基層醫院開展PCR 檢測可行性分析

劉忠俊，張艷亮

（1 云南省普洱市景東縣中醫院檢驗科，云南 景東；2 云南省醫科大學第一附屬醫院檢驗科，云南 昆明 ）

0 引言

目前新冠病毒引起的肺炎在全國乃至全球都是一個嚴峻的問題?；鶎俞t院建立聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）室能及時快速地開展PCR 實驗及新冠病毒的檢測，首先可以節約運輸成本的同時縮短檢測時間對于疫情的防控起重要的作用[1]。其次便于質量控制，主導醫院核心競爭力。為基層患者提供便利、安全、及時就診服務。而基層醫院臨床有基因擴增檢驗的需求，就此認為基層醫院建立PCR 實驗室是可行的。具體地開展硬性條件及目前面臨的困難如下：

1 分子診斷實驗室建設相關依據

（1）GB 19489-2008 《實驗室 生物安全通用要求》。

（2）GB 50346-2011 《生物安全實驗室建筑技術規范》。

（3）WS 233-2017 《病原微生物實驗室生物安全通用準則》。

（4）《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》 衛生部。

（5）《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》衛辦醫政發〔2010〕194 號。

（6）《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》衛辦醫政發〔2010〕194 號。

（7）《醫學實驗室質量和能力認可準則在分子診斷領域的應用說明》CNAS-CL02-A009:2018。

2 分子診斷實驗室布局要點及工作流程

2.1 房屋和設施

（1）醫療用房使用面積不少于200m2，房屋應道具備雙路供電或緊急發電設施，重要醫療設備和網絡應有不間斷電源。

（2）有相應的工作區域，流程應當滿足工作需要。

（3）設置醫療廢物暫存處，設置污物和污水處理設施和設備，滿足污物和污水的消毒和無害化的要求。

2.2 設計要點

（1）平面布局：不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室，各功能房間均宜設置獨立緩沖間。

（2）區域空氣流向：為避免交叉污染，PCR 實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配置和擴增區→擴增產物分析區。

（3）通風空調：為避免交叉污染，各功能用房的空氣不能摻混。組合式PCR 實驗室宜采用全新風直流式空調系統；當采用全新風系統有困難時，每區的空氣只能在其室內自循環。

2.3 樣本制備要點

（1）氣流組織宜采用上送下排，送風口和排風口布置應使室內氣流停滯的空間降低到最小程度。

（2）在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附近不得設送風口。

（3）高效過濾器排風口應設在室內被污染風險最高的區域，單向布置，不得有障礙。

（4）不能以回（排）風夾墻代替排風支管，排風高效過濾裝置與排風總管的連接全部是實體風管。

3 實驗室人員要求

根據CNAS-CL02-A009:2018《醫學實驗室質量和能力認可準則在分子診斷領域的應用說明》要求執行。

4 目前基層醫院存在的問題

4.1 基層醫院業務用房緊張

首先目前基層醫院業務用房處于緊張狀態。一個PCR 室至少需要200m2以上的建筑面積原則上有相連的四個獨立的工作區域。而核心實驗區用房面積不低于75%。

4.2 運營資金貧乏

基層醫院缺乏足夠的運營資金來投入實驗室的建設和實驗儀器的購置。首先PCR 實驗室裝修要求嚴苛。其次實驗室設備包括儀器的硬件和軟件、測量系統和實驗室信息系統等。

4.3 專業技術人員緊缺

專業技術人員緊缺是基層醫院PCR 室開展工作難點之一。老年化嚴重、學歷低、職稱低、人員緊缺是基層醫院用人的難點。

4.4 基層醫院檢驗設備的投入不足

PCR 室檢驗業務，所需的設備和耗材多。投資了設備后期還需投入許多的試劑和耗材來維持運行。

5 建立PCR 實驗室應對情況

5.1 人員的問題

①積極多渠道地引進高素質的檢驗人才。②同時重視管理人員及操作人員的深造與培訓，逐漸外送人員到上級醫院系統地進修學習。③對于實驗室不合理的人才結構狀況可以通過不斷的科室內部和院內學習理論知識和操作技能，取長補短共同提升進步。④通過各種渠道搭建學習平臺，通過線上培訓和邀請上級醫院專家、學者到醫院指導授課的方式提高業務水平。⑤建立合理的獎懲方案。

5.2 資金問題及項目推廣

（1）目前新型冠狀病毒肺炎疫情成為全球性嚴峻的問題之一的狀況下，及時開展基層二級實驗室檢測冠狀病毒在疫情防控過程中具有非常重要的意義。國家也在硬件和軟件上提供支持。

（2）根據醫院的現狀選擇有能力、穩定供應的設備及試劑供應商，儀器選擇遵行實用性、有效性、科學性原則，應考慮能源消耗和將來處理問題。

5.3 實驗區域設置問題

合格的PCR 實驗室做到“十六字”原則，“各區獨立、注意風向、因地制宜、方便工作”[2]。在醫院房間緊張無法滿足相同樓層的狀況下筆者認為可以引進目前疫情狀態下新冠檢測的方艙實驗室建設方法[3]。

5.4 市場預測

5.4.1 加強PCR 室開展項目宣傳和后期效益分析

具體的開展項目及臨床意義如下所示：

5.4.1.1 實時熒光PCR 檢測開展的項目及臨床意義

見表1。

表1 實時熒光PCR 檢測開展的項目及臨床意義

5.4.1.2 焦磷酸測序可開展項目

見表2。

表2 焦磷酸測序開展項目

根據對本院開展項目統計如下：

5.4.2 目前標本量

目前每天有5 例HBV-DNA 檢測， HCV-RNA 0-2 例，HBV P 區耐藥基因測序0-1 例，結核T 細胞檢測0-3 例，地貧0-2 例，呼吸道病原核酸檢測0-5 例，HPV 基因檢測5-20 例，其他項目有待宣傳開發。

5.4.3 可開發潛力

（1）PCR 由于需較多手工操作，且操作流程多，對環境要求高，檢測難度大導致很多小型醫院在硬件和軟件上不具備開展條件，縣城周邊醫院以及鄉鎮醫院一般不會開展，社會效益顯著，市場開發空間很大[6]。

（2）由于各種新的醫療技術的發展和人類對基因檢測的認識，開展PCR 及測序病人會逐年增加，已經越來越受到重視。地中海貧血、G6PD 酶、Y 染色體檢查及耳聾基因檢測等產前篩查都能規避遺傳疾病風險，對優生優育有著重要的診斷價值[7-9]。

（3）目前新型冠狀病毒引起的肺炎疫情牽動了全世界人民的心，國務院提出的應檢盡檢的指示對基層醫院PCR室建設提供了技術和設備的支持。基層PCR 的及時開展及時方便地對病毒篩查對基層防控疫情有著重要的作用。

PCR 的發展離不開國家政策的傾斜扶持和醫學界對PCR 檢驗知識的認可。通過檢驗人員不間斷的學習和推廣，大量地培養人才梯隊，為醫學檢驗技術及疫情的防控發揮作用[10]。

綜上所述，基層醫院開展PCR 室檢驗項目是可行的[11，12]。