泊洛沙姆407誘導大鼠器官脂肪變性的相關研究

李晶晶 秧茂盛

（吉首大學 湖南·湘西 416000）

0 導言

“脂肪變性”是一種由多種原因引起的臨床病理綜合征，其特征是甘油三酯和膽固醇在非脂肪細胞中的積累，是細胞脂肪變性和脂質在富氧器官，如肝臟和腎臟中的積累。肝臟是脂質代謝的重要器官，脂肪肝和高脂血癥被認為是代謝綜合征的病理表現，因此，脂肪變性及其相關疾病是世界性的公共衛生問題。

泊洛沙姆(poloxamer)是聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯(PEO-PPO-PEO)三嵌段共聚物，其商品名為普朗尼克(Pluronic)，通式為HO(C2H4O)a-(C3H6O)b-(C2H4O)aH，其中聚氧乙烯鏈具有相對親水性，聚氧丙烯鏈具有相對親油性，化合物分子量以及分子中環氧乙烯或環氧丙烯含量的比例不同,其物理性質也不同，因此是一種非離子型高分子表面活性劑。

P-407是一種三嵌段共聚物，已被用于建立小鼠劑量依賴性高脂血癥和動脈粥樣硬化模型。脂肪組織變性的動物模型旨在再現器官或組織脂肪變性的臨床體征和病理特征。本研究使用泊洛沙姆407(P-407)4個月，建立一種新的脂肪組織/器官變性大鼠模型。

1 材料和方法

（1）動物和處理。動物實驗符合《NIH實驗動物的護理和使用指南》原則。購買60只2個月大的雄性Sprague-Dawley大鼠及飼料。將大鼠單獨安置在溫度，濕度和光線受控的房間（分別為22-24°C，50-60%，12/12小時的明暗循環）。適應一周后，將動物隨機分配進行治療（P-407）或對照組（鹽水）組（每組6只大鼠）。給大鼠腹膜內注射P-407 1.0 g·kg-1或等量生理鹽水(10m L/kg)，每5天測量一次每只大鼠的體重。在實驗期間，大鼠可自由飲水和飲食，但在采血之前，大鼠需禁食過夜（≥12小時）。

（2）血脂濃度的測定。治療0,1,2,3或4個月后，通過腹腔注射3%戊巴比妥鈉鹽(1mL/kg)對大鼠進行終末麻醉，從心臟采集5至6m L血樣，在37°C下孵育60分鐘，離心10分鐘，收集血清并儲存在-80°C冰箱中直到分析。使用日立全自動生化分析儀檢測樣本指標，按試劑盒說明書進行操作。

（3）統計分析。實驗數據都用平均值±標準差（x±SD）進行表示，采用統計分析軟件SPSS 16.0進行數據分析處理。組間差異檢驗采用獨立樣本t檢驗分析。組織脂肪變性與血漿致動脈粥樣硬化指數（AIP，由Lg（TG/HDL）計算而得）和TC/HDL比值的相關性分析采用Spearman非參數相關性分析。p<0.05時，則認為組間差異具有統計學意義。

2 結果

經P-407處理的大鼠血清脂質濃度明顯高于對照組，與先前的報道一致。（見表1）

表1：反復腹腔注射1g/kg泊洛沙姆407(P-407)對雄性大鼠血脂濃度的影響

3 討論

本實驗證實，長期腹腔注射P-407可引起高脂血癥。在P-407給藥期間，肝臟、脾臟和腎臟的脂肪變性有時間依賴性，這種脂肪變性可能與抑制脂質代謝和脂質在各種組織和器官中的積累有關，相關研究有待深入。已有不少研究指出，動脈粥樣硬化性心血管疾病的不良結局與血脂異常有關。本研究結果表明，AIP和TC/HDL比值與脂肪變性呈正相關，此結果可能有助于相關疾病的防治。

泊洛沙姆407由約70%乙烯氧化物和30%丙烯氧化物組成，平均分子量11500，熔點56℃，無臭、無味，易溶于水、酸、堿，對金屬離子穩定。它具有特殊的反向熱膠凝作用，即低溫時為液體，體溫下成為凝膠，其毒性低，刺激性小，生物相容性好，是一種理想的藥物控釋材料，被廣泛應用于醫學、藥學等多個領域。例如在眼用制劑中的應用，張建強等以泊洛沙姆為溫敏型材料制備乳酸環丙沙星眼用即型凝膠，并對該制劑的眼刺激性進行了評價，確定了18%的泊洛沙姆407作為該眼用凝膠的基質，且對兔眼無刺激。表明該制劑制備方法簡單、劑量易于控制，展現出良好的眼部應用前景。高斐等通過研究以泊洛沙姆407為溫敏材料，制成的左氧氟沙星眼用凝膠的體外釋放試驗，發現該制劑制備方法簡單，用藥劑量易于控制，表明泊洛沙姆可用眼用制劑中。包晗等以泊洛沙姆407為基質制備成雙氯芬酸鈉眼用在體凝膠，并對其質量進行了初步評價，結果顯示該眼用在體凝膠制劑制備工藝簡單、穩定可靠、質量可控。泊洛沙姆407對人體無毒，已被批準用作一些藥品和個人護理產品的輔料。它有一種獨特性質，在低溫下是液體，受熱后變成固體，過程是可逆的。新方法正是利用了這一特性。研究人員將該物質加熱到高于體溫，使它變成固體，用于撐開血管。溫度下降后它變成液體，不會阻塞血管。

P-407誘導的大鼠脂肪變性模型優勢：（1）方便且廉價；（2）P-407劑量可以精確控制；（3）P-407給藥停止時，器官的血脂濃度和脂肪變性可恢復到基礎水平，這對研究高脂血癥所致損傷的時間依賴性和可逆性具有重要意義；（4）實驗大鼠的肝臟、脾臟和腎臟均發生脂肪變性，這可能是研究多器官脂肪變性的有用實驗工具。