β-磷酸三鈣聯(lián)合聯(lián)合重組人血小板源性生長因子BB治療骨缺損療效的Meta分析＊

吾爾古麗·吐生江，周建業(yè)，劉澤文，鄭 欣，曹 忻，李志強，趙 霏

（1.西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州 730030；2.西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)部口腔醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州 730030）

骨缺損是一種口腔頜面外科中常見的疾病，主要包括上頜骨/下頜骨缺損和牙槽骨缺損。前者主要表現(xiàn)為腭裂、牙槽突裂等，后者是指牙槽骨結(jié)構(gòu)的不完整，包括三維方向上的骨結(jié)構(gòu)不連續(xù)，主要表現(xiàn)為骨開窗和骨開裂[1]。有研究[2-5]指出多種促進(jìn)和/或維持牙周再生的治療方法（如引導(dǎo)組織再生，根表面調(diào)節(jié)，使用牙釉質(zhì)基質(zhì)衍生物或富血小板血漿等）可以治療頜面骨缺損。目前治療熱點主要集中在異源性材料如β-磷酸三鈣 (β-tricalcium phosphate，β-TCP)的使用中[6]。磷酸鈣類材料的成分因和骨組織的無機成分類似，生物相容性好且具有骨傳導(dǎo)功能，已被廣泛應(yīng)用于骨科及口腔臨床實驗及部分臨床治療中[7]。有學(xué)者通過多孔β-TCP/膠原支架修復(fù)兔下頜牙槽骨，證實β-TCP 作為復(fù)合載體的優(yōu)良支架作用[6，8,9]。此外，有研究應(yīng)用重組人血小板源性生長因子BB（recombinant Platelet-derived growth factor BB，rhPDGF-BB）與β-TCP 制成的復(fù)合材料治療牙槽骨缺損，結(jié)果顯示聯(lián)合材料在新骨形成方面的療效優(yōu)于單獨應(yīng)用β-TCP[10-17]，但聯(lián)合材料的具體療效仍處于研究探討的階段。本研究將對應(yīng)用rhPDGF-BB 與β-TCP 復(fù)合材料對比單獨使用β-TCP 這一材料治療牙槽骨缺損的隨機臨床對照實驗（randomized controlled trial，RCT）進(jìn)行系統(tǒng)評價，以獲得該聯(lián)合材料在治療牙槽骨缺損方面的臨床證據(jù)。

1 資料和方法

1.1 文獻(xiàn)檢索策略

檢索PubMed、EMBASE、The Cochrane library、Web of sciences 數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫（CNKI)、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫（CBM)和維普數(shù)據(jù)庫中發(fā)表的文獻(xiàn)。β-TCP 的英文檢索詞為 ：“Beta tricalcium PhosPhate”“β -tricalcium PhosPhate”“β-TCP”，中文檢索詞為：“β-磷酸三鈣”“β-TCP”；重組人血小板源性生長因子的英文檢索詞為：“rhPDGF-BB”“Platelet-derived growth factor BB”“PDGF-BB”“Regranex”“recombinant Plateletderived growth factor BB”“rPDGF-BB”，中文檢索詞為：“重組人血小板源性生長因子”；頜骨和牙槽骨缺損的英文檢索詞為：“Alveolar Bone Loss”“Alveolar Process AtroPhy”“Alveolar ResorPtion”“Periodontal Bone Loss”“alveolar bone defect”“alveolar bone malformation”“jaw bone defect”“jaw bone loss”“jaw bone malformation”，中文檢索詞為：“頜骨缺損”“頜骨缺失”“頜骨畸形”“牙槽骨缺損”“牙槽骨缺失”、“牙槽骨畸形”，檢索策略為β-TCP、重組人血小板源性生長因子及骨缺損分開檢索，各檢索詞間用OR 連接，隨后三者的檢索結(jié)果用AND 進(jìn)行二次檢索。檢索日期均截止至2019 年7 月8 日，且檢索無時間和語種的限制。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

（1）有明確診斷標(biāo)準(zhǔn)的牙槽骨缺損和頜骨缺損的患者，如符合臨床探診、X 線片等對于骨缺損的診斷；（2）干預(yù)措施：實驗組采用β-TCP 與重組人血小板源性生長因子聯(lián)合治療，對照組單獨使用β-TCP治療；（3）治療療效相關(guān)的結(jié)局指標(biāo)：如臨床附著水平（clinical attachment level,CAL)、線性骨增益（linear bone growth,LBG)、骨填充率（bone filling percentage,BF%)、探診深度（pocket depth,PD)等；（4）臨床隨機對照實驗。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）患者的年齡、性別均不限，患者除牙槽骨缺損和頜骨缺損外伴隨其他疾病（如顱腦損傷）的文獻(xiàn)；（2）干預(yù)措施除重組人血小板源性生長因子（rhPDGF-BB)、β-TCP 外合并其他治療方法的文獻(xiàn)；（3）療效評價的指標(biāo)不明確或無法獲取的文獻(xiàn)；（4）重復(fù)研究或者重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)；（5）綜述、述評及會議論文等。文獻(xiàn)的篩選由兩位研究者獨立完成，對結(jié)果有分歧而難以確定時通過討論或由第三位研究者協(xié)助解決。

1.4 文獻(xiàn)篩選與資料提取

由2 位研究者獨立篩選文獻(xiàn)、提取資料并交叉核對，如遇分歧則討論或交由第三方協(xié)助解決。制定數(shù)據(jù)提取表提取資料，提取內(nèi)容主要包括：①納入研究的基本信息，包括研究題目、第一作者、發(fā)表雜志及時間、研究類型等；②研究對象的基本特征，包括性別、年齡等；③具體干預(yù)措施，包括：劑量、頻次、用藥方式、例數(shù)、觀察時間等；④相關(guān)結(jié)局指標(biāo)，包括：臨床附著水平（CAL）、線性骨增益（LBG）、骨填充率（BF%）、探診深度（PD）等；對于同一篇文獻(xiàn)中采用不同劑量進(jìn)行研究的情況，將同一劑量視為一組數(shù)據(jù)進(jìn)行提取，并對來源于同一篇文獻(xiàn)的不同劑量組的數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)注。

1.5 納入研究的偏倚風(fēng)險評價

采用Cochrane5.2.0 版手冊推薦的針對RCT 的偏倚風(fēng)險評估工具（ROB 工具）評價納入研究的偏倚風(fēng)險，包括選擇性偏倚、實施偏倚、測量偏倚、失訪偏倚、報告偏倚和其他偏倚。

1.6 統(tǒng)計分析

采用RevMan 5.3 軟件進(jìn)行Meta 分析。連續(xù)型資料采用均數(shù)差（MD）為效應(yīng)指標(biāo)，并同時給出95%可信區(qū)間(95%CI)。納入研究間的異質(zhì)性采用χ2檢驗進(jìn)行(檢驗水準(zhǔn)α=0.1)，同時結(jié)合I2進(jìn)行定量分析。根據(jù)I2值來判斷異質(zhì)性的大小，I2≤25%為低度異質(zhì)性，25%＜I2＜50%為中度異質(zhì)性，50%＜I2＜75%為較高異質(zhì)性，I2＞75%則為高度異質(zhì)性。若各研究結(jié)果間無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性，則采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta 分析；如果存在統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性，那么進(jìn)一步分析異質(zhì)性來源，若存在明顯的臨床異質(zhì)性采用亞組分析或敏感性分析（ITT 分析）等方法進(jìn)行處理，或僅進(jìn)行描述性分析。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果

初檢共獲得相關(guān)文獻(xiàn)81 篇，其中中文文獻(xiàn)0篇，英文文獻(xiàn)81 篇。排除綜述、動物實驗、重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)、療效評價指標(biāo)不明確的文獻(xiàn)，通過追蹤納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)、檢索Google 學(xué)術(shù)及手動查詢口腔專業(yè)期刊等補充檢索的方法獲得2 篇文獻(xiàn)，最終納入7 篇文獻(xiàn)[10-16]。所有納入文獻(xiàn)均為RCT。納入文獻(xiàn)中共有病例629 例，實驗組均采用β-TCP與rhPDGF-BB 聯(lián)合治療，對照組采用單獨的β-TCP 治療。文獻(xiàn)篩選流程如圖1 所示。

注：★所檢索的數(shù)據(jù)庫及檢出文獻(xiàn)數(shù)具體如下：PubMed（n=20）、EMbase（n=16）、The Cochrane Library（n=14）、CBM（n=0）、CNKI（n=0）、SCI（n=45）、WanFang Date（n=0）

2.2 納入研究的基本特征

納入研究的基本特征見表1，其中5 篇研究來源于美國，2 篇來源于印度；除了第7 篇，其余均為多中心研究；實驗組及對照組的基本情況基本一致，具有可比性。

表1 納入研究的基本信息

納入研究的具體用藥措施見表2，用藥方式均為以支架的形式手術(shù)植入；觀察時間6～36 個月不等；實驗組均為rhPDGF-BB 與β-TCP 聯(lián)合處理，其中5 篇研究中rhPDGF-BB 采用1.0mg/mL 及0.3mg/mL兩種劑量。

表2 納入研究的具體干預(yù)措施

3 偏倚風(fēng)險評價結(jié)果

7 篇納入研究的偏倚風(fēng)險評價結(jié)果顯示，隨機分組、分配隱藏均為“不確定”；盲法中3 篇均為“是”，5 篇為“不確定”，結(jié)果缺失數(shù)據(jù)中有2 篇“有失訪”，1 篇無失訪，4 篇為“不確定”;其他偏倚均為“不確定”（見表3）。應(yīng)用 ROB 工具判斷結(jié)果如圖2 所示。

表3 納入研究的偏倚風(fēng)險評價結(jié)果

圖2 7 篇納入研究的質(zhì)量評價結(jié)果

4 Meta 分析結(jié)果

4.1 探診深度（PD）

3 個RCT[10,15,17]報告了手術(shù)后6 個月的PD，其中有1 篇RCT[10]采用2 種不同劑量來進(jìn)行研究，共包括264 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后6 個月的PD 差異有統(tǒng)計學(xué)意義[MD=0.2,95%CI（0.15,0.25）,P＜0.000 01]。

1 個RCT [10] 報告了術(shù)后12 個月 [MD=0.26,95%CI（0.20,0.31),P＜0.000 01]、24 個月[MD=0.46,95%CI（0.38,0.54）,P＜0.000 01]、36 個月[MD=0.14,95%CI（0.05,0.22）,P=0.001]的PD，共包括720例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后6、12、24、36 個月的PD 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（如圖3 所示）。

圖3 β-TCP 聯(lián)合rhPDGF 治療骨缺損比較兩組探診深度的Meta 分析森林圖

4.2 臨床附著水平（CAL)

3 個RCT[10,11,15]報告了術(shù)后6 個月的CAL，其中有1 個RCT[10]采用兩種不同劑量來進(jìn)行研究，包括384 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損手術(shù)后6 個月的CAL 差異有統(tǒng)計學(xué)意義[MD MD=0.24,95%CI（0.21,0.28）,P＜0.000 01]。2 個RCT[10,11]報告了手術(shù)后12 個月的CAL,其中有1 個RCT[10]采用2 種不同劑量來進(jìn)行研究，包括300 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后12 個月的CAL 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 [MD=0.17,95%CI（0.12,0.22）,P＜0.000 01]。2 個RCT[10,11]報告了術(shù)后24 個月的CAL,其中有1 篇RCT[10]采用2 種不同劑量來進(jìn)行研究，包括300 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGFBB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后24 個月的CAL 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 [MD=0.47,95%CI（0.40,0.55）,P＜0.000 01]。

1 個RCT[10]報告了術(shù)后36 個月的CAL,使用了不同劑量的2 組數(shù)據(jù)，包括180 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后36 個月的CAL 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 [MD=0.35,95% CI（0.28,0.43）,P＜0.000 01]（如圖4 所示）。

圖4 β-TCP 聯(lián)合rhPDGF 治療骨缺損比較兩組臨床附著水平的Meta 分析森林圖

4.3 線性骨增益（LBG)

2 個RCT[10,12]報告了術(shù)后6 個月的LBG，每個RCT 均使用兩種不同劑量來進(jìn)行研究，包括411 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后6 個月的LBG 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 [MD=0.61,95%CI(0.55,0.67）,P＜0.000 01]。

1 個RCT[10]報告了術(shù)后12 個月 [MD=1.12,95%CI（1.06,1.18）,P ＜0.000 01]、24 個月 [MD=1.12,95%CI（1.06,1.18）,P＜0.000 01]、36 個月[MD=0.26,95%CI（0.19,0.34）,P ＜0.000 01]的LBG,包括540 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后12、24、36 個月的LBG 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（如圖5 所示）。

圖5 β-TCP 聯(lián)合rhPDGF 治療骨缺損比較兩組線性骨增益的Meta 分析森林圖

4.4 骨填充率(BF%)

3 個RCT[10,12,15]報告了手術(shù)后6 個月的BF，其中有2 個RCT[10,12]采用2 種不同劑量來進(jìn)行研究，包括440 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后6 個月的BF 差異有統(tǒng)計學(xué)意義 [MD=26.55,95%CI（25.21,27.89）,P ＜0.000 01]。

1 個RCT[10]報告了手術(shù)后12 個月[[MD=24.91,95%CI（23.49,26.32),P＜0.000 01]、24 個月 [MD=23.51,95%CI（22.07,24.94）,P＜0.000 01]、36 個月[MD=6.88,95%CI（5.57,8.19）,P＜0.000 01]的BF，包括540 例患者。固定效應(yīng)模型Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨采用β-TCP 治療牙槽骨缺損術(shù)后12、24、36 個月的BF 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（如圖6 所示）。

圖6 β-TCP 聯(lián)合rhPDGF 治療骨缺損比較兩組骨填充率的Meta 分析森林圖

5 討論

牙槽骨缺損可能引起牙周組織的病理性變化，同時也可能會影響牙齒移動的方式和生物力學(xué)機制，因而越來越引起正畸醫(yī)生的關(guān)注。近年來隨著生物材料學(xué)、分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的進(jìn)展,牙槽骨缺損的治療也有較大發(fā)展[17]，除翻瓣刮治術(shù)等傳統(tǒng)外科方法外，還有自體骨移植、局部應(yīng)用釉基質(zhì)蛋白和生長因子（如rhPDGF-BB 等）、應(yīng)用新型復(fù)合材料、膜引導(dǎo)組織再生等治療方法，其中以新型聯(lián)合材料較為有效，組織工程材料聯(lián)合治療骨缺損疾病已逐漸成為研究熱點。

Meta 分析結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB比較單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損在CAL、LBG、BF%、PD 等指標(biāo)上，在術(shù)后6 個月、12 個月、24 個月和36 個月上均有明顯改善,其中PD 和CAL在術(shù)后24 個月時療效最好，而LBG 和BF%則在術(shù)后6 個月時療效最好。根據(jù)時間分組的亞組分析結(jié)果顯示，在6 個月時的LBG 上，與β-TCP 組相比，rhPDGF-BB/β-TCP 組的應(yīng)答顯著增加，平均差異為1.58mm。另一篇研究結(jié)果提示[10]，12 個月和24 個月的隨訪時兩組間的平均LBG 差異保持穩(wěn)定，分別約為1.46mm 和1.51mm，但在36 個月時兩組間差異似乎減少到大約0.77mm。另外兩篇文獻(xiàn)也報道聯(lián)合治療6 個月和12 個月時，平均LBG 差異為1.21mm[15]和0.7mm[18]。同樣對BF%的Meta 分析也顯示，在隨訪6 個月時，采用rhPDGF-BB/β-TCP 治療組的BF%增加了34%。另一項研究結(jié)果顯示[10]，12 個月和24 個月的隨訪中兩組間BF%的差異保持相當(dāng)穩(wěn)定，分別為27.9%和26.8%，但36 個月時這一差異下降到大約11.5%。另2 篇文獻(xiàn)中也報道6 個月和12 個月時兩組BF%的差異為22.58%[15]和26.83%[18]。Meta 分析結(jié)果提示聯(lián)合rhPDGF-BB/β-TCP 治療骨缺損，在新骨形成（如線性骨增益和骨填充率）上具有優(yōu)勢，但具有時效性，隨著時間延長，此方面與單獨應(yīng)用β-TCP 的差異會降低。

對納入文獻(xiàn)的質(zhì)量進(jìn)行評價，隨機分組、分配隱藏均為“不確定”，所以選擇性偏倚均較大；只有3 篇納入研究提到有實施盲法，其余均為“不確定”；建議今后研究中予以重視。納入研究中觀察時間不一致，超過24 個月的只有兩篇，望今后的研究對于觀察時間更加統(tǒng)一、更加規(guī)范。

β-TCP 聯(lián)合rhPDGF-BB 與單獨使用β-TCP 治療牙槽骨缺損在大部分的有效性方面的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，但是采用了隨機效應(yīng)模型、亞組分析、敏感性分析后，meta 分析結(jié)果異質(zhì)性仍較大，可能原因有：①納入研究數(shù)和樣本量相對較小，效能相對不足，解讀結(jié)果應(yīng)謹(jǐn)慎；②納入研究文獻(xiàn)中，患者年齡上存在差異（患者＜40 歲有3 篇研究；患者30～40 歲間的有2 篇研究；其余兩篇未報道），可產(chǎn)生臨床異質(zhì)性；5 篇納入的RCT 研究中均報道采用兩種劑量（1.0mg/mL 和0.3mg/mL）進(jìn)行干預(yù)，雖然由于只有同一個對照組，因而作為2 組數(shù)據(jù)納入數(shù)據(jù)分析，但這也是造成異質(zhì)性較高的原因；納入研究的質(zhì)量普遍不高，其中選擇性偏倚的風(fēng)險較高。

綜上所述，當(dāng)前研究結(jié)果顯示，β-TCP 聯(lián)合rh-PDGF-BB 與單獨β-TCP 治療牙槽骨缺損相比，使用聯(lián)合治療牙槽骨缺損在新骨形成方面的有效性較高。但受納入研究數(shù)量和質(zhì)量的限制，上述結(jié)論尚待更多高質(zhì)量大樣本的研究進(jìn)一步予以驗證。此外，對于復(fù)合材料在舊骨降解、治療時效以及安全性等方面的研究也需要更多的RCT 來進(jìn)一步探討。