乙腦傳播媒介蚊蟲調查及其病原檢測結果分析

王銳

黑龍江省疾病預防控制中心職業健康科，黑龍江哈爾濱 150030

乙腦是一種中樞神經系統的急性傳染病，病死率較高，后遺癥嚴重。 結合既往乙腦流行病學調查資料及和本病傳播媒介相關的試驗結果，已證明蚊蟲是本病的主要傳播媒介[1]。 該研究中城市當地環境氣候為蚊蟲的生長提供了非常好的孳生條件，因此蚊蟲非常多且危害嚴重。 這些年該地不斷出現散在的乙型腦炎病例發生，一般集中在7～8 月這兩個月，而乙腦最主要的一個傳播媒介就是蚊蟲，在其傳播途徑方面有著非常重要的使用。 當下，臨床針對乙腦尚未研發特效治療方法，多以疫苗預防為主。在我國乙腦有分布廣泛、危害性大等諸多特征，受到研究人員的廣泛關注[2]。 蚊蟲的季節改變與區域性分布差異偏大，為更全面了解蚊蟲類型及生活習性，為疾病防治工作提供更可靠憑據， 于2017 年8月10～13 日對本地蚊蟲進行監測，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料收集

①選用市面上銷售的蚊帳，其由35 目棉紗布制得，帳頂呈長方形，面積為145 cm×125 cm，豎直高度為150 cm，帳底為200 cm。 ②誘蚊燈:選用“功夫小帥”吸入式誘蚊燈。 ③其他收集工具：液氮罐、試管、解剖針以及手電筒等。

1.2 方法

依照該地區不同生態環境特征，擬定在乙腦發病率較高的地點創設監測位點。設定的監測時間為2017 年8 月10～13 日，每天15:30-22:30。 ①人帳法:在每個監測點懸掛蚊帳1 頂，穩固四個邊角，促使帳下界距離地面20～30 cm，1 人站在帳內，利用電動吸蚊器吸取到帳蚊蟲，將每小時持續30 min 為1 個時間單位（只/帳）；②燈誘法：把誘蚊燈懸掛在各監測點距離地面0.8～1.5 m，每次開燈誘捕4～6 h（只/燈）。③收集者手拿電動吸蚊器于住戶人居住房、豬圈、牛棚、禽舍捕捉蚊蟲，將30 min/h設為1 時間單位（只/人工小時）。

采用以上方法開展捕獲活動，均要遵循定時、定點、定人的原則，針對捕獲后的蚊蟲將其安置在-20℃冰柜冷凍45 min 以后，提取蚊蟲后，劃分類型、計算數目及登記，繼而依照捕獲位點、時間分別裝在指管內，錄入編號信息，把雌性蚊蟲安置于液氮罐內帶回到實驗室分離病毒，并錄入當天溫濕度、風速等氣候因素。

流行性乙型腦炎的傳播途徑為病人，中間宿主家畜、家禽，通過媒介（蚊）傳播。 該實驗使用美國novabios日本乙腦病毒IgM 抗體Elisa 檢測試劑盒，對乙腦IgM抗體進行檢測，相關操作依照說明書上的內容進行。注意要點：

①試劑盒在2～8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。 滴瓶每次用后要將蓋擰緊，各瓶蓋之間不可混用。 各試劑盒之間不可混用。

②為提高試驗的可比性建議使用儀器判讀結果，并設陰性對照測為復孔以減少誤差。

所有流行病學調查者均接受過相關培訓，工作人員接受了乙腦抗體檢測工作知識盲樣考核，上級部門對于抗體檢測陽性案例進行復核，同時對于10.00%陰性案例實施抽樣復核，復核率為100.00%

2 結果

2.1 蚊蟲類型與構成

使用上述方法于城區、稻田、畜禽舍、住戶4 種生態環境中共計捕獲4 500 只成蚊（4 屬6 種）。優勢蚊種是三帶喙庫蚊、淡色庫蚊，在總數中所占比例依次是79.51%（3 578/4 500）、15.96%（7 18/4 500），其他蚊種所占比例為4.53%（204/4 500）。對由不同生態環境內捕獲的蚊蟲數目去分析，畜禽舍的數量最多，在捕獲總數中所占比例為57.93%（2 607/4 500），稻田與城區其次，依次占18.80%（846/4 500）、14.76%（664/4 500），住戶最少，為8.51%（383/4 500）。 見表1。

表1 蚊蟲類型及構成統計結果

2.2 不同蚊種的叮刺高峰

從該地氣象部門獲知，研究期間氣溫維持在28～32℃之間，相對濕度為70%～85%，風速為0.2～0.6 m/s，天氣均是晴到少云。 在該種環境條件下，三帶喙庫蚊與淡色庫蚊在叮刺活動中起主要作用，其對應的活動曲線和生態環境內整個蚊蟲活動曲線較統一。農村稻田與畜禽舍等內捕獲的三帶喙庫蚊數目繁多，兩者總和占所獲得的三帶喙庫蚊樣本總量中所占比例為91.1%，他類生態環境所占比例為8.8%。 城區內蚊蟲類型以淡色庫蚊為主，在捕獲淡色庫蚊總量中所占比率為53.7%， 其他生態環境總和占46.9%。 兩種優勢蚊蟲的叮刺高峰通常是在日落后的1～1.5 h，持續時間大概為30 min，和三帶喙庫蚊相比較，淡色庫蚊延遲時間為20 min，即三帶喙庫蚊叮刺高峰大概是在19:10-19:40, 淡色庫蚊約為19:30-20:20，在以上過程中捕獲的三帶喙庫蚊、淡色庫蚊數目依次是2245 只、395 只，在所捕獲這兩種蚊蟲總量中所占比例依次為51.7%、40.3%，他類時間總計依次占47.5%、58.1%。

2.3 不同捕獲法的雌雄蟲所占比例

不同方在相同時間、相同生態環境內采用不同方法捕獲的蚊蟲數目與雌雄蟲所占比例存在差異性。人工小時捕獲量所占比例為58.09%（2 614/4 500），人帳法所占比例為29.93%（1 347/4 500），燈誘法為11.98%（539/4 500），人工小時捕獲量明顯高于其他兩種方法（χ2=5.264，P=0.026）。3 種方法獲得蚊蟲以雌性居多。

3 討論

乙腦的病原體于1934 年在日本被發現，故而被命名為日本乙型腦炎，1939 年我國也分離出乙腦病毒，后續幾年中進行了大批量調查研究工作，將其該名成流行性乙型腦炎[2]。 亞洲遠東與東南亞是乙腦的主要分布區域，蚊蟲是主要的傳播驅動，夏、秋季是高發節氣，臨床上起病急促，臨床癥狀表現有高熱、意識障礙、驚厥、強直性痙攣以及腦膜刺激征等為主，病情嚴重者通常會殘留后遺癥[3-5]。

現階段，由自然環境中可以分離到的乙腦病毒的蚊種偏多，以中華按蚊、帕氏按蚊、三帶喙庫蚊、淡色庫蚊以及致倦庫蚊等較為常見[6]。 從地理分布、季節消長、嗜血性及對乙腦病毒易感性等方面作出分析，發現三帶喙庫蚊乙腦病毒的主要傳播媒介，其分布于我國各個地區，是一種常見的蚊種。現有調研資料表明，在國內的很多地區中，三帶喙庫蚊的種群數目偏多。

針對蚊蟲晝夜叮刺高峰時段影響的研究工作，最近幾年中陸續開展，環境因素對其形成的影響是顯而易見的。既往有開展環境氣象因素對蚊蟲誘捕獲數目兩者相關性的研究，發現溫度和光照度兩者之間存在正相關性，提示伴隨溫度與觀照度的提升， 蚊蟲的活動更為活躍，此時捕獲的蚊蟲數目也相應增多。 對該次結果進行分析， 發現光照度與蚊蟲的叮刺活動之間存在相關性，蚊蟲數目與叮刺高峰產生都出現在日落后1～1.5 h，此時段光照度偏弱。相對濕度與風速對蚊蟲晝夜誘捕數目是負相關性，意味著隨著相對濕度增高與風速增大，將會對蚊蟲正常活動形成一定影響[7-8]。

對不同方法誘捕的蚊蟲類型與數目指標進行分析，該研究中人工小時捕獲量所占比例為58.09%，人帳法所占比例為29.93%，燈誘法為11.98%。3 種方法獲得蚊蟲以雌性居多。對以上數據加以分析，不難發現，人工小時法與人帳法采獲的蚊蟲類型與數目偏多（P＜0.01），而利用燈誘法捕獲的蚊蟲數目偏少，這可能是因為在野外環境中，捕蚊形式、時間以及誘捕范疇等因素影響其應用效果，這也預示著該種捕獲法難以滿足采集目標要求[9]。 正因如此，在監測蚊蟲類型與數目過程中，推薦采用人工小時法與人賬法進行，燈誘法發揮輔助作用。 對捕到的蚊蟲以雌性居多的現狀加以分析，我們可以推測雌蚊是主動入帳吸血, 而大部分雄蚊則棲息在草叢、林間或孳生地周圍,故而其屬于被動進網。

根據不同生態環境內捕獲的蚊蟲數目去分析，畜禽舍的數量最多，在捕獲總數中所占比例為57.93%，稻田與城區其次，依次占18.80%、14.76%，住戶最少，為8.51%。對乙腦傳播媒介蚊蟲的監測結果加以分析，顯而易見畜禽舍和稻田的數量最多，兩者總計在蚊蟲樣本總量中所占比例高于76.00%，這主要是因為在我國廣大農村地區，牲畜、雞禽類的養殖方式以圈養為主，并且和養殖戶的住所相鄰近，這就導致了傳染源（牲畜、家禽）→傳播媒介（蚊蟲）→易感人群（以兒童為主）的惡性循環。三帶喙庫蚊是我國大部分農村地區絕對優勢蚊種，在傳播乙腦病毒方面發揮重要作用。

預防乙腦的關鍵一環是消除傳染源，切斷傳播渠道，加大對病患的管理力度，實現對易感人員的有效管理。同時，也應落實家畜、家禽等的管理工作，針對豬圈、馬廄周邊的蚊蟲孳生，應定期予以藥物處理，應將未經歷夏季的小型豬圈作為重點處理對象，搞好家畜、棚舍的環境衛生，采用該種方法降低動物圈的病毒帶入率，進而間接保護易感人群[10-12]。減少或規避被蚊蟲叮咬情況，杜絕戶外露宿，特殊情況下可以涂擦適量驅避劑或安置蚊帳，針對病患，應做到及時發現、隔離、治療，盡早傳出疫情報告。乙腦疫苗被認為是防控乙腦的最有效措施之一，其中0～10 歲兒童是乙腦疫苗的重點接種對象，建議在乙腦流行前1 個月完成該項工作。 針對兒童群體，家長在日常生活種要重視強化他們的身體素質，提升抗病能力。 另外，相關部門也要積極落實健康教育工作，普及乙腦的防病知識，盡早讓廣大農村地區住戶了解到該種疾病的預防措施，及時發現患者，早期隔離，及時診治，以將乙腦對人類健康形成的危害降至最低。