中醫藥治療支氣管哮喘實驗研究進展*

王保芹，李澤庚

1 江蘇省連云港市中醫院 江蘇連云港 222000 2 安徽中醫藥大學 安徽合肥 230038

支氣管哮喘是由多種細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，臨床以反復發作性喘息、氣急、胸悶或咳嗽為主要癥狀。目前哮喘的發病機制尚未完全闡明，其發病機制較為復雜，多種發病機制相互作用，氣道炎癥形成機制、氣道高反應性、氣道重構以及神經因素等均是哮喘發病的重要環節。中醫藥治療支氣管哮喘有其獨特的優勢，但其具體治療支氣管哮喘的作用機制不明確，本文將從以下幾個方面對近年來中醫藥治療哮喘的作用機制進行探討。

抑制炎癥介質的釋放

目前已知參與哮喘發病機制調節的炎癥介質已達50余種，主要有花生四烯酸代謝產物、白三烯和前列腺素類，它們可調節支氣管舒縮、氣道分泌、血漿滲出、氣道反應性及氣道結構。羅世杰[1]等探討熱喘平口服液對豚鼠哮喘模型的平喘作用機制，用熱喘平口服液干預豚鼠哮喘模型，用藥7天后檢測血清神經源性氣道炎性介質P物質（SP）、血栓素B2（TXB2）、白三烯B4（LTB4）、6－酮－前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）的含量；結果得出熱喘平口服液能發揮解痙、平喘的藥理效應與降低血清中 SP、TXB2、LTB4含量，升高6-keto-PGF1α水平有關，提示該藥的作用機制與調節血清炎性介質有關。陳賀[2]等研究證實復方川貝顆粒干預豚鼠哮喘模型可減少嗜酸粒細胞浸潤、降低血清中LTB4和TXB2含量，這可能是該方治療哮喘的作用機制之一。

血小板激活因子（PAF）是一種作用廣泛的炎性介質，可導致氣道平滑肌痙攣、微血管滲漏、粘液分泌亢進、支氣管壁炎性細胞浸潤及持續性氣道高反應性等多種支氣管哮喘的病理變化，有研究表明哮喘急性發作期和緩解期患者血中PAF均有升高，急性發作期升高更為明顯，提示哮喘的發作與PAF相關[3]。內皮素（ET- 1）是一種促炎物質，是目前發現的最強的縮血管因子之一，對支氣管和血管均有收縮作用，可引起肺動脈、肺毛細血管、肺靜脈強烈收縮，有研究表明哮喘急性期ET-1顯著增高，重度哮喘更加明顯，輕度哮喘ET-1水平仍較正常人高[4]。韓超[5]等研究翹芩清肺劑對哮喘模型大鼠的平喘作用機制，用翹芩清肺劑干預哮喘模型大鼠，4周后測定血清PAF、WBC、EOS及肺泡灌洗液（BALF）中ET含量的變化，結果得出翹芩清肺劑能有效減輕哮喘模型的哮喘程度（P＜0.05）及明顯延長病鼠的哮喘潛伏期（P＜0.01），降低病鼠的PAF，WBC，EOS含量及ET水平，提示翹芩清肺劑發揮有效治療哮喘的作用機制可能與降低 PAF，WBC，EOS 及ET水平密切相關。

支氣管哮喘是多種細胞參與的氣道慢性炎癥，急性發作時呼吸道上皮細胞、巨噬細胞在過敏源及炎癥因子刺激下激活NO合成酶（NOS），使NO生成增多，NO在哮喘的發生機制中具有雙相調節作用，低濃度時可介導支氣管平滑肌的松弛和血管的舒張反應，NO生成增多會擴張支氣管黏膜血管，增強毛細血管滲出，導致氣道黏膜水腫，加重氣道阻塞，引起氣道高反應性而導致和（或）加重哮喘發病，可以認為哮喘時NO的主要作用系細胞毒性分子作用[6-7]。王力寧[8]等研究發現六味地黃顆粒能明顯抑制哮喘大鼠肺組織NOS的合成與釋放，進而減少NO的合成，這可能是六味地黃顆粒用于治療哮喘并減輕氣道炎癥的重要機制之一。王曉紅[9]等研究發現溫陽益氣平喘方可減少哮喘大鼠嗜酸性粒細胞浸潤，降低肺組織NO的含量，減少NO細胞毒性分子作用，從而能減輕哮喘大鼠氣道炎癥和延緩氣道重塑等病理過程。

誘導細胞凋亡

氣道慢性炎癥是導致哮喘反復發作的原因之一，氣道慢性炎癥主要為嗜酸粒細胞（EOS）浸潤，而IL－5在嗜酸性粒細胞介導的炎癥反應中發揮重要作用，另有研究表明EOS凋亡的減少是哮喘支氣管和肺組織炎癥浸潤和哮喘反復發作的重要機制[10-11]。王明明[12]實驗研究得出中藥補肺益腎方可通過降低氣道IL－5水平，促進EOS凋亡，從而達到抑制氣道重塑、減輕氣道炎癥的目的，這可能是其防治哮喘的機制之一。哮喘是多種細胞參與的慢性氣道炎癥，患者氣道炎癥是活化淋巴細胞、嗜酸細胞和肥大細胞的浸潤，其中活化的T淋巴細胞具有調節肥大細胞、嗜酸細胞氣道內幕集和活化的功能，進而加重氣道炎癥[13]。李丁蕾[14]等研究表明金龍固本補肺健脾合劑可通過下調CD4、CD8表達，促進支氣管哮喘患者體內CD4+、CD8+T細胞凋亡，有效改善哮喘緩解期患者的臨床癥狀，減少哮喘發作次數。

延緩或阻斷氣道重構

氣道重構是哮喘的重要病理特征，重構在形態上表現為支氣管黏膜上皮脫落，基底膜網狀層增厚，黏膜下膠原沉積，血管增生及外膜新血管形成，黏膜腺肥大，支氣管平滑肌增生[15]。有研究表明支氣管哮喘患者氣道重塑與血清中 MMP、TIMP 水平呈正相關[16]。霍博雅[17]等觀察中藥止喘湯對哮喘大鼠氣道重構的干預，并探討其對基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）及金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）表達的影響，結果發現中藥干預后大鼠氣道壁明顯變薄，MMP-9、TIMP-1表達減少，與哮喘組比較有統計學意義（P＜0.01），表明中藥可能是通過調節MMP-9和TIMP-1的表達而達到干預大鼠氣道重塑的目的。鐘李英[18]等采用中醫分期序貫治療干預哮喘大鼠模型，利用免疫組化、Western Blot和實時熒光定量PCR方法檢測哮喘大鼠氣道重構時肺組織中基質金屬蛋白酶MMP-9及其抑制劑TIMP-1表達，結果得出哮喘時MMP-9及TIMP-1表達均升高，中藥分期序貫治療可能通過降低哮喘大鼠肺組織中MMP-9及其抑制劑的表達，調節兩者比值，達到阻止氣道重構的作用。

TGF-β1是一種具有強烈致纖維化作用的細胞因子，能刺激氣道平滑肌細胞分裂與增殖，導致平滑肌增生和肥大，在氣道重構的過程中起著關鍵作用[19]。桑勉[20]等采用茵陳蒿湯干預哮喘模型大鼠，同時設西藥組、模型組和空白對照組，4周后檢測血清中TGF-β1的含量，結果發現中藥干預組與西藥組均可降低血清TGF-β1的含量，療效相當（P＞0.05），表明茵陳蒿湯加減方能通過減低大鼠血清中 TGF-β1的含量阻斷氣道重塑的發生，從而達到預防和緩解哮喘的治療目的。

α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）是肌纖維細胞亞類之一，也是平滑肌的主要標志物，可反映平滑肌數量及其收縮能力，具有收縮潛能和較強的膠原合成能力，可導致管腔收縮狹窄，導致哮喘發作，并且α-SMA隨氣道重塑的加劇表達增加[21]。白凌軍[22]等通過實驗研究得出屏哮飲能抑制α-SMA的表達，改善哮喘小鼠早期氣道重塑。也有相關研究表明地龍、黃芪、穿山龍均能抑制慢性哮喘模型小鼠肺組織中α-SMA的表達，提示抑制α-SMA的表達可能是這些中藥抑制哮喘氣道重構的重要機制[23-25]。

調控細胞因子的表達

研究發現T淋巴細胞免疫調節作用失常與支氣管哮喘時氣道的變態反應炎癥有非常密切的聯系，T淋巴細胞可分為Th1和Th2兩個亞群，而哮喘的發作與Th1/Th2 分泌的細胞因子發生失衡密切相關[26]。IL-4是哮喘炎癥過程中起主導作用的因子，IL-4等產生增加是導致血清IgE水平增加的重要原因，IL-4血清水平升高與哮喘嚴重程度密切相關，IL-4主要由Th2細胞分泌，在哮喘發作期，Th2亞群數目增多，激活的Th2亞群釋放高水平的IL-4、IL-5等細胞因子，IL-5水平增高，會引起嗜酸細胞趨化、增殖、活化，L-13是一個重要的介導變態反應的Th2型細胞因子，與哮喘的發生關系密切[27-28]。俞亞麗[29]等研究表明IFN-α/IL -4的失衡參與哮喘發病過程，而止咳平喘合劑作用于哮喘的機制可能是通過下調IL-4的水平和提高IFN-α的含量，糾正Th1/Th2細胞因子的失衡，進而減輕氣道炎癥，延緩哮喘進程。金璇[30]等通過實驗研究探討清肺平喘膠囊治療哮喘的作用機制，用清肺平喘膠囊干預哮喘大鼠模型，后檢測BALF和血清中IL-4、IL-13、IgE、MDA含量，結果表明清肺平喘膠囊可降低脂質過氧化物IL-4、IL-13、IgE、MDA相關細胞因子的表達，減少炎性介質IgE的增加，這可能是該藥有效地阻止哮喘炎癥的發生，減輕氣道炎癥及緩解氣道高反應性發展的機制之一。高定一[31]等研究證實小青龍湯合香砂六君子湯可有效降低哮喘小鼠氣道反應性與Th2型細胞因子水平并改善肺部炎癥細胞浸潤，提示其抗哮喘的機制可能與抑制Th2型免疫反應有關。

抑制細胞黏附分子的表達

相關研究表明黏附分子是參與支氣管哮喘發病的重要機制之一，內皮細胞黏附分子-1（VCAM-1）又稱誘導性細胞黏附分子，它表達于白細胞表面，在哮喘發作的起始階段可以作用于中性粒細胞、單核細胞及淋巴細胞，誘導炎性反應細胞向氣道炎性反應部位移行；細胞間黏附分子-1（sICAM-1）則廣泛分布于血管內皮、白細胞、成纖維細胞等部位，白細胞可以與其相互作用，并激活白細胞釋放多種活性物質，增加氣道的高反應性，引起哮喘發作或氣道高反應性[32]。經鑫愛[33]等實驗研究表明哮喘模型組大鼠ICAM-1蛋白表達顯著增高，加味麻杏石甘湯發揮其解痙平喘的功效、控制哮喘的發作和減輕氣道炎癥可能與該方可減少哮喘大鼠的氣道EOS細胞浸潤、抑制ICAM-1蛋白的表達有關。竇迎婷[34]等通過研究發現中藥疏風通絡方能顯著抑制哮喘大鼠黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表達，阻抑嗜酸性粒細胞跨膜遷移，從而抑制氣道EOS的浸潤，減輕氣道炎癥反應，這可能是其有效治療哮喘的作用機制之一。馬婷[35]實驗研究證實平喘合劑能明顯降低血清sICAM-1水平，其治療哮喘的作用機制與抑制氣道炎癥、降低氣道高反應性等有關。

展望

綜上可知目前中醫藥治療哮喘的實驗研究已經上升到分子水平、細胞水平，研究內容涵蓋了哮喘發病機制的多個環節，諸多研究成果可為中醫藥有效治療哮喘提供科學的臨床依據，為以后中醫藥治療哮喘的臨床和科研研究提供了寶貴的經驗。但仍存在一些不足，首先諸多研究對象都是支氣管哮喘大鼠或豚鼠模型，缺乏支氣管哮喘“證”的研究模型，中醫藥治療的精髓是辨證論治，藥證合拍方可發揮中醫藥的治療效果，在以后的研究過程中應當建立哮喘大鼠“證”的研究模型，這樣得出的結果會更有臨床及科研價值。其次哮喘實驗研究樣本量不足，影響研究結果，在以后的研究中應當增加樣本量。最后中醫藥對哮喘作用機理的研究多停留在某一個點或某一個環節，揭示全身作用機制的研究較少，中醫藥具體作用于哮喘機制及有效發揮治療效果的途徑不甚明確。在以后的研究過程中應當從揭示全身作用機制入手，在哮喘的急性發作期、慢性持續期、緩解期各個階段運用中醫藥干預，從而更好地探討中醫藥治療哮喘的作用機理，為中醫藥在防治哮喘方面的優勢和途徑開辟新的領地。