血型血清學檢查方法在交叉配血中的應用研究

文/梁超堅，陳孝鏵，藍冬妹，覃敢

輸血是臨床常見的一種救治手段，可以快速補充患者的血容量，保證機體獲得足夠的氧氣，有效挽救患者生命。但在輸血前需采取有效的交叉配血方法來確立供血者血液是否和受血者匹配，以保證輸血安全[1]。目前臨床對交叉配血方式選擇較多，如鹽水法、抗球蛋白法及聚凝胺法、微柱凝膠法等。經典抗球蛋白法雖然可靠、準確，但是操作比較繁瑣，用時比較長，雖然是金標準，但是不適用于常規的臨床中[2]。近些年來，其應用常見方式為以下兩類：聚凝胺法、微住凝膠法。基于此，本文把2018年1月-2019年12月期間在本院住院輸血患者2796例作為研究對象，進行鹽水法、微柱凝膠法、聚凝胺法三種血型血清學檢查，分析其應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月-2019年12月期間在本院住院輸血患者2796例，其中女性1575例，男性1221例，年齡1天-55歲。供血者：選取南寧市中心血站獻血者預留血樣標本。

1.2 方法

選取輸血患者2796例，分別選取取鹽水法、微住凝膠法進行配血檢查，若檢驗結果中，提示為陽性結果或標本可疑，選取聚凝胺法，再次進行復查審核結果。

1.2.1 標本預處理

收集患者2ml抗凝靜脈血，離心受血者、獻血者標本，分離血漿后備用。

1.2.2 鹽水法

取小試管3支，分別標明主側、次側、自身，在主側管中加100μl患者血漿和50μl3%-5%的獻血者紅細胞,次側管中加100μl獻血者血漿和50ul3%-5%的患者紅細胞，自身管中加100μl患者血漿和50μl3%-5%的患者紅細胞。搖勻，1000g/min速度下離心15s，觀察結果。對試管壁進行觀察，判斷是否存在溶血，并斜持試管，輕輕轉動及彈動試管，對管底反應物是否存在凝集情況進行觀察。自身管結果作為對照。

1.2.3 微柱凝膠法

通過選擇凝膠卡，對主、次兩孔標注后，主孔添加50ul0.8%-1%的獻血者紅細胞和25ul患者血漿，次側孔反之，然后在37℃的專用孵育器中孵育15分鐘，最后再放進專用卡式的離心機中離心10分鐘，然后判定結果。離心后紅細胞沉積在微柱尖底的視為陰性結果，滯留在凝膠上方或者是中間的視為陽性結果。

1.2.4 聚凝胺法

在鹽水法基礎上，各管加入0.6ml低離子介質溶液混勻，室溫孵育一分鐘，之后各滴入2滴聚凝胺溶液混勻，15s后離心，傾去上清液，留取管底0.1ml凝集液，將試管輕輕搖動，觀察是否存在紅細胞凝集情況，若沒有凝集，必須重做。再各滴入2滴重懸液，輕輕搖勻，觀察結果。如果是非特異性凝集，便會在1分鐘之內散開，如果是特異性凝集，便不會散開，還可以進一步在顯微鏡下面觀察是否出現凝集現象。若主側和次側都沒有凝集，便為配合血。

1.3 觀察指標

對比三種方法的交叉配血試驗結果。

1.4 統計學處理

全文數據均采用SPSS19.0統計軟件進行計算分析，x2用于檢驗計數資料，其中P＜0.05表示數據具有統計學意義。

2 結果

在2796例交叉配血中，鹽水法真陽性率、假陽性率低于聚凝胺法、微住凝膠法，差異有統計學意義P＜0.05。見表1和表2。

表1 鹽水法和聚凝胺法交叉配血試驗結果相比[n＝2796，n(%)]

表2 鹽水法和微柱凝膠法交叉配血試驗結果相比[n＝2796，n(%)]

3 討論

輸血安全是當前臨床輸血面臨的重大挑戰，輸血科既要保證交叉配血的準確性，又要快速地向臨床提供安全血液，挽救生命。因此將各種交叉配血方法靈活的應用起來，根據實際情況選用最適宜的配血方法是臨床輸血檢驗的重中之重。交叉配血試驗中，鹽水配血法方便快捷、操作簡單，能夠快速檢查出IgM類血型抗體，但對人體血液中存在的IgG免疫性抗體敏感性較低，造成鹽水法交叉配血時漏檢率較高，安全性不高[3]。上述方式應用中，可彌補聚集胺法及抗人球蛋白法所引起假陰性率，日常開展試驗中，作為一類不可淘汰試驗方式[4]。聚凝胺法原理應用中，通過實現高價陽離子季胺鹽多聚物，當溶解過后，正電荷產生較多，中和紅細胞表面負電荷，紅細胞之間距離減少，紅細胞可發生可逆性非特異性聚集，若顯示為抗體致敏紅細胞，此時可被聚凝胺凝集。對含有枸櫞酸鈉假凝集清除液作用下，枸櫞酸根負電荷及聚凝胺正電荷中和[5]。聚凝胺法操作快速簡便，進行一次交叉配血只需要10分鐘便可以完成，因此是急診配血的首選方法。并且聚凝胺法的試劑成本比較低，也是一些小型醫院的常規方法。聚凝胺法還具有檢測出假陽性概率低等優點，但其具有易受肝素、藥物影響，無法檢測較低濃度抗體，結果不直觀等缺點[6]。微柱凝膠法試驗基于離心技術、生物化學凝膠過濾技術，技術設計過程中遵循免疫化學抗原特性，此時紅細胞血型抗原及抗體表現為特異性結合，結果可呈現為凝集，離心的時候凝集塊不能夠通過凝膠的間隙便會留在凝膠的上層，依照凝集的強弱也可以彌散在凝膠中，沒有結合的紅細胞，便會通過凝膠的間隙沉在管尖的底部，呈陰性反應[7]。微柱凝膠法因其標本用量少，操作方便靈活，不需要洗滌，重復性好，靈敏度高，準確度高，結果觀察直觀，保存時間長易于標準化，適合自動化批量檢測等優點，目前成為臨床交叉配血試驗主要操作方法[8]。現階段臨床對微住凝膠法應用干預上往往存在一定不足之處，如試驗開展中離心時間長，并不適用于急診手術配血。對其原因分析得出，試驗開展中因樣本檢測中對實驗室要求高，若患者樣本中抗凝不全，則呈現纖維蛋白絲消耗完全情況，后續難以判斷配血類型，若結果提示為假陽性，則表明出錯率顯著偏高[9-10]。本文通過對我院2796例輸血患者臨床交叉配血進行研究表明，聚凝胺法和微柱凝膠法交叉配血不合檢出真陽性率均高于鹽水法，差異有統計學意義P＜0.05，同時，分析微住凝膠法及聚凝胺法效果，對其交叉配血結果分析得出，兩類檢測陽性率無差異性。研究結果與金勇,李繼東,余小平[11]研究報道結果一致，但周雪瑩[12]、孔存權[13]、毛娟[14]等研究報道微柱凝膠法檢出率高于聚凝胺法，微柱凝膠法在臨床輸血檢驗中具有更高的準確率，比聚凝胺法更具有優勢。

綜上所述，3種交叉配血法各有優缺點，鹽水法適用于日常基礎試驗，聚凝胺法簡單、快速，適用于急診輸血；微柱凝膠法靈敏度高、安全可靠，可作為平常首選配血方法。聯合鹽水法、聚凝胺發及微住凝膠法能提升臨床陽性檢測率，確保安全輸血。