長鏈非編碼RNA在肝纖維化中的作用研究進(jìn)展

張春艷，顏羽昕，梁潔，孟根斯立木，馬月宏

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010059

肝纖維化是肝臟結(jié)締組織異常增生的慢性病理過程，可導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)大量累積，包括α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)和Ⅰ型膠原α(type Ⅰ collagen α1 chain，Col1α1)，并釋放促炎因子和促纖維化因子。多種慢性肝病如病毒性肝炎、酒精中毒、藥物濫用、代謝綜合征、遺傳代謝性疾病及自身免疫性肝炎等均會導(dǎo)致肝纖維化[1-2]。目前肝纖維化的調(diào)節(jié)機(jī)制尚不明確，激活肝星狀細(xì)胞(hepatic fibrosis，HSC)是肝纖維化發(fā)展的重要步驟。正常的HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)，由于某種病因損傷后HSC被激活，并被分化為成肌纖維母細(xì)胞樣的細(xì)胞，從而促進(jìn)纖維化的形成與發(fā)展。隨著對長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)生理作用及其在肝纖維化發(fā)病中作用機(jī)制的深入研究，通過調(diào)節(jié)肝纖維化患者體內(nèi)lncRNA活性治療肝纖維化有望成為現(xiàn)實(shí)。本文就lncRNA在肝纖維化中的作用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 LncRNA概述

1.1定義 LncRNA是長度>200 nt的競爭性內(nèi)源RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)，也是RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄的副產(chǎn)物，廣泛存在于動物、植物、酵母甚至病毒中，無編碼蛋白質(zhì)的功能。LncRNA與蛋白質(zhì)編碼基因相似，相比miRNA，其在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄比例更高，可在多個水平調(diào)控基因的表達(dá)，在胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、疾病及腫瘤的發(fā)生過程中具有重要作用[3]。

1.2分類及作用 L n c R N A 可分為5類：同義lncRNA、反義lncRNA、雙向lncRNA、內(nèi)含子lncRNA及基因間lncRNA[4]。LncRNA具有4種作用：(1)支架作用。與兩種或兩種以上的蛋白質(zhì)相結(jié)合而發(fā)揮調(diào)控作用；(2)誘餌作用。誘導(dǎo)并結(jié)合一系列調(diào)控因子并阻礙其與相應(yīng)的功能位點(diǎn)結(jié)合而發(fā)揮調(diào)控作用；(3)引導(dǎo)作用。招募特定的蛋白質(zhì)并與之結(jié)合形成復(fù)合物而發(fā)揮調(diào)控作用；(4)信號作用。LncRNA可在空間和時間上反映轉(zhuǎn)錄因子或信號通路對基因的調(diào)節(jié)[4]。

2 促肝纖維化lncRNA

2.1肺腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1) MALAT1位于人類染色體11q13.1(小鼠染色體19qA)，長約8 kb，在腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲中起到關(guān)鍵作用[5]。Yu等[6]發(fā)現(xiàn)，在四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化模型中，MALAT1的表達(dá)在活化的HSC中明顯上調(diào)，且與miR-101b的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。MALAT1和RAS相關(guān)C3型肉毒桿菌底物1(ras-related C3 botulinum toxin substrate 1，Rac1)是miR101b的靶標(biāo)，前者可作為ceRNA增強(qiáng)Rac1的表達(dá)，促進(jìn)HSC的增殖和活化。Dai等[7]發(fā)現(xiàn)，從亞砷酸鹽處理的人肝細(xì)胞中提取的MALAT1可通過與miRNA-26b結(jié)合促進(jìn)HSC細(xì)胞系LX-2的活化。

2.2漿細(xì)胞瘤變型異位子1(plasmacytoma variant translocation gene 1，PVT1) PVT1位于染色體8q24.21，在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有分布。Yu等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，PV T1通過競爭性結(jié)合miR-152抑制PTCH1(patched 1)，從而激活刺猬信號通路(Hedgehog signaling pathway)和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)過程。自噬相關(guān)基因14(autophagy related gene 14，ATG14)是miR-152的直接靶標(biāo)，通過PVT1-miR-152-ATG14信號通路誘導(dǎo)自噬有助于缺氧條件下HSC的激活，可促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展。

2.3HOX轉(zhuǎn)錄反義基因間RNA(HOX transcript antisense intergenic RNA，Hotair) Hotair位于12號染色體，具體位于HOXC基因座內(nèi)HOXC11和HOXC12之間，包含6232個堿基對。Hotair在乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌及非小細(xì)胞肺癌等腫瘤中呈高表達(dá)[9]。Fu等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，Hotair可通過與miR-148b競爭性結(jié)合而上調(diào)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyltransferase 1，DNMT1)，進(jìn)而誘導(dǎo)HSC的活化。此外，Hotair還可通過抑制母體表達(dá)基因3(maternally ex-pressed gene 3，MEG3)的表達(dá)而促進(jìn)HSC的活化。Yu等[11]的研究發(fā)現(xiàn)，在CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠中Hotair表達(dá)增加。Hotair通過下調(diào)miR-29b的表達(dá)減弱其介導(dǎo)的表觀遺傳機(jī)制，從而導(dǎo)致DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3b(DNA methyltransferase 3b，DNMT3b)、第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)的甲基化增強(qiáng)，部分促進(jìn)HSC活化。

2.4肝纖維化相關(guān)lncRNA1(liver-enriched fibrosisassociated lncRNA1，LFAR1) LFAR1位于小鼠基因組的一個區(qū)域，該區(qū)域與人類染色體4q25同源，并與人CYP2U1和HADH基因相鄰。Zhang等[12]的研究發(fā)現(xiàn)，LFAR1可促進(jìn)Smad2/3與轉(zhuǎn)化生長因子-β受體1(transforming growth factor beta receptor 1，TGFβR1)的結(jié)合及其在細(xì)胞質(zhì)中的磷酸化，還可直接與Smad2/3結(jié)合促進(jìn)Smad2、Smad3、Notch2、Notch3的轉(zhuǎn)錄。因此，LFAR1可通過激活轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)和Notch通路，促進(jìn)肝纖維化。

2.5核富含轉(zhuǎn)錄本1(nuclear-enriched abundant transcript 1，NEAT1) NEAT1是長約3.7 kb的lncRNA，主要富集于細(xì)胞核中，是參與構(gòu)成細(xì)胞核亞結(jié)構(gòu)的重要RNA分子[13]。Yu等[14]發(fā)現(xiàn)，NEAT1和Kruppel樣因子6(Kruppel-like factor 6，KLF6)是miR-122的靶標(biāo)。NEAT1可通過競爭性結(jié)合miR-122來調(diào)節(jié)肝纖維化中KLF6的表達(dá)。同時，NEAT1/miR-122/KLF6在HSC激活過程中起關(guān)鍵作用。Kong等[15]發(fā)現(xiàn)，胰島素樣生長結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白1(insulin-like growth factor binding proteinrelated protein 1，IGFBPrP1)可增高小鼠肝臟組織中NEAT1、自噬相關(guān)蛋白9a(autophagy associated proteins 9a，Atg9a)的表達(dá)及自噬水平，降低miR-29b的表達(dá)水平。其中Atg9a參與了IGFBPrP1誘導(dǎo)的HSC自噬和激活。因此，NEAT1/miR-29b/Atg9a調(diào)控軸參與了IGFBPrP1誘導(dǎo)的小鼠HSC的自噬和 激活。

2.6被TGF-β活化的長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA activated by TGF-β，lncRNA ATB) LncRNA ATB位于14號染色體上，是長度超過8 kb的lncRNA。在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)相關(guān)肝纖維化患者的肝臟組織、血清及HSC中l(wèi)ncRNA ATB表達(dá)均上調(diào)[16-17]。LncRNA ATB通過競爭性結(jié)合miRNA-425-5p而促進(jìn)Smad2的表達(dá)以及HSC的增殖和活化[16]。Fu等[17]發(fā)現(xiàn)，在HCV相關(guān)肝纖維化患者的肝臟組織、血清及HSC中miR-200a表達(dá)下降，β-連環(huán)蛋白(β-catenin)表達(dá)上調(diào)。β-catenin是miR-200a的靶標(biāo)，lncRNA ATB作為ceRNA可與miR-200a結(jié)合，促進(jìn)β-catenin的表 達(dá)[17]。因此，lncRNA ATB/miR-200a/β-catenin調(diào)節(jié)軸可能促進(jìn)了肝纖維化的發(fā)展。

2.7長鏈非編碼RNA H19(long non-coding RNA H19，lncRNA H19) LncRNA H19位于人類同源區(qū)域染色體11p15.5，為長約2.3 kb的lncRNA。Song等[18]發(fā)現(xiàn)，上皮細(xì)胞黏附分子(epithelial cells adhere to molecules，EpCAM)是電子盒同源盒1(electronic box homologous box 1，ZEB1)的下游靶基因，lncRNA H19和EpCAM的向上調(diào)節(jié)與ZEB1的向下調(diào)節(jié)呈正相關(guān)。LncRNA H19通過激活ZEB1/EpCAM信號通路而促進(jìn)小鼠的肝纖維化。Zhu等[19]的研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA H19作為ceRNA可與miR-148a相結(jié)合，并隨后維持泛素特異性蛋白酶4(ubiquitin-specific protease 4，USP4)的水平，USP4是miR-148a的一個已確定的靶標(biāo)。該研究結(jié)果揭示了一個新的lncRNA H19/miR-148a/USP4軸，該軸通過HSC的激活和肝細(xì)胞中TGF-β途徑來促進(jìn)肝纖維化。Wang等[20]發(fā)現(xiàn)，lncRNA H19通過上調(diào)酒精脫氫酶Ⅲ(alcohol dehydrogenase Ⅲ，ADH3)介導(dǎo)的維甲酸信號從而誘導(dǎo)HSC的激活；Huang等[21]發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)染IGFBPrP1的JS-1細(xì)胞中，細(xì)胞自噬活躍程度與lncRNA H19表達(dá)水平呈正相關(guān)。因此，lncRNA H19可通過磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinosital 3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)信號通路來促進(jìn)IGFBPrP1誘發(fā)HSC自噬。

2.8小核RNA宿主基因7(small nucleic RNA host gene 7，SNHG7) SNHG7位于9號染色體，長度為2157 nt，在人類肝纖維化組織和活化的小鼠原代HSC中表達(dá)上調(diào)。Yu等[22]發(fā)現(xiàn)，lncRNA SNHG7可競爭性結(jié)合miR-378-3p，致使細(xì)胞內(nèi)游離的紊亂片段極性蛋白2(disorder fragment polarity protein 2，DVL2)含量增加，β-catenin在細(xì)胞內(nèi)大量積累，促進(jìn)了HSC的激活，誘導(dǎo)了肝纖維化的發(fā)展。

2.9INK4位點(diǎn)的反義非編碼RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus，ANRIL) ANRIL位于7號染色體，首先發(fā)現(xiàn)于遺傳性黑色素瘤和神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤患者。Yang等[23]發(fā)現(xiàn)，在活化的HSC和肝纖維化組織中ANRIL的表達(dá)顯著降低，DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNA methyltransferase 3A，DNMT3A)的表達(dá)顯著增加。下調(diào)DNMT3A可增加活化的HSC中ANRIL的表達(dá)，而過表達(dá)ANRIL可抑制HSC的激活和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)信號通路。因此，lncRNA ANRIL缺失可以激活A(yù)MPK途徑，從而促進(jìn)肝纖維化和HSC的活化。

2.10軟骨發(fā)生刺激因子1(stimulator of chondrogenesis 1，SCRG1) SCRG1是一種轉(zhuǎn)錄長度為3118 bp的lncRNA，在人肝硬化組織中其表達(dá)上調(diào)13.62倍。Wu等[24]發(fā)現(xiàn)，SCRG1在人體組織和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-1，TGF-β1)誘導(dǎo)的活化LX-2細(xì)胞中的表達(dá)，可隨著肝纖維化的發(fā)展而增加。SCRG1與鋅指蛋白36(tristetraprolin，TTP)有結(jié)合位點(diǎn)，并可特異性結(jié)合TTP蛋白。過表達(dá)SCRG1會導(dǎo)致TTP mRNA不穩(wěn)定，蛋白質(zhì)表達(dá)減少。SCRG1靶向下調(diào)TTP可導(dǎo)致腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor alpha，TNF-α)和基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase，MMP2)的激活，促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展。

2.11X染色體失活特異轉(zhuǎn)錄物(X-inactive specific transcript，XIST) XIST位于X染色體無活性中心區(qū)域，長約16 500 nt，作為染色體Xq13.2的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，能夠影響X染色體相關(guān)基因的激活。XIST與miR-29b結(jié)合可促進(jìn)高遷移率族蛋白盒-1(highmobility group box-1，HMGB1)的表達(dá)，從而增強(qiáng)乙醇誘導(dǎo)的LX-2細(xì)胞自噬和激活[25-26]。因此，lncRNA XIST通過miR-29b/HMGB1途徑增強(qiáng)乙醇誘導(dǎo)的LX-2細(xì)胞的自噬和激活，從而促進(jìn)肝纖維化的 發(fā)展。

2.12小Cajal體特異性RNA 10(small Cajal bodyspecific RNA 10，SCARNA10) SCARNA10位于12號染色體，是一種核內(nèi)滯留的lncRNA，也是一種潛在的生物標(biāo)志物。SCARNA10過表達(dá)可加重CCl4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化，且SCARNA10在小鼠肝纖維化組織中表達(dá)顯著上調(diào)[27]。SCARNA10在體內(nèi)、體外均可通過誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡和HSC活化而促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展。Zhang等[28]發(fā)現(xiàn)，SCARNA10可與多梳抑制復(fù)合物2(polycomb repressive complex 2，PRC2)結(jié)合而增加Smad2、Smad3、TGF-β1和KLF6的表達(dá)，從而促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展。

2.13長鏈基因間非編碼RNA01093(long intergenic noncoding RNA 01093，linc01093) Linc01093位于4號染色體。目前主要通過芯片、高通量測序技術(shù)篩選腫瘤組織中差異表達(dá)的linc01093。Tang等[29]發(fā)現(xiàn)，在CCl4誘導(dǎo)的肝組織和TGF-β1刺激的肝細(xì)胞中l(wèi)inc01093表達(dá)下調(diào)。Linc01093的表達(dá)下調(diào)促進(jìn)了肝細(xì)胞的凋亡，抑制了肝細(xì)胞的存活。在TGF-β1的刺激下，下調(diào)的linc01093通過促進(jìn)沉默信息調(diào)節(jié)因子1 (silent information regulator 1，SIRT1)的降解和泛素化來促進(jìn)肝細(xì)胞凋亡。

2.14Alu介導(dǎo)的p21轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子(alu-mediated p21 transcriptional regulator，APTR) APTR位于染色體7q21，長度為2303 bp，對細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖具有抑制作用。Yu等[30]發(fā)現(xiàn)，APTR在肝纖維化組織中表達(dá)上調(diào)，其沉默可誘導(dǎo)p21的轉(zhuǎn)錄，從而抑制U87細(xì)胞的生長。APTR與p21在小鼠肝纖維化組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，可通過負(fù)調(diào)控p21加速細(xì)胞周期，對HSC具有促增殖的作用。

2.15核糖核酸HOXA轉(zhuǎn)錄本(ribonucleic acid HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP) HOTTIP位于染色體7p152，在多種人類腫瘤(包括胃癌、肝細(xì)胞癌和結(jié)直腸癌)中起關(guān)鍵作用[31-32]。Li等[33]發(fā)現(xiàn)，HOTTIP對miR-148a具有負(fù)調(diào)控作用，作為miR-148a、TGF-βR1和TGF-βR2的新靶標(biāo)，可增強(qiáng)TGF-β/Smad信號傳導(dǎo)。HOTTIP可通過下調(diào)miR-148a，增強(qiáng)TGF-βR1和TGF-βR2的表達(dá)，從而促進(jìn)肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展。Zheng等[34]發(fā)現(xiàn)，HOTTIP作為miR-150的ceRNA，可增加血清反應(yīng)因子(serum response factor，SRF)的表達(dá)，誘導(dǎo)小鼠HSC的活化。

2.16牛磺酸調(diào)節(jié)基因1(taurine up-regulated gene 1， TUg1) TUg1是大小為7.1 kb的lncRNA，首次發(fā)現(xiàn)于牛磺酸處理的小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞上調(diào)表達(dá)基因中。Han等[35]發(fā)現(xiàn)，TUg1在CCl4及膽管結(jié)扎(BDL)誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠模型的肝臟組織以及肝硬化患者中表達(dá)上調(diào)。TUg1可促進(jìn)α-SMA、Col1α1、MMP2/MMP9/MMP10和基質(zhì)金屬肽酶組織抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1，TIMP1)的表達(dá)。miR-29b是TUg1的靶標(biāo)，TUg1可負(fù)向調(diào)節(jié)miR-29b的表達(dá)。因此，lncRNA TUg1作為ceRNA可下調(diào)miR-29b的表達(dá)而促進(jìn)HSC的活化，從而促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展。

LncRNA促進(jìn)肝纖維化的作用匯總見表1。

表1 LncRNA促進(jìn)肝纖維化的作用Tab.1 The promotive effects of lncRNA on liver fibrosis

3 抑制肝纖維化lncRNA

3.1母系表達(dá)基因8(maternally expressed gene 8，MEG8) MEG8位于染色體14q32.3上的一簇印跡基因中，主要分布在LX-2細(xì)胞和AML12細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)。MGE8可促進(jìn)肺癌和胰腺癌細(xì)胞EMT的表觀遺傳學(xué)進(jìn)程，抑制血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)和滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖和遷移[36-37]。研究發(fā)現(xiàn)，MEG8在活化的HSC、損傷的肝細(xì)胞和肝纖維化組織中過表達(dá)[38]。MEG8可通過抑制Notch通路而抑制肝細(xì)胞的HSC活化和EMT過程[38]。MEG8作為Notch信號的新型調(diào)節(jié)劑，為肝纖維化的分子機(jī)制研究提供了新的理論依據(jù)。

3.2預(yù)測基因5091(predicted gene 5091，Gm5091) Gm5091是一種長度為1179 bp的基因間lncRNA，位于Chr17。乙醇處理可使Gm5091在HSC中的表達(dá)下調(diào)，并對乙醇誘導(dǎo)的HSC激活和炎癥產(chǎn)生負(fù)調(diào)控作用。Zhou等[39]發(fā)現(xiàn)，Gm5091序列包含miR-27b、miR-23b、miR-24的結(jié)合位點(diǎn)，且通過RNA下拉測定法證實(shí)miR-27b/23b/24均可與Gm5091結(jié)合。全長Gm5091可降低miR-27b/23b/24的水平，但截短的Gm5091不能刪除結(jié)合位點(diǎn)。Gm5091/miR-27b/23b/24可以減輕酒精性肝纖維化(alcoholic hepatic fibrosis，AHF)。

3.3長鏈基因間非編碼RNA-p21(long intergenic noncoding RNA-p21，lincRNA-p21) LincRNA-p21位于編碼關(guān)鍵細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子Cdkn1a(也稱為p21)的基因上游約15 kb，包含兩個外顯子，長約3.1 kb。LincRNA-p21可作為TGF-β的效應(yīng)器與miR-30相互作用，從而促進(jìn)小鼠的肝纖維化[40]；還可作為ceRNA與miR-181b競爭性結(jié)合，減弱miR-181b對PTEN表達(dá)的抑制作用，最終抑制HSC的活化[41]。Yu等[42]發(fā)現(xiàn)，lincRNA-p21作為ceRNA可與miR-17-5p相結(jié)合，上調(diào)糖原合成激酶3β(glycogen synthesis kinase 3β，GSK-3β)的表達(dá)，抑制Wnt/β-catenin信號通路。因此，通過lincRNA-p21/miR-17-5p/β-catenin信號通路軸，lincRNA-p21能夠抑制HSC的活化。

3.4長鏈非編碼RNA-Hser(long non-coding RNAHser，lnc-Hser) Lnc-Hser主要位于初級肝細(xì)胞和AML12細(xì)胞的細(xì)胞核中。Zhang等[43]發(fā)現(xiàn)，敲除lnc-Hser可通過誘導(dǎo)EMT和肝細(xì)胞凋亡在體內(nèi)和體外加重肝纖維化。同時，lnc-Hser可通過補(bǔ)體C5a受體1(complement C5a receptor 1，C5AR1)-河馬(Hippo)-YES相關(guān)蛋白(YES-associated protein，YAP)途徑抑制HSC的凋亡，并通過Notch途徑抑制肝細(xì)胞內(nèi)EMT的累積。總之，lnc-Hser是受損肝細(xì)胞的新型生物標(biāo)志物，也是抗纖維化治療的潛在靶標(biāo)。

3.5生長停滯特異性轉(zhuǎn)錄本5(growth arrest-specific transcript 5，GAS5) GAS5最初是因在生長抑制的鼠纖維原細(xì)胞中呈高表達(dá)而被發(fā)現(xiàn)的，位于人染色體1q251的小開放閱讀框，全長630個核苷酸。 Yu等[44]和Dong等[45]發(fā)現(xiàn)，CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型中，miR-23a可通過PTEN/PI3K/Akt/mTOR/Snail信號通路促進(jìn)纖維化的發(fā)展。GAS5可與miR-23a競爭性結(jié)合，降低miR-23a的表達(dá)，從而抑制肝纖維化。GAS5/miR-23a/PTEN/PI3K/Akt/mTOR/Snail通路在肝纖維化中的作用為肝纖維化的治療提供了潛在的分子靶點(diǎn)。

3.6母系表達(dá)基因3(maternal expressed gene 3，MEG3) MEG3位于人類染色體14q32.3的DLK1-MEG3位點(diǎn)，長度為35 kb，具有抑癌作用。Yu等[46]的研究發(fā)現(xiàn)，MEG3是一種腫瘤抑制基因，在EMT過程中發(fā)揮重要作用。MEG3在體內(nèi)和體外肝纖維化過程中表達(dá)均降低，其表達(dá)恢復(fù)后，肝纖維化得到抑制，α-SMA和Col1α1表達(dá)降低。值得注意的是，MEG3過表達(dá)抑制了通過EMT激活的HSC，這與上皮標(biāo)志物的增加和間質(zhì)標(biāo)志物的減少有關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，刺猬信號通路介導(dǎo)的EMT過程在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，平滑蛋白(smoothened，SMO)是Hh途徑的一員[46]。此外，MEG3被確認(rèn)為是miR-212的靶標(biāo)。miR-212部分參與了MEG3對EMT過程的影響。總之，MEG3通過SMO蛋白和miR-212抑制了刺猬信號通路介導(dǎo)的肝纖維化EMT過程。

LncRNA抑制肝纖維化的作用匯總見表2。

4 總結(jié)與展望

LncRNA是近年肝病領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)，在肝癌(liver cancer，HCC)、肝纖維化、非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)中的研究取得了突破性進(jìn)展。但多數(shù)lncRNA在肝纖維化中的作用機(jī)制尚未完全闡明。缺失上調(diào)的lncRNA或過度表達(dá)下調(diào)的lncRNA是進(jìn)行l(wèi)ncRNA基礎(chǔ)治療的主要機(jī)制。未來研究應(yīng)致力于尋找準(zhǔn)確地將lncRNA導(dǎo)入體內(nèi)的方法并深入研究其機(jī)制；準(zhǔn)確鑒定lncRNA的靶標(biāo)，使導(dǎo)入體內(nèi)的lncRNA作用于特定的與肝纖維化發(fā)展相關(guān)的靶標(biāo)。同時，希望臨床研究人員進(jìn)一步提高對lncRNA在肝纖維化調(diào)控中作用的認(rèn)識，從而有效地篩選lncRNA用于肝纖維化的診斷和治療，為臨床試驗(yàn)提供理論依據(jù)。

表2 LncRNA抑制肝纖維化的作用Tab.2 The inhibitory effects of lncRNA on liver fibrosis