上海地區(qū)健康成人甲狀腺自身抗體參考區(qū)間的建立*

吳玉梅,高永輝

華東療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，江蘇無(wú)錫 214065

抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)與抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPOAb)是自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)患者血清中常見(jiàn)的兩種抗體，與AITD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，也是AITD診斷與預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)[1]。研究表明，TGAb、TPOAb不僅在Graves病和橋本甲狀腺炎中陽(yáng)性率較高，還在健康人群中也有著較高陽(yáng)性率[2]。國(guó)內(nèi)目前關(guān)于TGAb、TPOAb生物水平參考區(qū)間建立的報(bào)道較少。本研究采用回顧性分析方法，按照中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)(CNAS)ISO15189相關(guān)準(zhǔn)則,以及實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)聯(lián)盟(IFCC)規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)[3],對(duì)來(lái)本院體檢的1 394例健康成人的血清TGAb、TPOAb結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以初步建立適合本院實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間，為臨床AITD的診斷提供可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1-12月在本院進(jìn)行體檢的健康成人1 394例，其中男779例，女615例；年齡22～75歲，平均(34.25±10.62)歲。研究對(duì)象在進(jìn)行體檢和實(shí)驗(yàn)室檢查后，參照《中國(guó)甲狀腺疾病診治指南》[4]，按以下標(biāo)準(zhǔn)納入本研究：無(wú)嚴(yán)重的心、肝、腎等重要臟器疾病史；無(wú)甲狀腺疾病手術(shù)史、個(gè)人史和家族史；無(wú)甲狀腺功能異常；甲狀腺超聲提示無(wú)結(jié)節(jié)及腫瘤，血清促甲狀腺激素(TSH)、游離三碘甲腺原氨酸(FT3)和游離甲狀腺素(FT4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)檢測(cè)結(jié)果均在正常范圍。

1.2儀器與試劑 儀器為雅培I4000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；TGAb、TPOAb檢測(cè)試劑盒、校準(zhǔn)品均購(gòu)自美國(guó)雅培公司；質(zhì)控品為英國(guó)朗道公司生產(chǎn)的免疫復(fù)合質(zhì)控品。

1.3方法 晨起空腹抽取研究對(duì)象靜脈血3～4 mL，室溫靜置30 min,置于低溫高速離心機(jī)以3 000 r/min離心10 min，分離血清后進(jìn)行檢測(cè)。每天質(zhì)控通過(guò)后，按照儀器和試劑說(shuō)明書的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程在4 h內(nèi)對(duì)TGAb、TPOAb進(jìn)行檢測(cè)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)。

1.4參考區(qū)間驗(yàn)證 根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 402-2012《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》[5]要求，對(duì)建立的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。選取2020年4-6月于本院進(jìn)行初次健康體檢的149例表觀健康者的血清標(biāo)本，用同樣的方法檢測(cè)血清TGAb、TPOAb水平，將結(jié)果與本研究建立的參考區(qū)間(以P2.5～P97.5表示)進(jìn)行比較，并計(jì)算R值(參考區(qū)間內(nèi)的標(biāo)本數(shù)/總標(biāo)本數(shù))，要求R>0.95。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS25.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將所有數(shù)據(jù)從小到大排列，以疑似離群點(diǎn)和其相鄰點(diǎn)的差值(D)與數(shù)據(jù)全距(R)的比值>1/3為離群值。用Shapiro-Wilk檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢測(cè)，偏態(tài)分布資料以M(P25，P75)表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1甲狀腺自身抗體的正態(tài)性檢驗(yàn) 1 394例健康成人的血清甲狀腺自身抗體結(jié)果經(jīng)Shapiro-Wilk檢驗(yàn)，男、女性均呈偏態(tài)分布。

2.2各年齡段男、女性血清TGAb、TPOAb水平比較 按≤30歲、>30～40歲、>40～50歲、>50～60歲、>60歲分別對(duì)男、女性進(jìn)行分組，各年齡段男性分別為96、312、244、108、19例，女性分別為173、256、142、39、5例。男性與女性各年齡段血清TGAb、TPOAb水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，女性血清TGAb、TPOAb水平均高于男性，見(jiàn)表1。

表1 各年齡段男、女性血清TGAb、TPOAb水平比較[M(P25～P75),IU/mL]

2.3男、女性血清TGAb、TPOAb參考區(qū)間 男、女性各自5個(gè)年齡段內(nèi)的血清TGAb、TPOAb水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=7.391、6.654、4.656、8.860，P>0.05)，因此，只需按性別建立參考區(qū)間。以95%CI(P2.5～P97.5)計(jì)算參考區(qū)間。健康成年男性的TGAb、TPOAb參考區(qū)間分別為0～6.09、0～3.68 IU/mL；健康成年女性的TGAb、TPOAb參考區(qū)間分別為0～10.59、0～14.33 IU/mL。

2.4參考區(qū)間的驗(yàn)證 納入18～63歲男性80例、18～65歲女性69例。其中血清TGAb水平在參考區(qū)間的人數(shù)為145例，R值為0.97，血清TPOAb水平在參考區(qū)間的人數(shù)為143例，R值為0.96，均驗(yàn)證通過(guò)。

3 討 論

橋本甲狀腺炎和Graves病是臨床上比較常見(jiàn)的甲狀腺自身免疫性疾病，涉及多種自身抗體異常，其中促甲狀腺素受體抗體(TRAb)、TGAb、TPOAb與其密切相關(guān)[6-7]?？贵w水平的變化，可作為橋本甲狀腺炎和Graves病的診斷及鑒別標(biāo)準(zhǔn)[8-9]。此外，有研究表明，甲狀腺自身抗體水平的升高與分化型甲狀腺癌的發(fā)生具有一定的相關(guān)性[10]。但有研究報(bào)道，無(wú)明顯甲狀腺疾病的健康人群中，TPOAb陽(yáng)性率達(dá)4.35%[11]，因此TPOAb參考區(qū)間、TGAb和(或)TPOAb抗體陽(yáng)性的界定對(duì)臨床甲狀腺疾病的診斷價(jià)值仍待討論。

目前大部分實(shí)驗(yàn)室使用的參考區(qū)間來(lái)自廠家的試劑說(shuō)明書，該參考區(qū)間通常是由廠家自己建立的，其選定的人群可能與實(shí)驗(yàn)室服務(wù)人群有一定差異[12]。因受地域、人群、種族不同的影響，參考區(qū)間也同樣存在著差異。此外，國(guó)際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)建議每個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室都要建立符合本地人群特征的參考區(qū)間，或至少能夠驗(yàn)證由其他途徑獲得的參考區(qū)間[13]。因此，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本地人群特征建立適合自己的參考區(qū)間，這對(duì)臨床精準(zhǔn)診斷具有重要的意義[14]。

本研究采用靈敏度高、檢測(cè)范圍廣的雅培I4000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對(duì)健康成人血清TGAb、TPOAb水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清TGAb、TPOAb水平呈偏態(tài)分布，女性血清TGAb、TPOAb水平高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這可能與雌激素水平的變化可刺激甲狀腺細(xì)胞上的受體有關(guān)[15]。另外，男、女性各自5個(gè)年齡段內(nèi)的血清TGAb、TPOAb水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究按照《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》規(guī)則[5]，以95%CI(P2.5～P97.5)計(jì)算男女的參考區(qū)間。健康成年男性的TGAb、TPOAb參考區(qū)間分別為0～6.09、0～3.68 IU/mL；健康成年女性的TGAb、TPOAb參考區(qū)間分別為0～10.59、0～14.33 IU/mL。與試劑說(shuō)明書提供的歐美人群的TGAb(0～4.11 IU/mL)、TPOAb(0～5.61 IU/mL)參考區(qū)間比較，除男性的TPOAb參考區(qū)間縮小外，其余參考區(qū)間均變大，因此，若繼續(xù)沿用廠家的參考區(qū)間可能會(huì)造成過(guò)高的假陽(yáng)性率。

綜上所述，建立適合本實(shí)驗(yàn)室人群的血清TGAb、TPOAb參考區(qū)間，能夠更好地為臨床診斷提供可靠依據(jù)。但本研究仍有不足之處：研究對(duì)象主要是來(lái)本單位健康體檢的人群，研究結(jié)果不能完全代表一般人群；入選者人數(shù)較少，可能會(huì)給結(jié)果帶來(lái)偏倚。此外，國(guó)內(nèi)同類研究結(jié)果較少，缺少與其他結(jié)果的比較。