難治性哮喘患者血清相關蛋白因子表達水平及其與預后的相關性分析

何孝敏

（鄭州市第二人民醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

難治性哮喘是輕中度哮喘的進展結果，屬于慢性氣道炎癥疾病，患者需長期、規(guī)律用藥以控制病情［1］。哮喘的病理生理基礎主要在于炎癥機制、遺傳因素、激素反應性等，哮喘患者的發(fā)病誘因主要在于特異性體質、神經調節(jié)紊亂，次要因素為環(huán)境因素［2］。臨床研究顯示，難治性哮喘患者的就醫(yī)率、住院率遠高于輕中度哮喘患者，對患者生活造成較大的影響［3］。因此，探究難治性哮喘預后評估指標，為患者臨床診療提供依據(jù)具有較大意義。C-反應蛋白（CRP）屬于重要的炎癥因子［4］；烯醇酶-1（ENO1）是一種糖酵解酶，與多種疾病的發(fā)生密切相關［5］；髓過氧化物酶（MPO）屬于白細胞酶，其表達可損傷機體內皮細胞功能［6］；絲氨酸蛋白酶抑制蛋白 E1（SERPINE1）屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑，對生物體內炎性反應有一定的影響［7］。本文旨在探究難治性哮喘患者血清 CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 表達水平及其與預后的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 研究對象 選取2018 年1 月至2019 年12月于鄭州市第二人民醫(yī)院收治的84 例急性發(fā)作期難治性哮喘患者為研究組，選擇同期來院體檢的84 例健康成年人為對照組。兩組性別、年齡、體重指數(shù)（BMI）等一般臨床資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

1.1.2 納入標準 ①符合難治性哮喘診斷標準［8］；②年齡>18 歲；③處于急性發(fā)作期；④就診前未使用藥物控制；⑤患者及家屬充分知情同意，簽署知情同意書。本研究嚴格遵循赫爾辛基宣言。

1.1.3 排除標準 ①慢性咳嗽喘息者；②妊娠期、哺乳期者；③合并原發(fā)性心腦血管、肝腎疾病者；④存在溝通障礙、理解障礙者；⑤合并造血功能異常；⑥合并血液系統(tǒng)疾病；⑦存在精神疾病。

表1 兩組患者臨床資料比較（n=84）

1.2 研究方法

1.2.1 血液標本采集 無菌采集全部患者清晨空腹靜脈血4～5 mL，抗凝后分離血清，血清冷凍（-80℃）保存。

1.2.2 血清相關蛋白因子測定 使用日本日立公司的TBA-40FR 全自動生化分析儀對患者血清相關蛋白因子（CRP、ENO1、MPO、SERPINE1）水平進行測定，均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法。

1.2.3 肺功能檢測 使用肺功能儀檢測患者的肺功能［深吸氣量（IC）、1 s 用力呼吸容積占預計值（FEV1）］，重復測量3 次取平均值。檢測方法為患者取端坐位，口含口器，左手捏住鼻子，進行平靜呼吸后行最大程度的吸氣，吸氣后屏氣1 s，再用最大力行快速呼氣，之后緩慢回到平靜呼吸狀態(tài)。

1.3 觀察指標

比較研究組、對照組患者肺功能（IC、FEV1）、血清相關蛋白因子（CRP、ENO1、MPO、SERPINE1）水平。根據(jù)研究組患者3 個月內是否再入院進行分組，分為再入院組和未入院組兩個治療亞組。比較兩組患者治療前、治療3 個月后肺功能（IC、FEV1）、血清相關蛋白因子（CRP、ENO1、MPO、SERPINE1）水平差異及其與預后的相關性。

1.4 統(tǒng)計學方法

本研究采用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0 對數(shù)據(jù)進行分析處理。計數(shù)資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；相關性分析采用Pearson 線性相關分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組肺功能比較

研究組患者治療前IC、FEV1水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；治療3 個月后，研究組患者IC、FEV1水平均較治療前升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2 兩組血清相關蛋白因子比較

研究組患者治療前CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；治療3 個月后，研究組患者CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 水平均較治療前下降，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

2.3 不同預后患者肺功能比較

治療前，再入院組患者IC、FEV1 均低于未入院組；治療后兩組患者IC、FEV1均較治療前上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），且再入院組低于未入院組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表4。

表2 治療前后兩組肺功能比較（n=84,±s）

表2 治療前后兩組肺功能比較（n=84,±s）

表3 治療前后兩組血清相關蛋白因子比較（n=84,±s）

表3 治療前后兩組血清相關蛋白因子比較（n=84,±s）

表4 治療前后不同預后患者肺功能比較（±s）

表4 治療前后不同預后患者肺功能比較（±s）

2.4 不同預后患者血清相關蛋白因子比較

治療前，再入院組患者CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 均高于未入院組；治療后兩組患者CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 均較治療前降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），且再入院組高于未入院組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表5。

2.5 相關性分析

經Pearson 線性相關分析，難治性哮喘患者預后與CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 水平呈負相關，與IC、FEV1水平呈正相關，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表6。

表5 治療前后不同預后患者血清相關蛋白因子比較（±s）

表5 治療前后不同預后患者血清相關蛋白因子比較（±s）

表6 患者預后與肺功能、血清相關蛋白因子的相關性分析

3 討論

哮喘屬于常見呼吸系統(tǒng)炎癥性疾病，主要由肥大細胞、嗜酸性粒細胞等炎性細胞共同作用導致［9］。部分經常規(guī)激素治療后仍無法控制癥狀的哮喘患者被稱為難治性哮喘，難治性哮喘是造成病情遷延，甚至導致患者死亡的常見因素。難治性哮喘急性發(fā)作時，大量炎性反應因子、細胞因子被釋放，機體NO 合酶激活，促進炎性反應因子釋放［10］。隨著蛋白組學研究的進展，科研人員鑒定出與哮喘相關的大量蛋白質，有利于發(fā)現(xiàn)哮喘的生物標志物。本研究中選擇的四類血漿蛋白是較具轉化效能的蛋白質。

隨著哮喘病情的不斷進展，患者氣道結構被破壞，肺部組織彈性功能降低，彈性回縮力受損，由早期氣流受限進展至肺過度膨脹及氣體陷閉，表現(xiàn)為呼吸困難。IC 屬于潮氣量（TV）、補吸氣量（IRV）之和，可用于評價肺過度充氣及氣體陷閉程度［11］。臨床常使用肺功能指標作為評價機體氣道炎性反應程度及抗炎效果，其中FEV1也用于評價哮喘發(fā)作的嚴重程度，也作為分級標準之一。本研究結果顯示，研究組患者肺功能指標低于對照組，再入院組患者治療前后肺功能指標均低于未入院組，說明肺功能指標與難治性哮喘存在一定的聯(lián)系，可用于評估疾病程度及進展。雷新鋒等［12］將肺功能指標作為評估哮喘療效的標準，認為肺功能指標檢測用于哮喘疾病的診治有較大的價值。

肺功能屬于瞬時指標，受其他因素影響，如患者精神狀態(tài)、環(huán)境、活動狀態(tài)等。血清相關蛋白因子較易獲得，且評估較為全面。從血清相關蛋白因 子水平來看，CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 屬于哮喘發(fā)作的免疫因素之一。本研究結果顯示，治療前后研究組患者血清相關蛋白因子水平高于對照組，再入院組患者血清相關蛋白因子水平高于未入院組。其原因可能與難治性哮喘發(fā)作時，患者免疫細胞聚集、浸潤，釋放免疫因子，造成血管內皮損傷，使患者血清相關蛋白水平升高有關。CRP 通過引發(fā)對侵入細胞的吞噬作用而表現(xiàn)出炎癥反應，因此作為哮喘炎癥的檢測指標，疾病發(fā)作時CRP 水平表現(xiàn)出明顯升高［13］。ENO1 屬于蛋白酶，在免疫、細胞凋亡、肌再生及肌肉再生等生物學過程中進行調控，難治性哮喘發(fā)作時免疫因子被大量釋放，故ENO1水平隨之升高。MPO 通過調控NO 對機體血管壁的擴張，刺激內皮細胞炎性反應，被認為是機體中性粒細胞活動的標志物之一，亦是炎癥反應的標志物［14］。有研究認為，哮喘及慢性阻塞性肺疾病均會導致機體MPO 水平升高，可能與患者內皮細胞受損有關［15］。SERPINE1 作為纖溶酶原激活物抑制劑-1，SERPINE1 的高表達可能通過促進過敏性反應、氣道重塑及高反應而使哮喘進展［16］。Pearson 線性相關性分析表明，難治性哮喘患者預后與CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 水平呈負相關，與IC、FEV1水平呈正相關，說明肺功能指標及血清相關蛋白因子對難治性哮喘預后評估有一定的指導意義。此前張燦花等［17］學者研究證實，CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 可用于評估哮喘患者預后，與本研究結果一致。

綜上所述，肺功能指標IC、FEV1及血清相關蛋白因子CRP、ENO1、MPO、SERPINE1 的表達水平對于評估難治性哮喘患者預后有一定的相關性，具有指導意義。