體外受精-胚胎移植中染色體多態性及年齡對妊娠、胚胎結局的影響

張 利，蘇 亮，朱鵬云，周艷朵 （廣東省湛江市湛江久和醫院，廣東湛江 524000）

近年輔助生殖技術發展迅速，體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術已廣泛用于治療不孕患者[1-3]。染色體多態性是指廣泛存在于正常人染色體中非病理性微小結構或者恒定著色強度的變異，通常在DNA 結構相對不活躍、含有高度重復的異染色質區，其中包括隨體區、Y 染色體長臂、著絲粒、次縊痕及端粒區，染色體多態性往往集中表現在上述區域中[4-7]。有大量的報告說明染色體的多態性對妊娠和胚胎的結局有相關性[8-12]，本文回顧性分析我院生殖醫學中心不孕患者的5 種染色體核型[即Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+]及臨床資料，探討染色體多態性及年齡對輔助生殖助孕妊娠與胚胎結局的影響。

1 對象和方法

1.1 研究對象

回顧性分析2019 年6 月至2020 年5 月在我院行IVF-ET 的夫妻資料。排除標準:患者男方年齡≥45 歲、男方精子為行睪丸或者附睪穿刺的患者，女方為多囊卵巢綜合征或者出現卵巢衰竭、異位妊娠、畸形的周期。納入標準:受孕女性年齡22～40 歲，已進行相關的治療前檢查身體條件符合IVF-ET 要求，最后獲得317 個IVF 周期。

1.2 方法

本研究將317 個周期按胚胎結局和妊娠結局進行分組分類；胚胎結局將正常妊娠著床的周期和無法妊娠著床的周期進行二項分類描述:活胎、流產；妊娠結局將正常產下胎兒的與流產、畸形等非正常生產的進行二項分類描述:妊娠、未孕。每個IVF-ET 夫妻雙方均收集染色體多態性資料以及年齡資料。

1.3 檢測指標

對男女染色體所有大于總體5%以，上的染色體多態性進行二項分類。由于男性46，XY 的染色體多態性每項均低于總體5%故本文本項實驗的男性染色體數據不作進一步統計分析。女性的有Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+的多態性大于總體的5%，本研究統計的Inv(9)核型是只包括了46，XX，Inv(9)(p12q13)核型。本文就此進行以下分析。

1.4 統計學處理

本研究應用R 語言4.0+RStudio1.2.1335 進行統計學分析，以胚胎結局和妊娠結局的二項數據分別作為因變量，年齡、Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+作為自變量進行廣義線性的Logistic 回歸分析，找出影響胚胎結局和妊娠結局的因素，在擬合回歸模型尋找線性回歸規律，所有回歸系數均進行對數轉換后方便分析閱讀。一般資料的分析檢驗:對計量數據先進行正態分布分析(QQ 圖)，兩組比較進行t檢驗；計數資料進行卡方檢驗。

2 結果

2.1 年齡數據

妊娠結局分組:妊娠組190 例，平均年齡(32.2±4.1)歲；未孕組127 例，平均年齡(32.8±4.6)歲，兩組的年齡差異無統計學意義(P＞0.05)。胚胎結局分組:活胎組123 例，平均年齡(32.1±4.3)歲；流產組194 例，平均年齡(32.6±4.4)歲，兩組的年齡差異亦無統計學意義(P＞0.05)。

2.2 染色體多態性二項資料匯總

在妊娠、未孕組，活胎、流產組染色體多態性的差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 妊娠、胚胎結局的染色體多態性分布資料

2.3 回歸分析

2.3.1 妊娠結局的回歸分析 以妊娠結局為因變量的Logistic 回歸分析結果顯示年齡、1qh+、9qh-、21pstk+均對妊娠結局有顯著影響(P＜0.01)；Inv(9)和22ps+對妊娠結局有明顯影響(P＜0.05)，見表2。

2.3.2 胚胎結局的回歸分析以胚胎結局為因變量的Logistic 回歸分析結果顯示年齡、21pstk+對胚胎結局有顯著影響(P＜0.01)，Inv(9)、1qh+和22ps+對胚胎結局有明顯影響(P＜0.05)，見表3。

表2 妊娠結局的Logistic 回歸分析

表3 胚胎結局的Logistic 回歸分析結果

2.4 回歸模型建立

年齡-妊娠結局的回歸模型建立:年齡間隔5 歲分段，也就是20～、25～、30～、35～、40～，根據年齡分段，其他因素固定的情況下，建立回歸模型計算prob預測值分別為0.938、0.909、0.867、0.810、0.735。

年齡-胚胎結局的回歸模型建立:年齡間隔5 歲分段，也就是20～、25～、30～、35～、40～，根據年齡分段，其他因素固定的情況下，建立回歸模型計算prob預測值分別為0.760、0.618、0.452、0.296、0.176。

3 討論

本研究在一般計數資料中顯示妊娠結局分組和胚胎結局分組分別對年齡作QQ 圖顯示數據呈正態分布，進行T 檢驗比較均無統計學意義，說明兩個分組的年齡分布良好，可以進行高級別的統計分析[13]。妊娠結局分組和胚胎結局分組的各染色體分類進行卡方檢驗顯示胚胎結局分組的P值為0.068，已接近0.05，說明兩者有一定的差異程度，只是尚未達到統計學意義而已，如Inv(9)和1qh+的染色體多態性胚胎結局中的活胎與流產數據差別較大，單獨比較有統計學差異，在這說明了Inv(9)和1qh+染色體多態性對于胚胎結局的影響較大，對妊娠結局影響不大。

本文研究顯示年齡、Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+染色體多態性均對妊娠、胚胎結局有顯著性的影響，呈正相關關系，年齡在妊娠、胚胎結局中均呈負相關，回歸系數分別為-0.085、-0.140，說明年齡每增加5 歲，成功妊娠的概率下降8.5%，懷孕后活胎的幾率下降13.97%。而Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+染色體多態性與妊娠、胚胎結局均呈正相關關系，其中在妊娠結局中有顯著性差異的是1qh+、9qh-、21pstk+，回歸系數分別是:2.202、2.517、2.598，說明在1qh+、9qh-、21pstk+分別提高1 倍的情況下成功妊娠的概率分別提高2.2 倍、2.5 倍、2.6 倍。在胚胎結局中有顯著性差異的是21pstk+，回歸系數為2.851，說明了在21pstk+分別提高1 倍的情況下成功妊娠的概率分別提高2.85 倍。如前所述年齡與妊娠、胚胎結局均呈負相關，本文根據年齡與妊娠、胚胎結局的相關關系建立回歸模型，按照年齡間隔5 歲分段來建立(也就是20、25、30、35、40 分段)，其中妊娠結局的回歸模型顯示:在固定其他變量的情況下年齡prob值分別為0.938、0.909、0.867、0.810、0.735，說明當年齡在20歲～時成功妊娠的幾率有93.8%，25 歲～時為86.7%，依次到40 歲時已降至73.5%，隨著年齡的增長，能成功著床妊娠的幾率逐漸下降。在胚胎結局的回歸模型中顯示:在固定其他變量的情況下年齡prob值分別為0.760、0.618、0.452、0.296、0.176，說明當年齡在20 歲時成功生產活胎的幾率為76.1%，25 歲時為61.8%，30 歲時為45.2%，35 歲時為29.6%，40 歲時僅為17.6%，隨著年齡的增長，能成功生產活胎的幾率逐漸下降。

綜上所述，在IVF-ET 中染色體多態性Inv(9)、1qh+、9qh-、21pstk+、22ps+與成功妊娠及成功生產活胎均有正相關，而年齡與其呈負相關。