臨床總體有效率可進(jìn)一步的上升。白細(xì)胞介素（IL-1β）及降鈣素原（PCT）是炎癥性相關(guān)因子,其能夠促進(jìn)胃腸道上皮細(xì)胞膜完整性的破壞，NO、SOD是氧化應(yīng)激性相關(guān)指標(biāo)，SOD能夠提高還原型復(fù)合物的濃度,抑制氧化反應(yīng)的激活程度，NO能夠激活氧化游離自由基的濃度，加劇氧化損傷過(guò)程,治療后的觀察組患者的SOD明顯的上升，而NO、IL-1β、PCT明顯的下降，提示了金雙歧對(duì)于患兒體內(nèi)氧化應(yīng)激性過(guò)程的調(diào)控和對(duì)于體內(nèi)炎癥反應(yīng)的抑制作用,這主要由于金雙歧在體內(nèi)能夠通過(guò)雙歧桿菌合成多種泛酸和還原型維生素，提高還原性化合物SOD的濃度；而金雙歧對(duì)于炎癥反應(yīng)的抑制作用,這主要由于雙歧桿菌能夠抑制巨噬細(xì)胞的活性,降低其釋放IL-1β、PCT的能力。CD4+能夠激活體內(nèi)效應(yīng)T淋巴細(xì)胞，改善免疫功能，而CD8+能夠抑制T淋巴細(xì)胞的激活，抑制免疫系統(tǒng)過(guò)度激活,觀察組患兒治療后的CD4+、CD4+/CD8+均明顯上升,而CD8+T淋巴細(xì)胞明顯下降,提示了金雙歧對(duì)于患兒體內(nèi)免疫功能的改善作用。但部分研究者并不認(rèn)為金雙歧能夠改善胃腸炎患兒的免疫功能[15]，存在不同的臨床結(jié)論，考慮可能與金雙歧治療周期或者隨訪時(shí)間的不同有關(guān)。最后本次研究發(fā)現(xiàn)金雙歧治療后，不良反應(yīng)的發(fā)生率并無(wú)明顯的差異,提示金雙歧治療的臨床安全性較為可靠。

綜上所述，金雙歧聯(lián)合嗎丁啉治療，能夠進(jìn)一步提高疾病的治療效果，抑制炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)、提高機(jī)體的免疫功能，同時(shí)金雙歧治療的臨床安全性較為可靠。