廣西南寧地區(qū)健康成年男性血清CYFRA21-1參考區(qū)間的建立

王芃，葉玉萍，甘敏，張林波，林發(fā)全

（1.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心，廣西 南寧530021；2.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 南寧530021）

肺癌是一種臨床常見的惡性腫瘤,以非小細(xì)胞肺癌(Non-Small Cell Lung cancer,NSCLC)為主[1]。CYFRA21-1為細(xì)胞角蛋白19片段，主要用于非小細(xì)胞肺癌患者的篩查及預(yù)后評估[2,3]。為了建立本地區(qū)健康成年男性的血清CYFRA21-1參考區(qū)間，本研究收集了4441例廣西南寧地區(qū)健康成年男性體檢者的血清標(biāo)本進(jìn)行檢測分析，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2017年1月至2018年1月于廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的成年男性4516例，年齡為20～89歲，平均年齡為43±12歲，主要為機(jī)關(guān)事業(yè)單位工作人員及企業(yè)職工，均為南寧地區(qū)常住居民。依照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(CLSI)的建議，本研究建立了排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴有濫用藥物、毒品者；⑵有免疫缺陷病史者；⑶體檢前1d飲酒者；⑷當(dāng)前用藥者；⑸體檢前4周內(nèi)進(jìn)行過大手術(shù)者；⑹有腫瘤病史者；⑺肝功能、腎功能結(jié)果異常者；⑻胸部平片檢查結(jié)果異常者。經(jīng)篩選,最終共納入4441例健康成年男性。

1.2 標(biāo)本采集 早上空腹采集靜脈血于干燥管，標(biāo)本3000r/min離心10min后上機(jī)檢測，檢測過程均按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行。

1.3 檢測儀器和方法 采用瑞士羅氏Cobas e602全自動電化學(xué)分析儀及其相應(yīng)配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，檢測血清中CYFRA21-1水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)性檢驗(yàn)采用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)。經(jīng)檢驗(yàn)所有計(jì)量資料不符合正態(tài)分布（P＜0.05）,因此,所有計(jì)量資料采用中位數(shù)、四分位數(shù)間距進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。用Kruskal-wallis H檢驗(yàn)分析比較廣西南寧地區(qū)健康成年男性不同年齡組血清CYFRA21-1的差別后,用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行組間兩兩比較；Spearman相關(guān)分析判斷血清CYFRA21-1與年齡的相關(guān)關(guān)系；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(CLSI)指南建立參考區(qū)間,使用D／R比值法剔除離群值,以非參數(shù)方法確定參考區(qū)間，從第0百分位數(shù)到第95百分位數(shù)所在的區(qū)間即為參考區(qū)間[4]。

2 結(jié)果

納入4441例體檢者，平均年齡為43±12歲。納入人群的血清CYFRA21-1的分布頻數(shù)見圖1。為了做分層分析,客觀反映廣西南寧地區(qū)健康成年男性血清CYFRA21-1水平,將研究對象按年齡段分為6個(gè)組,分別為21～29歲,30～39歲,40～49歲，50～59歲，60～69歲與≥70歲6個(gè)年齡組。采用Kruskal-wallis H檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析各年齡組血清CYFRA21-1差異,結(jié)果顯示:各年齡組血清CYFR A21-1水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖2，P<0.05。

圖1 4441例健康成年男性CYFRA21-1的分布頻數(shù)

圖2 廣西南寧地區(qū)健康成年男性不同年齡組血清CYFRA21-1水平的比較

采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行組間兩兩比較，除20～29歲與30～39歲年齡組外，其余各年齡組間均存在差異(P<0.05)。對廣西南寧地區(qū)健康成年男性血清CYFRA21-1水平與年齡進(jìn)行Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，血清CYFRA21-1水平與年齡呈正相關(guān)(r=0.185,P<0.05)。血清CYFRA21-1檢測結(jié)果經(jīng)Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn),不符合正態(tài)分布,應(yīng)采用非參數(shù)方法建立參考區(qū)間,見表1。

血清CYFRA21-1水平年均增長量=(后10年CYFRA21-1均數(shù)－前10年CYFRA21-1均數(shù))/10。由此可得,20～29歲、30～39歲、40～49歲、50～59歲、60～69歲組血清CYFRA21-1水平年均增長量分別為-0.004、0.017、0.023、0.021、0.043μg/L。

3 討論

細(xì)胞角蛋白是存在于上皮細(xì)胞中的細(xì)胞骨架中間絲蛋白，其表達(dá)對特定的組織具有特異性。細(xì)胞角蛋白19片段可在低分化的鱗狀上皮細(xì)胞中表達(dá)，在肺鱗癌組織中可大量表達(dá)[5]。當(dāng)癌變的細(xì)胞溶解、壞死脫落時(shí),癌細(xì)胞內(nèi)的CYFRA21-1會大量釋放進(jìn)入血液循環(huán)[6]。研究發(fā)現(xiàn)血清CYFRA21-1水平可鑒別肺部疾病的嚴(yán)重程度，對非小肺癌的診斷以及病情變化的監(jiān)測具有重要意義[7,8]，對于乳腺癌、子宮頸癌、直腸癌等的診斷與治療也具有一定參考價(jià)值[9-11],是一個(gè)靈敏度極高的腫瘤標(biāo)記物[12]。然而，血清CYFRA21-1水平受年齡、性別、飲食習(xí)慣和地域等因素的影響,不同廠家的試劑或不同的檢測方法，其檢測結(jié)果也有一定差異[13]。因此，各實(shí)驗(yàn)室需要建立適合本地區(qū)人群的血清CYFRA 21-1參考區(qū)間。

近年來,我國非小細(xì)胞肺癌發(fā)病患者人數(shù)不斷上升，病理類型以鱗癌和腺癌為主，好發(fā)年齡集中在60歲～69歲，具有明顯的性別、年齡差異性，以男性患者居多[14]。Zhao等[13]對9954例中國漢族人血清CYFRA21-1水平進(jìn)行研究,其參考區(qū)間為0.00～4.47μg/L,與本研究中20～29歲、30～39歲、40～49歲年齡組確立的參考區(qū)間相似；本研究各年齡組參考區(qū)間均大于江蘇地區(qū)健康人群建立的參考區(qū)間0.00～2.84μg/L[15]，也大于瑞士羅氏公司提供的參考區(qū)間0～3.30μg/L。健康人群血清CYFRA21-1水平存在差異與檢測方法不同有關(guān)，可能與種族特征、所處地域、飲食特點(diǎn)和生活習(xí)慣等因素也有一定關(guān)系。本研究對廣西南寧地區(qū)4441例健康成年男性血清CYFRA 21-1水平分年齡段進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)其水平隨著年齡的增長而升高，與年齡呈正相關(guān)(r=0.185,P<0.05)，與其他學(xué)者的研究結(jié)果一致[16,17]。本研究比較了不同年齡組血清CYFRA21-1水平的年均增長量,結(jié)果顯示30歲以后,血清CYF RA21-1水平的增長速度隨年齡的增長而加快，其中60～69歲年齡組血清CYFRA21-1水平的增長速度最快,每年平均增長0.043μg/L。

本研究存在一定局限性,參考區(qū)間的建立受到多種因素的影響,包括檢測方法與地區(qū)人群抽樣等。研究對象主要為機(jī)關(guān)事業(yè)單位工作人員及企業(yè)職工，文化水平和生活水平較高，有一定的保健意識，且每年定期體檢，與從事體力勞動和其他行業(yè)的男性相比，常見疾病的構(gòu)成情況可能不同。此外，≥70歲年齡組中的研究對象數(shù)量相對較少，對研究結(jié)果的準(zhǔn)確性有一定影響。因此，本研究確立的健康成年男性血清CYFRA21-1水平的參考區(qū)間僅適用于廣西南寧地區(qū)使用電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測的臨床實(shí)驗(yàn)室。