孕婦產前紅細胞血型不規則抗體篩查及鑒定分析

血型不規則抗體是指除ABO血型以外的抗體，其產生多與輸血和注射與血型不合的血液制品有關。血型不規則抗體的產生會引發免疫性輸血反應、交叉配血困難等問題。對于孕婦而言，不規則抗體可能經胎盤進入胎兒體內，引發新生兒溶血（HDN）[1]。ABO血型系統溶血（ABO-HDN）在臨床中較為常見，且病情程度輕，容易治療。但非ABO-HDN 較為少見，且病情復雜，治療難度大。以往研究認為Rh 血型系統所致HDN 最為嚴重[2]。近年來相關研究不斷深入，除Rh 血型系統外，MNS 血型系統及多血型混合所致HDN 引起了國內外研究者的關注。本研究分析孕婦產前紅細胞血型不規則抗體篩查及鑒定情況，探討孕婦產前血型不規則抗體主要分型、高危因素及與非ABO-HDN的關系，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月～2019年11月在我中心血站篩查產前紅細胞血型不規則抗體的4 768例孕婦的血液樣本，孕婦年齡21～42歲，平均（29.14±3.06）歲；其中2 912例為初產婦，1 856例為經產婦；2 757例有妊娠史，2 011例無妊娠史；897例有輸血史。入選標準：①于妊娠20 周內行不規則抗體篩查；②單胎；③對本次研究知情且簽署知情同意書。排除標準：①未定期產檢；②雙胎或多胎。

1.2 方法篩查及鑒定相關儀器、試劑：抗體篩查細胞（上海羽朵生物科技有限公司，批號：20190142、20190433），抗體特異性鑒定譜（歐蒙醫學實驗診斷股份公司，批號：20192402），凝膠卡（達亞美公司，ZB/DM 007-2001），LG16-A/B/C 離心機（北京雷勃爾離心機有限公司），HL-JN01 孵育儀（東碩儀表自動化有限公司）。

篩查及鑒定方法：采集所有受檢者2ml 空腹靜脈血，分離血清，使用微柱凝膠卡進行篩查和鑒定，具體方法嚴格按照說明書操作。取1%濃度抗體篩查細胞Ⅰ～Ⅲ各25μl，做好標記，加入50μl 血清，于孵育儀持續孵化15min，以離心機離心處理10min（1 000r/min）。肉眼觀察結果，如果凝集散開檢測結果為陰性；如果凝集不散開檢測結果為陽性。對于陽性標本，以抗體特異性鑒定譜做特異性鑒定分析，若紅細胞于微柱凝膠孔膠面/膠中凝集為陽性，若紅細胞于微柱凝膠孔底部沉積為陰性。

1.3 觀察指標①不規則抗體陽性檢出率及特異性分布情況；②不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規則抗體陽性檢出率；③孕婦產前不規則抗體陽性所致非ABO-HDN 發生率。

1.4 統計學方法采用SPSS 26.0 軟件分析數據，計數資料以n（%）表示，行χ2檢驗，檢驗水準α=0.05，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不規則抗體檢出情況4 768例孕婦中，28例不規則抗體陽性，陽性率0.59%。其中Rh 血型系統最多，占不規則抗體總數71.43%（20/28）；其次為MNS 血型系統，占10.71%（3/28），其他血型系統較少，見表1。

2.2 不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規則抗體陽性檢出率經產婦、有妊娠史孕婦、有輸血史孕婦不規則抗體檢出率分別高于初產婦、無妊娠史孕婦、無輸血史孕婦（P<0.05），見表2。

2.3 孕婦產前不規則抗體陽性所致非ABO-HDN發生率經鑒定，28例產前不規則抗體陽性孕婦非ABO-HDN 發生率為35.71%（10/28），其中多血型混合型發生率為50.00%，Rh 血型系統型發生率為40.00%，MNS 血型系統型發生率為33.33%，其他血型系統未見非ABO-HDN，見表3。

表1 不規則抗體特異性分布

表2 不同生育史、妊娠史、輸血史孕婦不規則抗體陽性檢出率

表3 孕婦產前不規則抗體陽性所致非ABO-HDN 發生率

3 討論

不規則抗體是引發HDN的重要原因，嚴重損害新生兒生命健康，影響生育質量[3]。因此，紅細胞血型不規則抗體篩查為孕婦產前篩查中的重要項目，以避免含有弱抗體的受血者輸入含有相應抗原的紅細胞而受到免疫刺激，預防溶血性輸血。Rh血型系統相關抗體是引發非ABO-HDN、免疫性輸血反應的常見不規則抗體[4]，此外還有其他不規則抗體，充分認識不規則抗體特異性分布情況、相關因素、對非ABO-HDN的影響，更有助于指導臨床合理制定預防方案。

3.1 孕婦產前紅細胞血型不規則抗體特異性分布研究已經證實，Rh血型系統相關抗體為最常見的不規則抗體[5]。本研究4 768例孕婦產前血液樣本，共檢出28例不規則抗體陽性，陽性率0.59%，其中Rh 血型系統占71.43%，其次為MNS 血型系統（占10.71%），其他血型系統較少。Rh 不規則抗體中抗-E 占35.71%、抗-C 占14.29%。由此可見抗-E、抗-C 為Rh 血型系統中常見不規則抗體[6]。因此，可以將產婦RhCcEe 抗原作為常規檢測，指導臨床為其提供相同血液成分，避免輸血引發同種免疫。另外，研究中發現MNS 血型不規則抗體也較多，其中以抗-M 為主。抗-M 為常見抗體，存在形式為IgM，是一種天然抗體。以往認為抗-M 不會經胎盤傳輸給胎兒，但近年來有諸多抗-M 引發HDN的報道[7]，因此臨床中也應重視抗-M 檢測。

3.2 孕婦產前紅細胞血型不規則抗體產生相關因素孕婦產前紅細胞血型不規則抗體產生因素較多，本研究結果顯示生育史、妊娠史、輸血史均會增加不規則抗體發生率，其原因復雜。女性妊娠、生育過程中會產生血型同種抗體，隨著妊娠、分娩次數增多，不規則抗體形成風險升高[8]。另外，異體輸血增加血型同種抗體產生風險，而且輸血量、輸血次數與同種抗體產生率呈正相關[9]。因此，分析孕婦孕產史、輸血史情況，對于預測孕婦產前紅細胞血型不規則抗體的產生，指導臨床積極采取預防方案具有重要意義。

3.3 孕婦產前不規則抗體與非ABO-HDN母胎血型不合會引發HDN，由非ABO血型不合引發的HDN 為非ABO-HDN，患兒病情多較為嚴重，后遺癥、死亡風險較高[10]。本研究結果顯示，引發非ABO-HDN的主要不規則抗體類型為Rh 血型系統、MNS 血型系統及多血型混合。非ABO-HDN 發生機制為受孕婦M 抗體刺激影響，胎兒體內產生抗M抗體，IgG 經胎盤進入血液循環中，破壞紅細胞，引發溶血[11]。因此，臨床中應特別關注Rh 血型系統、MNS 血型系統及多血型混合相關不規則抗體，積極采取預防措施，預防非ABO-HDN的發生。另外，對于孕婦產前不規則抗體陽性者，應加強新生兒監測，一旦發現新生兒出生24h 內有黃疸表現，且呈現加重趨勢，應立即檢查血常規、膽紅素、網織紅細胞，明確是否發生非ABO-HDN，盡早治療，以免導致不良預后。

綜上所述，孕婦產前紅細胞血型不規則抗體主要涉及Rh 血型系統、MNS 血型系統，有經產史、妊娠史、輸血史的孕婦不規則抗體陽性檢出率更高。孕婦產前紅細胞血型不規則抗體陽性有引發非ABO-HDN的風險，應積極采取防治措施。