日糧中添加乙酸對大骨雞消化器官、小腸黏膜形態和血清激素的影響

蔣海生，王佳麗*，馮金寶，李 寧

（1.錦州醫科大學畜牧獸醫學院，遼寧錦州 121001；2.阜新蒙古族自治縣福興地鎮畜牧獸醫辦公室，遼寧阜新 123106；3.遼寧省農業發展服務中心，遼寧沈陽 110032）

短鏈脂肪酸（short-chain fatty acids，SCFAs）是在碳鏈中具有6個以下碳原子的脂肪酸，并且主要包含乙酸、丙酸和丁酸。Canani 等[1]研究表明，SCFAs 在單胃動物中主要是通過有益細菌（例如乳酸菌和雙歧桿菌）的發酵在結腸中消化不易消化的糖（例如膳食纖維）、抗性淀粉和寡糖而產生的。哺乳動物生理學中最重要的SCFAs 是線性脂肪酸，其中乙酸、丙酸和丁酸的含量最高，共占SCFAs的85%以上。SCFAs 易于被動物消化，是必需脂肪酸的有效來源。SCFAs 是一種具有多種生理功能且安全無毒副作用的飼料添加劑[2]。近年來，SCFAs 作為脂肪添加劑受到畜牧養殖業的廣泛關注。研究顯示，日糧中添加SCFAs具有提高動物生產性能，增強對營養物質的消化吸收能力，改善并維持動物腸道健康和提高免疫力的功能[3-5]。莊河大骨雞（又名大骨雞）作為遼寧著名地方雞種，具有耐粗飼、耐寒、抗病力強、肉質鮮嫩，產蛋多而大等優點[6]，深受廣大消費者喜愛，有著極大的品種優勢和發展空間。因此，本試驗研究日糧中添加乙酸對大骨雞消化器官、小腸黏膜形態和血清激素的影響，為乙酸在家禽養殖中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與分組

試驗選取健康無病、體況良好、發育正常，體重相近的1日齡莊河大骨雞48只，隨機分為2組，每組12個重復，每重復2 只雞。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧，試驗組日糧在基礎日糧中添加0.50%的乙酸，試驗期為15 d。

1.2 試驗日糧及飼養管理

試驗日糧參照美國NRC（1994）營養需要并結合本品種實際配制粉狀配合飼料，日糧組成及營養水平見表1。試驗用雞采用籠養，處于相同的飼養環境，自由采食和飲水。

1.3 樣品采集

15 日齡試驗結束后，大骨雞禁食12 h，兩組試雞分別抽取4只（公、母各半）進行屠宰，采集腸道、胰腺、肝臟、肌胃、腺胃組織，稱重后統計消化器官指數。剪取十二指腸前端1 cm處腸段用生理鹽水沖洗干凈，置于10%福爾馬林液中固定保存，用于制作石蠟切片，以備形態學分析。收集血樣，靜置15 min，以3 000 r/min 的速度離心10 min，將上清液分裝于1.5 mL Ep 管中，置于-20 ℃的冰箱中低溫保存，用于測定血清中生長激素（GH）、促生長激素釋放激素（GHRH）、胰島素樣生長因子-1（IGF-1）、胰島素（INS）的含量。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 消化器官指數

表1 日糧組成及營養水平Tab.1 Diet composition and nutritional level

1.4.2 十二指腸黏膜形態

制片：將固定幾天后的十二指腸前端1 cm 處組織，制作石蠟切片后在顯微鏡下觀察。

測量：在H.E.染色之后，以100倍于美國moticam3000顯微照相成像系統拍攝膠片，并使用motic images advanced3.2 病理圖像分析系統對腸絨毛高度和寬度進行測量，并計算出絨毛面積。小腸絨毛高度及寬度測定示例見圖1。形態學指標測定參考Iji 等[7]的方法，十二指腸前端絨毛高度為a（絨毛頂端到絨毛與腸黏膜肌層的垂直距離）；絨毛寬度為（b+c）/2；絨毛表面積通過絨毛高度和寬度計算，即（b+c）/2×a。對于所有形態學指標，每張切片至少測定5根完整、長且直的絨毛，每個指標取5個值的平均值作為該張切片該指標的最終測定值。

圖1 小腸絨毛高度及寬度測定示例Fig.1 Example of measuring the height and width of small intestine villi

1.4.3 血清激素

采用ELISA試劑盒測定（南京建成生物工程研究所），具體測定方法按照試劑盒說明書。

1.5 數據統計與分析

數據采用SPSS 17.0統計分析軟件對試驗數據進行獨立t檢驗，結果以“平均值±標準誤”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 日糧添加乙酸對大骨雞消化器官指數的影響（見表2）

表2 日糧添加乙酸對大骨雞消化器官的影響Tab.2 Effect of adding acetic acid in diet on digestive organs of Dagu chickens

由表2可知，與對照組相比，日糧添加0.50%的乙酸對大骨雞肝臟指數、胰腺指數、肌胃指數、腺胃指數無顯著影響（P＞0.05）；小腸指數顯著提高（P＜0.05）。

2.2 日糧添加乙酸對大骨雞小腸黏膜形態的影響（見表3）

表3 日糧添加乙酸對大骨雞小腸黏膜形態的影響Tab.3 Effects of dietary supplementation of acetic acid on the morphology of small intestinal mucosa of Dagu chickens 單位：μm

由表3可知，與對照組相比，日糧添加0.50%的乙酸顯著提高大骨雞十二指腸絨毛高度（P＜0.05），絨毛寬度也有增加趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 日糧添加乙酸對大骨雞血清激素的影響（見表4）

表4 日糧添加乙酸對大骨雞血清激素的影響Tab.4 Effect of adding acetic acid in diets on serum hormones of Dagu chickens

由表4可知，與對照組相比，日糧添加0.50%的乙酸顯著提高大骨雞IGF-1的含量（P＜0.05），具有提高INS、GH、GHRH的含量的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 日糧添加乙酸對大骨雞消化器官的影響

消化器官則是動物執行重要生理功能（如新陳代謝）的地方，其生長發育的狀態與動物的生長速度密切相關[8]。胃腸道是家禽消化和吸收營養的主要場所。在飼糧中添加的SCFAs均在胃和小腸中被吸收，從而發揮其營養和生理作用。劉永祥等[9]研究發現，在日糧中添加乙酸和丙酸可提高小腸腸道食糜中淀粉酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的活性，并改善肉雞的消化功能。李丹丹等[10]研究表明，在日常飲食中添加丁酸鈉和抗生素可以顯著提高豬的平均日采食量、平均日增重、免疫器官指數和免疫球蛋白含量，并且0.1%丁酸鈉和0.1%的抗生素效果最好。本課題組前期研究表明，散養大骨雞的高消化能力可能是腸道中乙酸刺激的結果。本研究中，日糧添加0.50%的乙酸對大骨雞的小腸指數有顯著提高，表明乙酸能促進小腸發育并提高大骨雞的消化能力，這基本與以前的研究結論一致。

3.2 日糧添加乙酸對大骨雞小腸黏膜形態的影響

家禽的腸道健康至關重要，因為腸道不僅是營養物質消化吸收和代謝的重要器官，也是抵御外來病原入侵的重要屏障。小腸由十二指腸，空腸和回腸組成，腸壁分為3 層：黏膜層，肌肉層和漿膜層。黏膜層由絨毛、微絨毛以及褶皺等特殊結構組成，可以顯著增加小腸的表面積以吸收營養。小腸絨毛是黏膜結構的主要組成部分，是獨特的指示劑，其高度和寬度反映了小腸消化和吸收營養的能力[11-12]。SCFAs 可以降低胃腸道的pH 值，抑制或消滅一些有害菌群（如大腸桿菌），從而促進腸道有益細菌生長，改善動物腸道微生物結構[13]。Sikandar 等[14]報道，肉雞飼糧中添加500 或1 000 mg/kg 的丁酸鈉均可顯著改善生長性能、增加十二指腸和空腸絨毛的高度和表面積以及調節淋巴器官和腸黏膜的形態。張浩等[15]研究表明，肉雞飼糧中添加丁酸甘油酯可以提高其平均日增重、降低料重比、增加十二指腸和空腸絨毛高度、降低盲腸大腸桿菌數量和提高乳酸桿菌數量，并且添加量為500 mg/kg時效果最佳。本研究結果顯示，日糧添加0.50%的乙酸顯著提高大骨雞十二指腸絨毛高度，絨毛寬度也有增加趨勢，但具體作用機制還需進一步的研究。

3.3 日糧添加乙酸對大骨雞血清激素的影響

家禽的生長發育受INS、IGF-1、GH、GHRH 等多種激素的共同調節，GH-IGF-1 生長軸是調控動物生長的中心環節，GHRH與垂體生長激素細胞表面的生長激素釋放激素受體（GHRHR）結合后，活化非選擇性離子通道，使細胞膜去極化，促進鈣離子內流和GH 分泌。禽類GH 的作用機制較為復雜，由垂體分泌的GH并不能直接促進生長，而是在GH 與受體結合后，誘導肝細胞產生的IGF-1 介導下進行，促進細胞的生長[16]。本試驗結果表明，日糧添加0.50%的乙酸顯著提高大骨雞IGF-1 的含量，INS、GH、GHRH也有增加趨勢，但乙酸影響血清激素的機制還有待進一步的研究。

4 結論

日糧添加0.50%的乙酸可以顯著提高大骨雞的小腸指數、十二指腸絨毛高度和IGF-1 的含量，改善小腸黏膜形態結構，促進小腸絨毛的生長和發育。