艾司洛爾對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用及其可能機(jī)制

[摘要] 目的 探討艾司洛爾對(duì)膿毒癥大鼠的心肌保護(hù)作用及對(duì)Toll樣受體4（TLR4）/髓樣分化蛋白88（Myd88）/核因子-κB（NF-κB）蛋白通路的調(diào)控。方法 選取雄性SD大鼠60只，采用隨機(jī)數(shù)字法隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組）、膿毒癥組（Model組）、艾司洛爾組（ES組），每組20只。Sham組實(shí)施盲腸探查術(shù)，Model組、ES組采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)（CLP法）建立膿毒癥模型;ES組持續(xù)微量泵入艾司洛爾稀釋液1 mL/h（15 mg·kg-1·h-1），共6 h，Sham組和Model組泵入等量生理鹽水。各組均于術(shù)后24 h檢測(cè)血清中肌鈣蛋白I（TnI）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）的表達(dá)，取左心室游離壁行蘇木精-伊紅染色觀察心肌病理學(xué)變化，采用Western blot法檢測(cè)心肌組織TLR4、Myd88及NF-κB的表達(dá)。結(jié)果 與Sham組相比，Model組心肌病理?yè)p傷明顯加重，心肌損傷指標(biāo)TnI水平和炎癥遞質(zhì)TNF-α及IL-1水平明顯升高;與Model組相比，ES組心肌損傷明顯減輕，炎癥遞質(zhì)水平明顯降低，差異均有顯著性（F=18.84～602.11，P<0.05）。Western blot檢測(cè)顯示，Model組心肌組織中TLR4、Myd88及NF-κB蛋白表達(dá)水平較Sham組明顯升高，而ES組心肌組織中三者表達(dá)較Model組明顯降低，差異均有顯著性（F=17.15～95.92，P<0.05）。結(jié)論 艾司洛爾能夠減輕炎癥反應(yīng)和心肌損傷，其作用機(jī)制可能與抑制TLR4/Myd88/NF-κB信號(hào)通路的激活有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 膿毒癥;腎上腺素能β受體拮抗劑;Toll樣受體4;髓樣分化因子88;NF-κB;大鼠

[中圖分類號(hào)] R631;R971.93 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [文章編號(hào)] 2096-5532（2021）01-0120-05

[ABSTRACT]ObjectiveTo investigate the myocardial protective effect of esmolol in septic rats and its regulation of the Toll-like receptor 4 （TLR4）/myeloid differentiation factor 88 （Myd88）/nuclear factor-kappa B （NF-κB） pathway. MethodsSixty male SD rats were selected and randomly divided into sham-operation group （sham group）， sepsis group （model group）， and esmolol group （ES group）， with 20 rats in each group. The sham group underwent cecum exploration， and the model group and ES group underwent cecal ligation and puncture to establish a model of sepsis. The ES group received continuous micropumping of diluted esmolol solution at 1 mL/h （15 mg·kg-1·h-1） for 6 h， while the sham group and model group received micropumping of an equal volume of normal saline. At 24 hours after operation， each group was tested for the expression of troponin I （TnI）， tumor necrosis factor α （TNF-α）， and interleukin-1 （IL-1） in serum; the left ventricular free wall was taken for hematoxylin and eosin staining to observe the pathological changes in the myocardium; Western blot was used to determine the expression of TLR4， Myd88， and NF-κB in the myocardial tissue. ResultsCompared with sham group， the model group had significantly more severe pathological myocardial injury， with significantly increased myocardial injury index TnI and inflammatory mediators TNF-α and IL-1. Compared with the model group， the ES group had significantly reduced myocardial injury and inflammatory mediators （F=18.84-602.11，Plt;0.05）. Western blot showed that the protein expression levels of TLR4， Myd88， and NF-κB in the model group was significantly higher than those in the sham group， while the above indices were significantly lower in the ES group than in the model group （F=17.15-95.92，Plt;0.05）. ConclusionEsmolol can reduce inflammatory response and myocardial injury， the mechanism of which may be associated with inhibiting activation of the TLR4/Myd88/NF-κB signaling pathway.

[KEY WORDS]sepsis; adrenergic beta-antagonists; Toll-like receptor 4; myeloid differentiation factor 88; NF-kappa B; rats

膿毒癥是指機(jī)體對(duì)感染的反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致的危及生命的器官功能障礙[1]。雖經(jīng)多年努力，其病死率仍居高不下，最新的流行病學(xué)調(diào)查顯示，膿毒癥病人的病死率高達(dá)64%[2]，繼續(xù)尋找有效的治療藥物對(duì)降低病死率至關(guān)重要。膿毒癥發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，其中包括交感神經(jīng)過(guò)度激活，體內(nèi)兒茶酚胺大量釋放，心臟是兒茶酚胺超載的主要靶器官[3]，也是膿毒癥發(fā)展過(guò)程中最常見(jiàn)的受損靶器官，腎上腺素能系統(tǒng)的激活可能是發(fā)生膿毒癥心功能障礙的重要機(jī)制之一。因此，有研究人員試圖應(yīng)用β1腎上腺素受體阻滯劑拮抗腎上腺素能系統(tǒng)的過(guò)度激活。近年來(lái)的研究證實(shí)，β1受體阻滯劑在拮抗交感神經(jīng)活性[4]、抑制炎癥反應(yīng)[5]、減輕高分解狀態(tài)[6]、改善膿毒癥病人預(yù)后[7]等方面具有顯著效果，另外，β1受體阻滯劑在心肌保護(hù)方面可發(fā)揮獨(dú)特作用，對(duì)于膿毒癥病人具有良好的臨床應(yīng)用前景。β腎上腺素受體已被證實(shí)表達(dá)于外周血單個(gè)核細(xì)胞，而外周血單個(gè)核細(xì)胞上存在的Toll樣受體（TLRs）炎癥通路。TLRs是一種跨膜蛋白，它能夠識(shí)別病原微生物相關(guān)分子模式（PAMPs），例如革蘭陰性菌脂多糖（LPS），LPS與脂多糖結(jié)合蛋白（LBP）結(jié)合形成復(fù)合物，LPS/LBP復(fù)合物隨即被單核細(xì)胞表面的CD14所識(shí)別并結(jié)合，然后進(jìn)一步與TLR4相結(jié)合，通過(guò)髓樣分化蛋白88（Myd88）依賴性信號(hào)傳導(dǎo)通路啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB（NF-κB）的激活和易位，釋放多種炎癥因子。艾司洛爾作為一種高選擇性β1受體阻滯劑，具有起效快、作用時(shí)間短的特點(diǎn)，且通過(guò)紅細(xì)胞代謝，不受肝、腎功能的影響，尤其適用于危重病人。前期已有研究證實(shí)艾司洛爾可減輕心肌損傷，但其具體機(jī)制尚不清楚。因此，本實(shí)驗(yàn)從TLR4/Myd88/NF-κB信號(hào)通路角度，探討艾司洛爾在膿毒癥心肌保護(hù)中的作用機(jī)制，以期為膿毒癥心肌損傷的治療提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

取雄性清潔級(jí)SD大鼠60只，體質(zhì)量為330～360 g，由青島大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，于室溫18～28 ℃、相對(duì)濕度40%～60%、12 h晝夜循環(huán)的環(huán)境中適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.2 主要藥物、試劑與儀器

鹽酸艾司洛爾注射液（山東齊魯制藥有限公司）;肌鈣蛋白I（TnI）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）試劑盒（北京索萊寶科技有限公司），TLR4抗體（北京索萊寶科技有限公司產(chǎn)品），Myd88抗體（英國(guó)Abcam公司），NF-κΒ p65抗體（Cell Signaling Technology公司），β-actin多克隆抗體（Elabscience公司），山羊抗兔IgG（Elabscience公司）;酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo Fisher，MK3），顯影儀（法國(guó)Vilber Fusion，F(xiàn)X5），雙目光學(xué)顯微鏡（日本Olympus，BX53）。

1.3 動(dòng)物分組與處理

采用隨機(jī)數(shù)字法將大鼠分為假手術(shù)組（Sham組）、膿毒癥組（Model組）和艾司洛爾組（ES組），每組20只。所有大鼠術(shù)前12 h禁食，可自由飲水。Model組和ES組依照文獻(xiàn)方法行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)（CLP法）制備膿毒癥動(dòng)物模型[8]：大鼠以100 g/L水合氯醛（5 mL/kg）腹腔注射麻醉，固定后沿腹前正中線切開(kāi)皮膚約2 cm，沿腹白線切開(kāi)，打開(kāi)腹腔，探查并找到盲腸，用3-0絲線結(jié)扎盲腸遠(yuǎn)端，同時(shí)保持腸道通暢，用18號(hào)針頭做兩處穿刺，輕輕擠壓盲腸將兩滴腸內(nèi)容物擠至腹腔，還納盲腸，逐層縫合腹壁切口。Sham組探查盲腸后立即還納關(guān)腹，不行盲腸結(jié)扎穿孔。造模成功后各組均行右側(cè)股靜脈穿刺術(shù)，ES組持續(xù)微量泵入艾司洛爾稀釋液1 mL/h（15 mg·kg-1·h-1），共計(jì)6 h;Sham組、Model組持續(xù)泵入等量生理鹽水。各組術(shù)后1 h內(nèi)均經(jīng)股靜脈給予30 mL/kg生理鹽水模擬液體復(fù)蘇。本實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物處置方法符合動(dòng)物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 大鼠存活率 由3名研究人員在不知分組情況下觀察所有大鼠一般狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)大鼠出現(xiàn)精神萎靡、毛發(fā)豎立、眼鼻出血、腹瀉等癥狀，則提示膿毒癥造模成功。同時(shí)，計(jì)算各組大鼠的存活率。

1.4.2 血清TnI、TNF-α和IL-1測(cè)定 所有存活大鼠均于造模后24 h再次麻醉，腹主動(dòng)脈取血2 mL，靜置30 min后，以3 000 r/min離心15 min，分離上清，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)，采用干式免疫熒光定量法測(cè)定TnI濃度，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法分別測(cè)定TNF-α、IL-1濃度。

1.4.3 心肌組織病理學(xué)觀察 術(shù)后24 h麻醉處死大鼠，分離大鼠心臟，取左心室游離壁，以4 ℃生理鹽水洗凈血污，用40 g/L多聚甲醛固定72 h以上，流水洗凈甲醛，梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，5 μm厚連續(xù)切片，經(jīng)攤片、烤片后進(jìn)行蘇木精-伊紅染色，封片后在光學(xué)顯微鏡下觀察心肌組織學(xué)變化。從心肌變性壞死、出血、間質(zhì)水腫和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)等方面觀察心肌病變分布情況，并采用半定量評(píng)分系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)分[9]，組織病理評(píng)分為0～4分，分別代表病變受累率0、25%、50%、75%和100%。由3名高年資病理科醫(yī)師在不知分組情況下同時(shí)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查并給出分?jǐn)?shù)，取平均值。

1.4.4 Western blot檢測(cè)心肌組織TLR4、Myd88和NF-κB蛋白表達(dá) 用電子天平稱取100 mg心肌組織，組織剪剪碎后，按每20 mg組織加入200 μg組織細(xì)胞裂解液，用玻璃勻漿器勻漿，裂解后的樣品以12 000 r/min離心10 min，取上清液，用BCA法檢測(cè)蛋白濃度。配制100 g/L的SDS-PAGE分離膠及50 g/L的濃縮膠，經(jīng)過(guò)上樣、蛋白電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉后，分別加入TLR4（1∶1 000）、Myd88（1∶1 000）及NF-κB（1∶1 000）抗體稀釋液，4 ℃孵育過(guò)夜，洗膜后加入二抗（1∶5 000）稀釋液，于室溫下孵育2 h，洗膜后加入超敏ECL發(fā)光液進(jìn)行顯影，采用Image J軟件分析各條帶光密度值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，多組比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠存活率的比較

術(shù)后24 h，Sham組大鼠死亡2只，存活率為90.0%;Model組死亡9只，存活率為55.0%;ES組死亡7只，存活率為65.0%。Model組大鼠存活率較Sham組顯著降低（χ2=6.14，P<0.05），而ES組與Model組存活率比較差異無(wú)顯著性（χ2=0.42，P>0.05）。盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)后，Model組、ES組大鼠均出現(xiàn)精神萎靡、毛發(fā)豎立、眼鼻出血、腹瀉等膿毒癥癥狀，而Sham組大鼠未出現(xiàn)上述癥狀。

2.2 各組大鼠心肌組織病理學(xué)變化

光鏡下Sham組心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，纖維肌絲束排列緊密，未見(jiàn)明顯水腫、充血、變性以及壞死等;Model組可見(jiàn)心肌細(xì)胞大量壞死，呈空泡樣變性，心肌纖維明顯水腫，排列疏松，部分心肌纖維斷裂，細(xì)胞核腫脹，間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn);ES組與Model組相比心肌細(xì)胞壞死減少，心肌纖維排列欠規(guī)整，間質(zhì)無(wú)明顯水腫，仍有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。心肌組織病理評(píng)分Model組（2.45±0.69）>ES組（1.77±0.73）>Sham組（0.83±0.71），差異具有顯著意義（F=18.84，P<0.05）。

2.3 各組大鼠血清TnI含量的比較

Model組大鼠血清TnI含量較Sham組明顯升高，ES組大鼠血清TnI含量較Model組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=231.82，P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.4 各組大鼠血清TNF-α、IL-1含量的比較

Model組大鼠血清TNF-α、IL-1含量較Sham組明顯升高，ES組大鼠血清TNF-α以及IL-1含量較Model組明顯降低，差異有顯著性（F=335.21、602.11，P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.5 各組大鼠心肌組織TLR4、Myd88及NF-κB蛋白表達(dá)的比較

Model組大鼠心肌組織中TLR4、Myd88以及NF-κB蛋白表達(dá)較Sham組明顯升高，而ES組大鼠心肌組織中TLR4、Myd88及NF-κB蛋白表達(dá)較Model組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=17.15～95.92，P<0.05）。表明艾司洛爾可抑制膿毒癥大鼠心肌組織中TLR4、Myd88及NF-κB蛋白的表達(dá)。見(jiàn)圖1、表2。

3 討 論

膿毒癥是重癥醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的常見(jiàn)病、多發(fā)病，已成為沉重的公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)。心肌損傷是膿毒癥導(dǎo)致的常見(jiàn)的器官功能障礙之一，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及全身炎癥網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)激活、免疫功能障礙、冠狀動(dòng)脈低灌注或不均勻灌注、氧化應(yīng)激、Ca2+超載、線粒體功能 障礙等[10-12]。雖然許多病理生理機(jī)制被提出，但每種機(jī)制的全部影響尚未闡明。目前臨床上通過(guò)測(cè)量生物標(biāo)志物（心肌肌鈣蛋白、腦鈉肽）和使用超聲心動(dòng)圖，可以很容易地識(shí)別膿毒癥病人的心臟功能障礙。然而，尚無(wú)針對(duì)膿毒癥心肌抑制的特異性治療方法。當(dāng)前治療常通過(guò)液體復(fù)蘇、血管活性藥物的支持確保足夠的心室充盈，優(yōu)化血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性，在很大程度上仍屬于支持性治療。未來(lái)的研究應(yīng)集中在糾正特定病理生理學(xué)異常的靶向治療上。

艾司洛爾作為一種β受體阻滯劑，因具有負(fù)性肌力作用以往通常被認(rèn)為不適合用于膿毒癥休克的治療。隨著對(duì)膿毒癥病理機(jī)制的不斷深入研究，人們發(fā)現(xiàn)膿毒癥病人的典型特征是腎上腺素能系統(tǒng)過(guò)度激活，強(qiáng)烈的腎上腺素能刺激可產(chǎn)生多種毒副作用，包括心臟效應(yīng)，如心率、心肌收縮力和心肌能量需求增加，以及心臟外效應(yīng)，如高分解狀態(tài)、高凝狀態(tài)、全身炎癥細(xì)胞因子的釋放調(diào)節(jié)。因此，人們對(duì)在膿毒癥病人中使用β腎上腺素能阻滯劑越來(lái)越感興趣，目的是減輕交感神經(jīng)過(guò)度刺激引起的副作用。SUZUKI等[5]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，連續(xù)輸注艾司洛爾可改善CLP法所致膿毒癥大鼠的各項(xiàng)心功能指標(biāo)，表明艾司洛爾可改善膿毒癥大鼠心肌氧利用率，作者認(rèn)為艾司洛爾的這種心臟保護(hù)作用可能是通過(guò)阻斷過(guò)度的β腎上腺素能刺激、減少β腎上腺素能受體密度而實(shí)現(xiàn)的。這一觀點(diǎn)也得到了國(guó)內(nèi)學(xué)者的認(rèn)同[13-14]。另有研究顯示，艾司洛爾還可通過(guò)抑制炎癥遞質(zhì)的表達(dá)，提高膿毒癥病人的心臟效應(yīng)[15-16]。除此之外，β受體阻滯劑在治療膿毒癥方面也表現(xiàn)出生存率上的優(yōu)勢(shì)，例如，LIU等[17]研究表明，艾司洛爾可降低膿毒癥休克病人28 d死亡率，同時(shí)縮短ICU住院時(shí)間。由此可見(jiàn)，艾司洛爾在治療膿毒癥所致心肌損傷方面具有積極作用。

文獻(xiàn)報(bào)道，盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)后24 h心肌損傷最明顯，是觀察膿毒癥心肌損傷最合適的時(shí)間點(diǎn)[18]。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ驮u(píng)價(jià)結(jié)果顯示，造模24 h后開(kāi)腹可見(jiàn)腹腔大量滲出伴有惡臭，盲腸末端充血壞死，同時(shí)心肌組織病理切片鏡下可見(jiàn)心肌細(xì)胞大量壞死，心肌纖維明顯水腫、排列疏松，部分心肌纖維斷裂，細(xì)胞核腫脹，間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，提示膿毒癥造模成功。TnI是目前檢測(cè)心肌細(xì)胞損傷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[19]，不僅可以作為診斷膿毒癥心肌損傷的指標(biāo)，還可以作為病情嚴(yán)重程度和預(yù)后的指標(biāo)[20]。LABUGGER等[21]的研究發(fā)現(xiàn)，在膿毒癥過(guò)程中，心肌細(xì)胞損害多為細(xì)胞亞微結(jié)構(gòu)的改變，心肌內(nèi)肌鈣蛋白裂解為較小片段，心肌細(xì)胞膜通透性增加，從而導(dǎo)致血漿肌鈣蛋白水平的升高。因此，本實(shí)驗(yàn)選擇TnI作為膿毒癥后心肌損傷及其程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)。本文結(jié)果顯示，Model組大鼠的血清TnI濃度較Sham組顯著升高，提示采用CLP法可誘導(dǎo)膿毒癥心肌損害，ES組的TnI濃度較Model組顯著降低，表明艾司洛爾能夠減輕膿毒癥大鼠心肌損傷。

膿毒癥時(shí)，LPS可促進(jìn)大量細(xì)胞因子釋放，從而引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)，過(guò)度炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致器官功能障礙，尤其是心臟。TNF-α在膿毒癥發(fā)病早期起關(guān)鍵作用，它是啟動(dòng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的始動(dòng)因子，抑制TNF-α信號(hào)能有效改善內(nèi)毒素血癥引起的心肌損傷[22]。例如，糖皮質(zhì)激素在抑制TNF-α的同時(shí)，可以減輕膿毒癥大鼠的心肌抑制[23];阿托伐他汀可以抑制TNF-α的表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)，從而減輕膿毒癥大鼠的心肌損傷[24]。與以往研究相一致，本實(shí)驗(yàn)也證實(shí)膿毒癥大鼠血清中TNF-α的表達(dá)水平明顯增加，通過(guò)外源性給予艾司洛爾，可以明顯降低TNF-α的表達(dá)。另外，炎癥因子IL-1也在膿毒癥心肌損傷中發(fā)揮重要作用[25]。例如，黃芪多糖能夠抑制膿毒癥大鼠心肌組織IL-1的表達(dá)，從而減輕心臟損害[26]。本文研究結(jié)果顯示，Model組大鼠血清中IL-1的表達(dá)水平較Sham組明顯增加，而艾司洛爾可以明顯降低IL-1的表達(dá)水平。以上結(jié)果提示，艾司洛爾可能通過(guò)降低炎癥因子TNF-α和IL-1的表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)，從而改善膿毒癥心肌損傷。

TLRs是一種跨膜蛋白，它能識(shí)別PAMPs，通過(guò)Myd88依賴性信號(hào)傳導(dǎo)通路啟動(dòng)信號(hào)傳導(dǎo)，激活細(xì)胞內(nèi)NF-κB信號(hào)通路，啟動(dòng)炎癥因子轉(zhuǎn)錄[27]。近年來(lái)，對(duì)TLR4/Myd88/NF-κB信號(hào)通路的研究涉及器官移植、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、腫瘤、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病等多個(gè)領(lǐng)域。ZHOU等[28]采用CLP法建立膿毒癥大鼠模型，證實(shí)了抗TLR4單抗預(yù)處理可抑制TLR4/Myd88信號(hào)通路，減輕炎癥反應(yīng)。本研究進(jìn)一步探討了艾司洛爾調(diào)控膿毒癥大鼠心肌炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制，結(jié)果顯示，艾司洛爾能顯著抑制TLR4、Myd88、NF-κB蛋白的表達(dá)。表明TLR4/Myd88/NF-κB信號(hào)通路可能參與了膿毒癥大鼠的心肌損傷及炎癥反應(yīng)。

綜上所述，艾司洛爾能夠減輕炎癥反應(yīng)和心肌損傷，其作用機(jī)制可能與抑制TLR4/Myd88/NF-κB信號(hào)通路的激活有關(guān)。這將為膿毒癥大鼠心肌 損傷的預(yù)防和治療提供新的研究方向。但本實(shí)驗(yàn)存在未設(shè)置艾司洛爾濃度梯度、觀察時(shí)間短等不足，因此，艾司洛爾在膿毒癥心肌保護(hù)中的劑量和作用時(shí)間仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]RHODES A， EVANS L E， ALHAZZANI W， et al. Surviving sepsis campaign： International Guidelines for Management of Sepsis and Septic Shock：2016[J]." Intensive Care Medicine， 2017，43（3）：304-377.

[2]NAPOLITANO L M. Sepsis 2018： definitions and guideline changes[J]." Surg Infect， 2018，19（2）：117-125.

[3]ANNANE D， BELLISSANT E， CAVAILLON J M. Septic shock[J]." Lancet， 2005，365（9453）：63-78.

[4]RUDIGER A. Beta-block the septic heart[J]." Crit Care Med， 2010，38（10 Suppl）：S608-S612.

[5]SUZUKI T， MORISAKI H， SERITA R， et al. Infusion of the beta-adrenergic blocker esmolol attenuates myocardial dysfunction in septic rats[J]." Crit Care Med， 2005，33（10）：2294-2301.

[6]DE MONTMOLLIN E， ABOAB J， MANSART A， et al. Bench-to-bedside review： beta-adrenergic modulation in sepsis[J]." Crit Care Lond Engl， 2009，13（5）：230.

[7]MORELLI A， ERTMER C， WESTPHAL M， et al. Effect of heart rate control with esmolol on hemodynamic and clinical outcomes in patients with septic shock： a randomized clinical trial[J]." JAMA， 2013，310（16）：1683-1691.

[8]RITTIRSCH D， HUBER-LANG M， FLIERL M A， et al. Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture[J]." Nature Protocols， 2009，4（1）：31-36.

[9]REZKALLA S， KLONER R A， KHATIB G， et al. Beneficial effects of captopril in acute coxsackievirus B3 murine myocarditis[J]." Circulation， 1990，81（3）：1039-1046.

[10]LIU Y C， YU M M， SHOU S T， et al. Sepsis-induced cardiomyopathy： mechanisms and treatments[J]." Frontiers in Immunology， 2017，8：1021.

[11]PARK J H， KANG S J， SONG J K， et al. Left ventricular apical ballooning due to severe physical stress in patients admitted to the medical ICU[J]." Chest， 2005，128（1）：296-302.

[12]WERDAN K， OELKE A， HETTWER S， et al. Septic cardiomyopathy： hemodynamic quantification， occurrence， and pro-gnostic implications[J]." Clin Res Cardiol： Off J Ger Cardiac Soc， 2011，100（8）：661-668.

[13]方德舟. 艾司洛爾對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]." 蘭州：蘭州大學(xué)， 2016.

[14]劉德紅，劉映峰，孟新科，等. 艾司洛爾對(duì)膿毒癥大鼠心肌細(xì)胞β腎上腺能受體及血流動(dòng)力學(xué)的影響[J]." 中國(guó)老年學(xué)雜志， 2014，34（13）：3703-3705.

[15]WEI C J， LOUIS H， SCHMITT M， et al. Effects of low doses of esmolol on cardiac and vascular function in experimental septic shock[J]." Crit Care Lond Engl， 2016，20（1）：407.

[16]李宛霞，陶少宇. β1受體阻滯劑對(duì)膿毒癥大鼠心肌損傷的影響[J]." 中國(guó)急救醫(yī)學(xué)， 2015，35（7）：577-579.

[17]LIU X Q， HUANG W P， WEN M Y， et al. Esmolol improves clinical outcome and tissue oxygen metabolism in patients with septic shock through controlling heart rate[J]." Zhonghua Wei Zhong Bing Ji Jiu Yi Xue， 2015，27（9）：759-763.

[18]MACEDO R， JAVADI S M， HIGUCHI T， et al. Heart and systemic effects of statin pretreatment in a rat model of abdominal sepsis. Assessment by 99mTc-sestamibi biodistribition[J]." Acta Cirurgica Brasileira， 2015，30（6）：388-393.

[19]DEMISSEI B G， POSTMUS D， CLELAND J G， et al. Plasma biomarkers to predict or rule out early post-discharge events after hospitalization for acute heart failure[J]." Eur J Heart Fail， 2017，19（6）：728-738.

[20]鄧粵敏，閔玲. 膿毒癥患者心肌損傷標(biāo)志物的水平分析[J]." 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志， 2017，29（6）：680-683.

[21]LABUGGER R， ORGAN L， COLLIER C， et al. Extensive troponin I and T modification detected in serum from patients with acute myocardial infarction[J]." Circulation， 2000，102（11）：1221-1226.

[22]GIL M， KIM Y K， HONG S B， et al. Naringin decreases TNF-α and HMGB1 release from LPS-stimulated macrophages and improves survival in a CLP-induced sepsis mice[J]." PLoS One， 2016，11（10）：e0164186.

[23]MENG X， AO L， MELDRUM D R， et al. TNF-alpha and myocardial depression in endotoxemic rats： temporal discor-dance of an obligatory relationship[J]." Am J Physiol， 1998，275（2）：R502-R508.

[24]王之余，赫太平，顧金萍，等. 阿托伐他汀對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)的研究[J]." 實(shí)用休克雜志（中英文）， 2019，3（4）：213-218.

[25]GE Y， HUANG M， YAO Y M. Recent advances in the biology of IL-1 family cytokines and their potential roles in development of sepsis[J]." Cytokine amp; Growth Factor Reviews， 2019，45：24-34.

[26]程燕，陳志明，李莉，等. 黃芪多糖對(duì)膿毒癥大鼠心臟功能及炎癥因子水平的影響[J]." 浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2018，42（5）：354-359.

[27]LIU L， GU H L， LIU H M， et al. Protective effect of resveratrol against IL-1β-induced inflammatory response on human osteoarthritic chondrocytes partly via the TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway： an “in vitro study”[J]." Int J Mol Sci， 2014，15（4）：6925-6940.

[28]ZHOU S J， WANG G， ZHANG W B. Effect of TLR4/MyD88 signaling pathway on sepsis-associated acute respiratory distress syndrome in rats， via regulation of macrophage activation and inflammatory response[J]." Exp Ther Med， 2018，15（4）：3376-3384.

（本文編輯 馬偉平）