飼料中添加杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉生長(zhǎng)體色及抗氧化能力的影響

張寶龍，趙子續(xù)，曲 木，唐子鵬，翟勝利

（天津現(xiàn)代晨輝科技集團(tuán)有限公司，天津市水族動(dòng)物功能性飼料企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 301800）

杜氏鹽藻屬綠藻門（Chotorrhyta），綠藻綱（Chorophyta），團(tuán)藻目（Volvocales），鹽藻科（Dunazeiallcea），嗜鹽，常見(jiàn)于海鹽田中。水體有時(shí)會(huì)因鹽藻的大量聚集而呈艷麗的粉紅色或紅色，因此，鹽藻又有了“粉紅湖”的稱號(hào)。鹽藻中蛋白質(zhì)含量較高，其成分中必需氨基酸的含量占總氨基酸的37.20%，不飽和脂肪酸占總脂肪酸的50%以上，還含有多種維生素、甘油、多糖、膳食纖維、萜類物質(zhì)、無(wú)機(jī)元素、微量元素等[1-3]，其所富含的β-胡蘿卜素能促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物體色提升，尤其是促進(jìn)增紅，這可以很大程度地提升一些水產(chǎn)動(dòng)物的觀賞性，提高其商業(yè)價(jià)值，同時(shí)β-胡蘿卜素也是一種天然的抗氧化劑[4]，對(duì)提升動(dòng)物體免疫力有著極大的促進(jìn)作用。目前鹽藻作為國(guó)際上公認(rèn)的天然β-胡蘿卜素來(lái)源，是水生動(dòng)物的重要飼料添加劑之一。

錦鯉為觀賞魚的重要品類之一，因其體色絢麗、泳姿優(yōu)美成為人們居家裝飾的常備選擇，也有人稱其為風(fēng)水魚，其銷量也是逐年升高。隨著市場(chǎng)需求的加大，各種錦鯉集約化的養(yǎng)殖模式（工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖模式、集裝箱循環(huán)水養(yǎng)殖模式等）也應(yīng)運(yùn)而生，但集約化程度的加大也會(huì)導(dǎo)致錦鯉出現(xiàn)體色退化、疾病頻發(fā)等情況，造成錦鯉商業(yè)價(jià)值大幅降低[5]。本試驗(yàn)以紅白錦鯉為養(yǎng)殖對(duì)象，在飼料中添加不同水平的杜氏鹽藻，并測(cè)定相關(guān)生理生化指標(biāo)，以期篩選出錦鯉飼料中適宜的杜氏鹽藻添加量，為生產(chǎn)實(shí)踐提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚及養(yǎng)殖管理

本試驗(yàn)以紅白錦鯉（購(gòu)自天津魚之悅觀賞魚養(yǎng)殖專業(yè)合作社）作為試驗(yàn)對(duì)象，試驗(yàn)在公司循環(huán)水實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，箱體有效體積150 L。試驗(yàn)所用錦鯉共計(jì)540尾，魚體經(jīng)消毒后暫養(yǎng)7 d，暫養(yǎng)結(jié)束后將其隨機(jī)分成6 組，每個(gè)組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚。每天8時(shí)和17時(shí)進(jìn)行投喂，投喂量為體質(zhì)量的3%～4%（視試驗(yàn)魚吃食及體質(zhì)量增長(zhǎng)情況調(diào)整），養(yǎng)殖周期為8周。

1.2 試驗(yàn)飼料設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)在錦鯉基礎(chǔ)飼料（粗蛋白含量32.77%）中添加杜氏鹽藻粉，添加梯度分別為0 g/kg、4 g/kg、8 g/kg、16 g/kg、32 g/kg、64 g/kg，分別標(biāo)記為Diet 1，Diet 2、Diet 3、Diet 4、Diet 5、Diet 6，用環(huán)模制粒機(jī)制成粒徑為2.5 mm 的顆粒飼料，陰涼處風(fēng)干待用。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)

試驗(yàn)所測(cè)生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

式中：Wt為終末體質(zhì)量（g）；W0為初始體質(zhì)量（g）；t為試驗(yàn)天數(shù)（d）；F為飼料攝入量干質(zhì)量（g）。

1.3.2 體色指標(biāo)

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，從每個(gè)平行中隨機(jī)挑選5條魚，用色差儀（CR-400）測(cè)定其體表紅斑處L*值、a*值、b*值。

1.3.3 抗氧化指標(biāo)

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，從每個(gè)平行中隨機(jī)挑選9 條魚，用2 mL 無(wú)菌注射器尾靜脈抽血，每3 條魚的血液混成一個(gè)樣本，4℃靜置8 h 后，用轉(zhuǎn)建為4 000 r/min 離心機(jī)離心10 min，取上清制成血清樣本。抽血后低溫條件下解剖，取肝胰臟及腎臟將其剪碎，按組織：0.85%生理鹽水=1∶9 的比例勻漿，用轉(zhuǎn)建為4 000 r/min 離心機(jī)離心10 min，取上清制成10%組織勻漿液。試驗(yàn)中T-SOD、CAT、MDA 指標(biāo)測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物科技研究所。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA）檢驗(yàn)各試驗(yàn)組間差異顯著性，若差異達(dá)到顯著水平（P＜0.05），則進(jìn)行Duncan 氏法多重比較分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉生長(zhǎng)性能的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，紅白錦鯉的增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率隨著杜氏鹽藻添加量增加均呈上升趨勢(shì)，64 g/kg 添加組最高，與16 g/kg、32 g/kg 添加組無(wú)顯著差異（P＞0.05）；餌料系數(shù)在32 g/kg 組最低，與16 g/kg、64 g/kg 添加組無(wú)顯著差異（P＞0.05），但顯著低于其他各組（P＜0.05）。

表1 飼料中添加杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉生長(zhǎng)性能的影響Tab.1 Effects of Dunaliella salina on growth performance of Cyprinus carpio

2.2 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉體色的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明：錦鯉體表L*值隨杜氏鹽藻含量的上升呈下降趨勢(shì)，而a*值、b*值有上升趨勢(shì)。L*的最低值及a*、b*的最高值均出現(xiàn)在64 g/kg 添加組，且均與0 g/kg 添加組差異顯著（P＜0.05）。

表2 飼料中添加杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉體色的影響Tab.2 Effects of Dunaliella salina on body color of Cyprinus carpio

2.3 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉抗氧化能力的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)飼料中杜氏鹽藻添加量超過(guò)32 g/kg時(shí)，紅白錦鯉血清及組織中T-SOD 活性得到顯著提升（P＜0.05），32 g/kg和64 g/kg添加組顯著高于其他各組（P＜0.05）。

表3 飼料中添加杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉T-SOD活性的影響Tab.3 Effects of Dunaliella salina on T-SOD activity of Cyprinus carpio（組織：U/mgprot；血清：U/mL）

試驗(yàn)結(jié)果表明，紅白錦鯉血清及組織中CAT 活性隨杜氏鹽藻添加量升高而上升，其中32 g/kg 及64 g/kg 添加組肝胰臟、腎臟中CAT 活性顯著高于其他組（P＜0.05），血清中CAT活性在32 g/kg組最高，且顯著高于其他各組（P＜0.05）。

表4 飼料中添加杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉CAT活性的影響Tab.4 Effects of Dunaliella salina on CAT activity of Cyprinus carpio（組織：U/mgprot；血清：U/mL）

試驗(yàn)結(jié)果表明，紅白錦鯉血清及組織中MDA 活性隨杜氏鹽藻添加量升高而降低，其中32 g/kg及64 g/kg添加組肝胰臟、腎臟中CAT 活性顯著低于其他組（P＜0.05），血清中MDA活性在32 g/kg組最低，且顯著低于其他各組（P＜0.05）。

表5 飼料中添加雨生紅球藻對(duì)紅白錦鯉MDA含量的影響Tab.5 Effects of adding Haematococcus pluvialis to feed on MDA content of Cyprinus carpio（組織：U/mgprot；血清：U/mL）

3 討論

3.1 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)中，當(dāng)飼料中杜氏鹽藻添加量為32～64 g/kg時(shí)，紅白錦鯉增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率最高，且在該組餌料系數(shù)顯著降低。方珍珍等的研究表明，鹽藻對(duì)紅白錦鯉的生長(zhǎng)具有明顯促進(jìn)作用，其適宜添加量為0.04%，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致且添加量也在同一水平。而楊育凱等在卵形鯧鲹、崔培在非洲王子魚中的研究結(jié)果相反，他們認(rèn)為鹽藻的添加不能促進(jìn)養(yǎng)殖對(duì)象的生長(zhǎng)性能，這可能與生物種類及飼料配方有關(guān)。

3.2 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉體色的影響

目前，在飼料中添加色素被認(rèn)為是改善養(yǎng)殖動(dòng)物體色的最安全且有效的手段之一。本試驗(yàn)中，杜氏鹽藻添加量為64 g/kg 時(shí)，紅白錦鯉體表紅斑處紅度值最高，表明杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉體色有顯著的促進(jìn)作用，而楊育凱等研究也發(fā)現(xiàn)，在卵形鯧鲹飼料中添加1%～1.6%的鹽藻可顯著提升其體色。相同的結(jié)果也見(jiàn)于錦鯉、金魚和血鸚鵡的研究中。另外，在方珍珍等對(duì)紅白錦鯉的體色研究中發(fā)現(xiàn)添加鹽藻的著色效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于添加辣椒粉和使用溫度控制的方法，可能是因?yàn)辂}藻中含有較多的β-胡蘿卜素，更易被紅白錦鯉吸收和在體內(nèi)沉積。

3.3 杜氏鹽藻對(duì)紅白錦鯉抗氧化能力的影響

魚體體質(zhì)是否健康會(huì)直接影響其體色及其商業(yè)價(jià)值，諸如營(yíng)養(yǎng)不良或投飼量過(guò)低便會(huì)出現(xiàn)頭大身子瘦小的情況，魚體有寄生蟲(chóng)也會(huì)導(dǎo)致其體表暗淡無(wú)光，因此飼料研發(fā)過(guò)程中，在追求好的體色的同時(shí)，也應(yīng)注重其機(jī)體健康狀況。本試驗(yàn)中，測(cè)定了紅白錦鯉血清、肝胰臟及腎臟中抗氧化指標(biāo)的變化情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)32 g/kg的鹽藻添加量可顯著促進(jìn)其抗氧化能力的提升。相同的試驗(yàn)結(jié)果也見(jiàn)于白東清等在紅草金魚、陳錢在黃顙魚的研究中。

4 結(jié)語(yǔ)

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，杜氏鹽藻添加量為32 g/kg、64 g/kg 時(shí)，紅白錦鯉表現(xiàn)出較高的增長(zhǎng)率，且餌料系數(shù)較低，體色尤其是紅、黃2 個(gè)色度值得到顯著提升，該2 組紅白錦鯉抗氧化指標(biāo)較優(yōu)，在本試驗(yàn)條件下，紅白錦鯉飼料中杜氏鹽藻的建議添加量為32～64 g/kg。