羊弓形蟲感染的診斷與防治

董 航，苑淑賢，宮鵬濤，郭衍冰，孫興忠，姚新華，曹利利*

1.吉林省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院，吉林 長(zhǎng)春 130062；2.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130062

1 病原介紹

弓形蟲病是一種全球范圍廣泛流行的人畜共患的原蟲病。弓形蟲能感染所有的有核細(xì)胞，在豬、牛、羊等家畜感染非常普遍(40%～60%)，據(jù)報(bào)道弓形蟲感染可使羊的流產(chǎn)率達(dá)到20%～30.7%[1]。其中，大多成年羊?yàn)殡[性感染，可以引起懷孕母羊的流產(chǎn)和羊群的發(fā)病，阻礙了我省養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展，給養(yǎng)羊業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

在吉林省，肉羊相關(guān)的養(yǎng)殖是農(nóng)民致富的有效途徑，養(yǎng)肉羊風(fēng)險(xiǎn)小，收益高。大力發(fā)展肉羊生產(chǎn)可緩解羊肉供需矛盾，確保有效供應(yīng)。然而，被弓形蟲包囊污染的羊肉是人類感染弓形蟲的因素之一，人們喜歡吃涮火鍋或烤肉等可能食用未煮熟的羊肉制品，導(dǎo)致人的感染[2]。因此，弓形蟲感染已成為影響人類健康的公共衛(wèi)生問題。

2 流行病學(xué)

弓形蟲感染分布于世界各地，其中吉林省羊弓形蟲的流行調(diào)查情況尚屬空白，缺乏有效的數(shù)據(jù)。該病沒有固定的季節(jié)性規(guī)律，多發(fā)病于秋冬季。弓形蟲的隱性感染率很高，這些機(jī)體內(nèi)帶有弓形蟲的病畜，成為了該病的主要傳染源。病畜的臟器、體液、排泄物甚至血液都可能含有弓形蟲，成為傳染源。動(dòng)物通過吞入上述傳染源可發(fā)生經(jīng)口感染，已經(jīng)感染該病的母畜通過垂直傳播發(fā)生胎盤感染[3]。

3 臨床癥狀

該病的成年羊大都呈隱性感染，少部分有中樞神經(jīng)和呼吸系統(tǒng)的癥狀。有的母羊無明顯癥狀而流產(chǎn)，流產(chǎn)常出現(xiàn)于正常分娩前4～6周，也有少數(shù)足月產(chǎn)后死亡的。羔羊感染該病大多呈急性型，表現(xiàn)為體溫升高，食欲減退，精神沉郁，呼吸困難，眼中出現(xiàn)分泌物，有時(shí)可見四肢麻痹等癥狀。

4 病理變化

發(fā)病的羊剖檢可見周身淋巴結(jié)腫大，剖開可見米粒大小的出血點(diǎn)并伴有壞死。胸腔有積液，肺臟剖檢可見腫大及出血，肝部有壞死，腎臟變色腫大，可能出現(xiàn)出血點(diǎn)，腸黏膜有出血點(diǎn)和糜爛現(xiàn)象，有的病例可見少部分的潰瘍?cè)睢ｋ[性感染的羊剖檢可見部分器官出現(xiàn)水腫或壞死。

5 診斷

為了將羊弓形蟲感染與其他癥狀相似的疾病進(jìn)行鑒別，需要將臨床剖檢與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相結(jié)合進(jìn)行鑒別診斷。該病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)常見有病原學(xué)檢測(cè)、分子生物學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)。

5.1 病原學(xué)檢測(cè)

該類檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于應(yīng)用簡(jiǎn)單廣泛，缺點(diǎn)在于檢出率低、操作時(shí)間長(zhǎng)，不利于廣泛推廣。一般采用內(nèi)臟涂片檢查，取病變器官制作涂片，染色鏡檢。可見形狀不同的蟲體，有呈月牙型或半圓形的，有呈圓形或長(zhǎng)圓形的[4]。有條件的可以接種試驗(yàn)動(dòng)物來進(jìn)行診斷，一般作小鼠的腹腔接種。

5.2 分子生物學(xué)檢測(cè)

該類檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于檢出率高、特異性好，缺點(diǎn)在于操作難度大、對(duì)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和儀器配置要求比較高，很難在基層進(jìn)行普及。一般被廣泛使用的是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）方法，其中多重和巢式方法在弓形蟲病檢測(cè)中，取得了不錯(cuò)的效果。該方法目前應(yīng)用廣泛，其中巢式陽性檢出率最高[5]。但由于該檢測(cè)方法需要特殊儀器及專業(yè)人員操作，給應(yīng)用及推廣帶來較大阻礙。

5.3 血清學(xué)檢測(cè)

該方法普遍應(yīng)用于檢測(cè)弓形蟲感染。主要包括染色試驗(yàn)、凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫膠體金技術(shù)等。染色試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)是特異性高，缺點(diǎn)是對(duì)操作者有一定危險(xiǎn)。凝集試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)單、敏感性好，缺點(diǎn)是試劑材料價(jià)格較高，不便于推廣。免疫膠體金技術(shù)具有快速、簡(jiǎn)單和特異性高等優(yōu)勢(shì)，但目前該技術(shù)仍局限于該病早期的檢測(cè)，而且造價(jià)相對(duì)較高。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是該病診斷目前最常見的血清學(xué)檢測(cè)方法，其優(yōu)點(diǎn)在于方法簡(jiǎn)單、特異性高、試劑材料價(jià)格不高等，目前該方法使用相對(duì)廣泛，但是因?yàn)榭乖图兌炔槐M相同，不同品牌的試劑盒檢測(cè)效果相差較多，存在國產(chǎn)試劑盒重復(fù)性、敏感性不夠，進(jìn)口試劑盒效果不錯(cuò)但售價(jià)過高等缺點(diǎn)。

6 防治

羊弓形蟲的治療主要采用磺胺類藥物，需要在病程早期用藥，中晚期施藥雖然也能夠緩解癥狀，但是不能夠有效抑制蟲體對(duì)機(jī)體組織的侵入，導(dǎo)致病羊成為弓形蟲攜帶者。同時(shí)，也可選用磷酸伯氨喹啉及二磷酸氯喹林治療該病[6]。

預(yù)防方面，注意維持羊舍潔凈，按期消毒殺菌。一定要防止寵物糞便對(duì)飲用水和飼料產(chǎn)生污染。發(fā)生流產(chǎn)后，胎兒、分泌物、周圍環(huán)境等必須進(jìn)行殺菌處理[7]。因弓形蟲感染或疑似感染死亡的動(dòng)物，將其尸體必須進(jìn)行無害化處理，以免該病原污染環(huán)境以及易感動(dòng)物。

7 展望

至今，弓形蟲病的常用檢測(cè)方法仍為血清學(xué)檢測(cè)，國內(nèi)已研制的不同種類的檢測(cè)試劑盒在人類、動(dòng)物流行病學(xué)調(diào)查和疾病診斷中得到一定程度的應(yīng)用，但是從檢測(cè)效率、可重復(fù)性等指標(biāo)與國外試劑盒對(duì)比，仍存在明顯差距[8]。如某ELISA試劑盒與國外常用試劑盒檢測(cè)符合率僅為60%。目前國內(nèi)仍缺乏臨床快速診斷方法。由于弓形蟲的宿主范圍廣泛且生活史復(fù)雜，有時(shí)試劑盒不能有效檢測(cè)到抗體，而且存在假陽性和假陰性。

弓形蟲病治療方面，至今仍無特效藥物。防治方面，通過基因技術(shù)構(gòu)建新型疫苗，一旦效果良好，將會(huì)給養(yǎng)羊業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益。目前已知在研的有毒力因子缺失疫苗、純化蛋白疫苗、多表位蛋白合成疫苗等，為弓形蟲的防制開辟了新思路。