蘿卜中17種農(nóng)藥的QuECHERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定法

馬婧妤，劉莉，虞冰

(金華市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心，浙江 金華 321017)

蘿卜(RaphanussativusL.)，屬于十字花科蘿卜屬二年或一年生草本植物，在世界各地廣泛種植，在我國也有悠久的栽培歷史。蘿卜富含多種微量元素、碳水化合物、蛋白質(zhì)、纖維素等多種營養(yǎng)成分，具有較高的藥食兩用的價(jià)值，在中國民間素有“小人參”的美稱，其鮮根、枯根、葉子、種子皆可入藥，蘿卜根可作蔬菜食用[1-2]。據(jù)農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì)，我國蘿卜種植面積為120萬 hm2左右[3]，總產(chǎn)量已達(dá)4 000萬 t，已成為我國第二大蔬菜作物。浙江在全省范圍內(nèi)廣泛種植蘿卜，金華地區(qū)的金華北山蘿卜、蘭溪小蘿卜更是遠(yuǎn)近聞名[4-5]。

近年來，蔬菜質(zhì)量安全問題時(shí)有發(fā)生，農(nóng)藥殘留作為衡量食品安全水平的重要指標(biāo)，是全社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)。農(nóng)藥的用量或使用不當(dāng)，都會(huì)威脅人體健康[6]。在蘿卜種植中會(huì)使用很多種類的農(nóng)藥，這些農(nóng)藥往往會(huì)帶來食品質(zhì)量安全問題。為控制農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留，必須對農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析檢測。QuEChERS是Quick(快速)、Easy(簡單)、Cheap(便宜)、Effective(有效)、Rugged(可靠)和Safe(安全)的縮寫，依托氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜已廣泛應(yīng)用于果蔬農(nóng)藥殘留檢測[7-10]。本文以金華農(nóng)產(chǎn)品企業(yè)生產(chǎn)的蘿卜為研究對象，建立17種農(nóng)藥的QuECHERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定法。該方法簡單快速，且靈敏度較高，滿足農(nóng)藥殘留檢測的限量要求，能及時(shí)、快速、準(zhǔn)確完成分析檢測，適用于金華蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測，保護(hù)人民身體健康不受農(nóng)藥殘留侵害。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

7890B-7000C氣相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀(配備自動(dòng)進(jìn)樣器和電子轟擊電離源，美國Agilent公司)、Mixer B-400均質(zhì)儀(瑞士BUCHI公司)、高速離心機(jī)(日本日立公司)、渦旋振蕩器(德國IKA公司)、調(diào)速多用振蕩器(金壇盛藍(lán))、BSA2202S電子天平(德國賽多利斯)。

四氯硝基苯、氯苯胺靈、異惡草酮、撲滅津、西瑪津、抗蚜威、艾試劑、甲基立枯磷、撲草凈、禾草丹、嘧菌環(huán)胺、毒蟲畏、戊菌唑、乙嘧酚磺酸酯、苯霜靈、溴螨酯和氯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(均為液體標(biāo)準(zhǔn)品，濃度為100 μg·mL-1，天津思億浩遠(yuǎn)科技有限公司)；乙酸乙酯、乙腈(色譜級，國藥集團(tuán))；萃取包5982-5650CH(帶陶瓷均質(zhì)子，含50 mL離心管和鹽包，50/PK)；5982-5056(內(nèi)含900 mg硫酸鎂、150 mg PSA)；實(shí)驗(yàn)室用水為超純水。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

取17種標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥物質(zhì)各1.0 mL分別加入到10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至10 mL，配制成質(zhì)量濃度均為10 ug·mL-1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，-18 ℃避光冷藏保存。依據(jù)需要，再用乙酸乙酯梯度稀釋成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.3 檢測條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：Agilent VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱(30 m×250 μm，0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；載氣：高純He(純度≥99.999%)；流速：1.2 mL·min-1；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；升溫程序：40 ℃保持1 min，以40 ℃·min-1升溫至120 ℃，再以5 ℃·min-1升溫至240 ℃，以12 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持6 min。

1.3.2 質(zhì)譜條件

載氣：高純氦氣(純度≥99.999%)；碰撞氣：高純氮?dú)?純度≥99.999%)；離子源：電子轟擊源(EI)；電離能量：70 eV；傳輸線溫度：280 ℃；離子源溫度：280 ℃；檢測方式多反應(yīng)離子監(jiān)測MRM模式。

1.4 樣品前處理

稱取10.0 g蘿卜樣品于50 mL離心管中，加入10 mL乙腈，混勻1 min，然后加入1.0 g氯化鈉、4.0 g無水硫酸鎂、1.0 g檸檬酸鈉和0.5 g檸檬酸氫二鈉，放入1顆陶瓷均質(zhì)子進(jìn)行劇烈震蕩1 min，以5 000 r·min-10 ℃離心5 min。取15 mL離心管，加入900 mg硫酸鎂及150 mg PSA，再準(zhǔn)確吸取6 mL離心后的上清液加入，渦旋混勻1 min。在4 ℃低溫條件下，以5 000 r·min-1離心5 min，準(zhǔn)確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴中氮吹至近干。加入1 mL乙酸乙酯復(fù)溶，混勻，過0.22 μm微孔濾膜，用于氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 總離子色譜圖

對單一物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)樣液進(jìn)行全掃描，分別確定17種農(nóng)藥的保留時(shí)間，找出其母離子。然后將母離子進(jìn)行碎片離子掃描，得到對應(yīng)的碎片離子。實(shí)驗(yàn)中分別選取每種農(nóng)藥的1對定量離子和1對定性離子，通過2對碎片離子結(jié)合17種農(nóng)藥的保留時(shí)間排除假陽性樣品，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。17種農(nóng)藥的質(zhì)譜參數(shù)見表1。17種農(nóng)藥的總離子流圖見圖1。由圖可見，蘿卜的化學(xué)成分對本方法的農(nóng)藥殘留分析基本沒有影響，17種農(nóng)藥均有較好的分離，且峰型較好，因此，該實(shí)驗(yàn)方法可準(zhǔn)確定性、定量。

表1 17種農(nóng)藥的質(zhì)譜參數(shù)

1—四氯硝基苯;2—氯苯胺靈;3—異惡草酮;4—撲滅津;5—西瑪津;6—抗蚜威;7—艾試劑;8—甲基立枯磷;9—撲草凈;10—禾草丹11—嘧菌環(huán)胺;12—毒蟲畏;13—戊菌唑;14—乙嘧酚磺酸酯;15—苯霜靈;16—溴螨酯;17—氯菊酯。

2.2 線性范圍與靈敏度

取農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成質(zhì)量濃度0.005、0.01、0.05、0.1、0.5 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。按照色譜條件對混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液系列進(jìn)行測定，以各農(nóng)藥的質(zhì)量濃度與相應(yīng)的峰面積繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，在0.005～0.5 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(R2)在0.995 4～0.999 8，以定量離子對的3倍信噪比確定方法的檢出限為0.29～1.97 μg·kg-1，17種農(nóng)藥的R2和檢出限見表2。

表2 17種線性回歸方程、R2和檢出限

2.3 方法的回收率與精密度

按照1.4節(jié)方法處理樣品，分別加入40和400 μg·kg-1的混合標(biāo)準(zhǔn)品于蘿卜樣品中做回收率測試，每個(gè)濃度操作6個(gè)平行試驗(yàn)，結(jié)果如表3所示。蘿卜中農(nóng)藥的測定回收率在74%～107%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<7%。

表3 蘿卜中17種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)測定回收率和相對偏差

3 小結(jié)與討論

本實(shí)驗(yàn)采用QuECHERS方法結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對蘿卜樣品進(jìn)行提取、凈化和檢測。結(jié)果顯示17種農(nóng)藥在質(zhì)量濃度為0.005～0.5 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好，R2在0.995 4～0.999 8，檢出限為0.29～1.97 μg·kg-1，加標(biāo)回收率在74%～107%，RSD<7%。該方法操作快速、方便、準(zhǔn)確性好、重現(xiàn)性高，蔬菜本身差異對結(jié)果影響并不大，適用于上述17種農(nóng)藥殘留的定性定量檢測。