戴小華,鄧 茹,邢娟娟,郭光華
(南昌大學第一附屬醫院燒傷科,南昌 330006)
在燒傷患者中,感染是常見且嚴重的并發癥[1-2],是導致患者死亡的主要因素。而感染在早期無明顯臨床癥狀,不易被發現,因而得不到及時治療。本研究探討外周血細胞表面CD64與HLA-DR指數聯合應用對早期預警燒傷感染的臨床價值。
選取2017年6—12月南昌大學第一附屬醫院收治的燒傷患者76例為觀察組,所有患者均為燒傷后24 h內入住本院燒傷科,其中,火焰燒傷22例、熱液燒傷37例、電燒傷11例、其他不明原因燒傷6例;燒傷面積≥30% 9例、10%~29% 18例、<10% 49例。選取同期來本院進行健康體檢人員76例為對照組[納入標準:無發熱、外周血白細胞(WBC)計數和肝腎功能正常]。2組性別、年齡和生化檢查等比較差異無統計學意義(P>0.05),見表1。

表1 2組一般資料比較
燒傷患者于入院后24 h內抽取抗凝靜脈血2 mL,健康體檢者樣本篩選來自本院檢驗科。應用美國BD FACSCantoTM Ⅱ流式細胞儀檢測外周血細胞表面CD64和HLA-DR指數水平。使用的主要試劑包括CD64-FITC、HLA-DR-APC和CD45-PerCP等,均來自美國BD公司。按照檢測要求制備流式樣本,每個樣本獲取20 000個細胞,用BD ACSDive軟件進行分析,以CD45/SSC設門確定淋巴細胞(Lym)、中性粒細胞(PMN)和單核細胞(MO)門,獲取細胞表面CD64和HLA-DR平均熒光強度,見封四圖1。
比較2組外周血細胞表面CD64指數、HLA-DR指數和WBC計數。
1)CD64指數=(PMN CD64平均熒光強度/Lym CD64平均熒光強度)/(MO CD64平均熒光強度/PMN CD64平均熒光強度),其中,以MO作為內部陽性對照,以Lym作為內部陰性對照。
2)HLA-DR指數=MO HLA-DR平均熒光強度/PMN HLA-DR平均熒光強度。
觀察組CD64指數和WBC計數明顯高于對照組(均P<0.05);觀察組HLA-DR指數明顯低于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 2組CD64指數、HLA-DR指數和WBC計數比較
燒傷面積≥30%的患者CD64指數和WBC計數高于、HLA-DR指數低于其他燒傷面積患者及對照組(均P<0.05);燒傷面積為10%~29%的患者CD64指數高于、HLA-DR指數低于燒傷面積<10%的患者及對照組(均P<0.05),但燒傷面積為10%~29%和<10%的患者間WBC計數比較差異無統計學意義(P>0.05);燒傷面積<10%的患者CD64指數高于、HLA-DR指數低于對照組(均P<0.05)。見表3。

表3 不同燒傷面積患者CD64指數、HLA-DR指數和WBC計數比較
燒傷患者因創面暴露等原因,易引發感染,故感染是燒傷患者最常見的并發癥,也是引發燒傷患者死亡的主要原因之一。目前臨床常用細菌培養,WBC計數等手段來診斷感染,但存在一定的時效性差、陽性率低、特異性不高等因素,影響患者早期診斷和及時治療,因此感染的早期診斷對指導臨床治療顯得十分重要。近年來有應用流式細胞術檢測細胞表面CD64或HLA-DR指數在早期診斷感染的報道[3-7],但聯合檢測細胞表面CD64和HLA-DR指數來早期診斷感染的報道甚少。本研究發現在燒傷感染的早期不僅有PMN表面CD64表達升高,同時有MO表面HLA-DR的降低,提示細胞表面CD64和HLA-DR指數水平可作為燒傷早期感染的靈敏指標。
CD64表達于MO、巨噬細胞、血液及樹突狀細胞的生發中心,屬于免疫球蛋白超家族。CD64的表達由細胞因子調控,作為細胞免疫和體液免疫之間聯系的橋梁[8],可以調節某些細胞釋放細胞因子及活性氧中間體等殺菌物資。在正常情況下CD64呈低表達狀態,當機體發生感染時,細胞表面CD64表達升高,常在臨床癥狀出現之前就能檢測到CD64升高,特別是在PMN表面CD64在感染后3~6 h即可上升(其mRNA的上升發生于感染后1~3 h)[9]。CD64被認為是PMN活化的標志物之一,可作為感染性疾病早期良好的診斷指標[10-11]。HLA-DR表達于B淋巴細胞、MO、巨噬細胞和活化T淋巴細胞,是抗原遞呈細胞向T細胞遞呈抗原時所必須的一個蛋白。當感染發生時,細胞表面的HLA-DR表達降低,從而抑制抗原遞呈,抑制免疫應答,導致免疫功能低下[12]。
本研究結果顯示,觀察組細胞表面CD64指數和WBC計數明顯高于、HLA-DR指數明顯低于對照組;CD64指數隨燒傷面積增大而相對升高,HLA-DR指數隨燒傷面積增大而相對降低,說明CD64和HLA-DR指數水平變化與燒傷面積存在相關性。燒傷面積≥30%和燒傷面積為10%~29%的患者WBC計數雖然高于對照組,但由于受患者基礎WBC水平和應激反應影響,WBC計數對燒傷感染的早期診斷不及CD64和HLA-DR指數靈敏。因此,細胞表面CD64和HLA-DR指數的聯合應用對于燒傷患者早期感染有著預警作用。
綜上所述,在燒傷患者出現感染的早期,細胞表面CD64指數會升高,同時HLA-DR指數會降低,二者聯合應用,其時效性和靈敏度明顯優于傳統檢查,可作為燒傷早期感染的預警指標,為給予患者及時治療提供依據。但CD64和HLA-DR指數變化與燒傷深度的相關性有待進一步研究。