Axin2在胰腺癌細胞中的表達及臨床意義分析

文/黃深巧，凌夢，舒玲，張少華

對于胰腺癌而言，其是十分普遍的消化系統性腫瘤，對患者的生命帶來了極大的威脅[1]。因為在早期缺少相應的診斷方式，所以，許多胰腺癌患者在明確診斷后，已經至晚期，喪失了進行手術的機會，所以，臨床中對胰腺癌發生、進展有關的分子機制進行分析與研究，并找出在早期能夠評判診斷、預后的指標均是十分關鍵的。本研究分析并研究了Axin2在胰腺癌細胞中的表達。

1 對象及方法

1.1 對象

對具有較低表達Axin2中的人胰腺癌（PANC-1）細胞進行分組，即為空白對照組、陰性對照組、過表達組，對空白對照組沒有進行轉染，對陰性對照組、過表達組就空質粒、過表達Axin2質粒進行轉染（具體圖1）。

1.2 方式

1.2.1 細胞培養與轉染

借助具有10%的胎牛血清的DMEM對BxPC-3、PANC-1、Mia PaCa-2進行培養；借助具有各類細胞因子的KSFM型培養基對H6C7進行培養。間隔2d進行一次換液，在得到70%-80%的融合后，借助胰蛋白酶消化傳代進行之后的各項實驗。

1.2.2 QPCR

對細胞的總核糖核酸（RNA）進行提取，借助紫外分光光度計對吸光值進行檢測，以分析并研究RNA的總純度。借助1.5%的瓊脂糖電泳對RNA本身的完整性進行檢測。反應條件設定好在95℃，共10min，接著，95℃，共10s，60℃，共50s，進行40個循環。處于酶鏈聚合反應（PCR）儀中進行相應的反應，在完成后，借助相配的軟件對其進行研究與分析，得到產物的電子計算機斷層掃描（CT）值。借助2-△△ct值以對Axin2進行表示。

1.3 觀察指標

比較各個細胞株中Axin2表達、過表達質粒轉染后QPCR檢測到Axin2表達、Axin2過表達對于PANC-1細胞增殖、細胞遷移、細胞侵襲影響。

1.4 數據分析處理

將本文數據一律輸入SPSS22.0這個軟件中統計處理，各類計量資料一律用（±s）來表示，組間差異性選擇t檢驗，當P＜0.05時說明組間對比有意義。

2 結果

2.1 各個細胞株中Axin2表達

經分析表一中的數據可知：發現H6C7中的Axin2較之于BxPC-3、Mia PaCa-2、PANC-1高，P＜0.05。見表1。

表1 各個細胞株中Axin2表達（±s）

表1 各個細胞株中Axin2表達（±s）

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2.2 過表達質粒轉染后QPCR檢測到Axin2表達

表2 過表達質粒轉染后QPCR檢測到Axin2表達（±s）

表2 過表達質粒轉染后QPCR檢測到Axin2表達（±s）

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表3 Axin2過表達對于PANC-1細胞增殖影響（±s）

表3 Axin2過表達對于PANC-1細胞增殖影響（±s）

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經分析表二中的數據可知：發現過表達組的Axin2較之于空白對照組、陰性對照組高，P＜0.05。見表2。

2.3 Axin2過表達對于PANC-1細胞增殖影響

經分析表三中的數據可知：發現過表達組的總增殖率較之于空白對照組、陰性對照組低，P＜0.05。見表3。

2.4 Axin2過表達對于PANC-1細胞遷移、細胞侵襲影響

發現過表達組的細胞侵襲能力、遷移能力較之于空白對照組、陰性對照組低，P＜0.05。

3 討論

近幾年，胰腺癌總的發生率逐步升高。在本次研究中，借助QPCR進行檢測，Axin2處于不同侵襲能力的細胞中，其表達較之于正常胰腺細胞低，這就證明了Axin2處于胰腺癌細胞中是一種抑癌基因。Axin2表達是伴隨了Wnt信號轉導通路所處的激活狀態而發生改變的，其在胰腺癌細胞中具有較低的表達，使得β-catenin表達的穩定性有所降低，最終，腫瘤細胞發生了增殖、分化。

綜上所述，Axin2在胰腺癌細胞株中較之于正常胰腺細胞低，在具有更高侵襲能力的癌細胞株中具有更低的表達，其本身具有抑癌基因的作用。