基質金屬蛋白酶3在風濕免疫性疾病診斷、療效評估中的價值

陳紅 王小超 陶麗菊

(右江民族醫學院附屬醫院，廣西 百色 533000)

風濕免疫性疾病與機體免疫功能紊亂有密切關系，臨床主要表現出疼痛、發熱、晨僵、皮疹、潰瘍、關節腫脹、活動受限、關節畸形等。風濕免疫性疾病種類繁多，其中以類風濕關節炎、強直性脊柱炎、系統性紅斑狼瘡等最為常見，具有較高的致殘率。目前尚不完全清楚該類疾病發生的確切機制，但多數流行病學和基礎研究結果表明該病與感染、免疫紊亂、遺傳、內分泌和環境等具有重要關系。基質金屬蛋白酶(MMPs)主要生物學作用是降解細胞外基質〔1〕。目前已經發現20種MMPs，根據底物不同可分為5類，其中MMP3屬于基質溶解素型，能夠降解介質中的蛋白多糖、彈性纖維、層黏連蛋白等多種基質蛋白。風濕免疫性疾病患者中存在廣泛的炎癥細胞浸潤、細胞外基質代謝紊亂、血管炎性損傷，提示MMP3在風濕免疫性疾病發生、進展過程中具有一定作用〔2〕。本文擬分析MMP3在風濕免疫性疾病診斷、療效評估中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇右江民族醫學院附屬醫院2017年1月至2019年6月收治的164例風濕免疫性疾病患者(觀察組)和同期在右江民族醫學院附屬醫院進行健康體檢的150例健康者(對照組)。觀察組男69例，女95例；年齡44～68歲，平均(53.64±14.82)歲；病程5個月至10年，平均(4.85±1.92)年；類風濕關節炎73例，強直性脊柱炎54例，系統性紅斑狼瘡37例。對照組男64例，女86例；年齡56～73歲，平均(64.24±15.37)歲。納入標準：①符合類風濕關節炎、強直性脊柱炎或系統性紅斑狼瘡診斷標準；②符合各種疾病臨床表現、生化指標和影像學改變；③在參與本研究前6個月內未接受任何藥物治療；③僅患有一種風濕免疫性疾病；④對研究內容知情同意，并自愿簽署知情同意書。排除標準：①合并嚴重臟器器質性和功能性疾病者；②合并感染或其他免疫性疾病者。兩組年齡和性別構成無明顯差異(P>0.05)。

1.2分組 (1)根據疾病是否處于活動期，將觀察組分為活動期(79例)和非活動期(85例)2個亞組。活動期判斷標準：類風濕關節炎者疾病活動評分(DAS28)>3.2分，強直性脊柱炎者Bath強直性脊柱炎活動指標(BASDAI)評分≥6分，系統性紅斑狼瘡者疾病活動指數(SLEDAI)>4分。(2)根據疾病治療效果，將觀察組分為顯效(51例)、有效(82例)和無效(31例)3個亞組。

1.3標本采集 采集患者空腹靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min后分離血清，置于-70℃冰箱保存。

1.4實驗室檢測 采用酶聯免疫吸附試驗試劑盒檢測血清MMP3水平，試劑盒由Oneogene公司提供，檢測設備為深圳雷杜生命科學股份有限公司RT-6300全自動酶標分析儀。采用免疫比濁法檢測血清C反應蛋白(CRP)水平，由邁克生物股份有限公司提供，檢測儀器為日立LST 008全自動生化分析儀。采用深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司VISION Pro 全自動動態血沉分析儀檢測患者紅細胞沉降率(ESR)。以上操作嚴格按照試劑盒說明書和儀器操作規程進行。

1.5統計學方法 采用SPSS25.0軟件進行t檢驗、F檢驗、χ2檢驗、q檢驗及Pearson相關性分析。

2 結 果

2.1各組血清MMP3水平比較 觀察組血清MMP3水平〔(165.74±29.64)ng/ml〕明顯高于對照組〔(39.24±11.63)ng/ml,t=48.922，P=0.000〕，且類風濕關節炎亞組、強直性脊柱炎亞組、系統性紅斑狼瘡亞組血清MMP3水平〔(164.27±31.75)、(169.64±28.41)、(162.94±32.95)ng/ml〕也明顯高于對照組(t=42.760、46.542、37.651，均P=0.000)。

2.2疾病活動性與血清MMP3水平的關系 活動期亞組(198.26±32.18)ng/ml)、非活動期亞組〔(132.41±28.59)ng/ml〕和對照組血清MMP3水平比較差異有統計學意義(F=1 305.209,P=0.000)。活動期亞組和非活動期亞組明顯高于對照組(q=70.204、40.804，均P=0.000)。活動期亞組明顯高于非活動期組(q=25.468，P=0.000)。

2.3不同療效患者血清MMP3水平比較 顯效組、有效組和無效組治療后MMP3水平〔(52.36±17.64)、(89.72±23.17)、(153.82±27.03)ng/ml〕差異有統計學意義(F=156.849，P=0.000)，其中顯效組顯著低于有效組和無效亞組(q=24.871、16.912，均P=0.000)，有效組顯著高于無效組(t=13.580，P=0.000)。

2.4血清MMP3水平與炎性因子水平的相關性 血清MMP3水平與CRP和ESR水平存在明顯正相關(r=0.532、0.519，P=0.001、0.008)。

3 討 論

風濕免疫性疾病是臨床常見的一組肌肉骨骼系統疾病，包括彌漫性結締組織病和各種原因引起的關節和關節周圍軟組織疾病，據統計我國類風濕關節炎、強直性脊柱炎、系統性紅斑狼瘡等常見風濕免疫性疾病的患病人數分別高達400萬、360萬和65萬，這些疾病具有患病率高、致殘性強等特點，嚴重影響患者生活質量和勞動能力，造成沉重的家庭和社會負擔。風濕免疫性疾病尤其是彌漫性結締組織疾病具有以下特點：①與遺傳具有密切關系，強直性脊柱炎與人類白細胞抗原(HLA)-B27陽性、類風濕性關節炎與HLA-DR4、系統性紅斑狼瘡與HLA-DR2和HLA-DR3有關〔3～5〕；②與免疫球蛋白升高、ESR加快、血管炎癥免疫復合物沉淀等有關；③病程上多呈慢性且遷延反復；④通過激素、免疫抑制劑等治療通常可有一定效果。

研究表明，MMPs在風濕免疫性疾病發生、進展過程中具有重要作用，其中MMP3因其能夠降解纖維連接蛋白、彈性蛋白、Ⅲ～Ⅶ型膠原、層黏連蛋白等，被認為是骨關節炎、類風濕關節炎軟骨降解過程中最重要的蛋白酶類〔6〕。MMP3主要由化膜細胞、軟骨細胞、巨噬細胞、成纖維細胞等表達和分泌，其表達受到多種細胞因子和生長因子的調控，其中腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、INF-α、IL-1、表皮生長因子(EGF)等可誘導MMP3表達，而IL-4、IL-11、IL-13、轉化生長因子(TGF)-β可抑制MMP3表達。MMP3能夠降解完整的基底膜，以往研究表明MMP3在腫瘤細胞轉移和侵襲過程、炎性細胞移行中具有重要作用〔7〕。風濕免疫性疾病發病時，IL-1、TNF-α、IL-6等刺激滑膜細胞表達并分泌MMP3酶原，纖溶酶、組織蛋白酶G等可將MMP3酶原前肽切除形成具有生物學活性的MMP3，活化的MMP3還可切除MMP3酶原前肽使其激活而產生瀑布式放大效應〔8〕。

CRP和ESR是臨床常用的風濕免疫性疾病病情、療效評估的指標，提示MMP3在風濕免疫性疾病中發生、進展中具有重要作用，且可作為活動期診斷、功能療效評估的生物標志物。

古潔若等〔9〕采用cDNA微陣列芯片檢測了強直性脊柱炎患者采用抗TNF-α單克隆抗體藥物治療前和治療后3個月滑膜細胞的1 176個基因表達譜，結果發現MMP3是治療前后表達差異最顯著的基因，體外細胞研究又發現MMP3能夠誘導單核細胞TNF-α、c-fos和c-jun等炎癥相關基因表達，通過下調MMP3表達，可使TNF-TNFR2-JNK-AP-1信號通路表達下調，進而減少致炎因子表達和下調。馬劍達等〔10〕采用受試者工作特征(ROC)曲線分析了MMP3在類風濕性關節炎病情活動評估中的應用價值，結果表明單獨采用MMP3診斷類風濕關節炎病情活動的曲線下面積(AUC)為0.822(女性)和0.824(男性)，臨界值分別為84 μg/L(女性)和168 μg/L(男性)，而聯合CRP時的敏感度可從單獨應用MMP3的84.7%提高至97.2%，可見MMP3在類風濕關節炎病情活動評估中具有重要的應用價值。

綜上，風濕免疫性疾病患者血清MMP3水平明顯升高，該指標可作為疾病活動性和療效評估的指標之一，可通過檢測MMP3水平評估患者病情活性和療效，以指導臨床治療。