文/李惠芳,王紅梅
沙門菌又名沙門氏桿菌,是一種對(duì)外界環(huán)境有著較強(qiáng)適應(yīng)性的細(xì)菌,其通常在人和動(dòng)物的腸道中寄生,若是經(jīng)食物進(jìn)入人體,很快(一般在4~24分鐘左右)便會(huì)引起惡心嘔吐、腹痛腹瀉等癥狀,隨著病情的發(fā)展,患者還會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、脫水、休克等表現(xiàn),臨床若不及時(shí)治療,甚至可能危及患者生命[1]。為了控制患者的病情,減輕沙門菌帶來(lái)的影響,臨床需要加強(qiáng)對(duì)沙門菌感染的診斷。常規(guī)檢驗(yàn)過于簡(jiǎn)單,對(duì)沙門菌的檢驗(yàn)缺乏足夠的特異性、敏感性和準(zhǔn)確性,相比之下,特異性、敏感性和準(zhǔn)確性更高的全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)在沙門菌感染的診治上具有更高的價(jià)值[2]。本文選擇2020年3月~2021年3月期間收治的70例腸熱癥患者,試觀察常規(guī)檢驗(yàn)、全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)在沙門菌臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果。
選擇2020年3月~2021年3月期間收治的70例腸熱癥患者,以便利抽樣法分組,對(duì)照組35例,研究組35例。研究組:男24例,女11例;年齡29歲~69歲,平均(49.17±11.27)歲。對(duì)照組:男23例,女12例;年齡28歲~70歲,平均(49.21±11.19)歲。將平均年齡和男女性例數(shù)等納入組間對(duì)比,P>0.05,兩組之間可采取統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比。
入選標(biāo)準(zhǔn):(1)符合腸熱癥的診斷標(biāo)準(zhǔn):①有惡心嘔吐、水樣腹瀉等癥狀表現(xiàn),發(fā)作頻率為每日3~5次;②局灶性病變的白細(xì)胞計(jì)數(shù)可達(dá)(20~30)*109/L;③排泄物中可見黏液與血液,顯微鏡下可見白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增加[3]。(2)臨床資料完整;(3)近期未接受過治療;(4)均為疑似沙門菌所致感染;(5)患者對(duì)研究?jī)?nèi)容知情,且簽署自愿協(xié)議。
對(duì)照組給予常規(guī)檢驗(yàn),檢測(cè)試劑選擇超氧化物歧化酶、過氧化氫酶2種。研究組給予全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn),具體操作流程為:第一步,準(zhǔn)備好檢驗(yàn)的設(shè)備(天平、滅菌平皿、溫箱、顯微鏡及均質(zhì)器等)和材料(由HE瓊脂和亞硫酸鉍瓊脂等瓊脂制備成的培養(yǎng)基、由鎂C12孔雀綠增菌液和四硫酸鈉增菌液等增菌液制備成的試劑、接種棒、酒精燈、玻璃棒、鎳絡(luò)絲等)。第二步,根據(jù)患者的病情需要,為患者采集血液、骨髓液、尿液、嘔吐物、糞便等作為標(biāo)本,其中血液的采集時(shí)間應(yīng)為患者入院1周后,尿液和糞便的采集時(shí)間應(yīng)為患者入院2周后,骨髓液的采集時(shí)間應(yīng)為患者入院3周后,若患者出于急性發(fā)作期,為避免用藥影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)在患者用藥前采集尿液和糞便,且尿液需經(jīng)每分鐘3000轉(zhuǎn)的速率進(jìn)行離心處理,待沉淀后作為標(biāo)本接受檢驗(yàn)。若患者疑似為沙門菌導(dǎo)致的食物中毒,則應(yīng)采集其進(jìn)食的食物來(lái)進(jìn)行檢驗(yàn)。第三步,進(jìn)行鑒定,沙門氏菌大多屬于A~F群,可使用A~F多價(jià)O血清進(jìn)行凝集,待凝集工作全部完畢后進(jìn)行血清學(xué)檢驗(yàn)。凝集的過程中,先以A~F多價(jià)O血清凝集,并定群血清因子(即定群6個(gè)O群因子血清),再給予H因子血清相凝集,使第一相和第二相凝集,并將凝集結(jié)果作為判定血清型的標(biāo)準(zhǔn)。在全面生化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)將可疑群落先挑出來(lái),接種到三糖鐵瓊脂中,并觀察瓊脂中發(fā)生的反應(yīng)。若瓊脂出現(xiàn)斜面產(chǎn)酸,且同時(shí)存在硫化氫陰性菌株,則將其排除。需要注意的是,接種到三糖鐵瓊脂中時(shí),應(yīng)選取蛋白陳水,并將其接種到尿素瓊脂上,輔以拉氨酸脫羧酶等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),使周圍溫度在35℃~37℃之間,給予至少24小時(shí)的培養(yǎng)。
對(duì)比研究組(全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn))和對(duì)照組(常規(guī)檢驗(yàn))的陽(yáng)性檢出率。全面生化反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為:(1)陽(yáng)性:液面試劑呈紅色;(2)陰性:液面試劑呈黃色[4]。血清學(xué)檢驗(yàn)的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為:(1)陽(yáng)性:副傷寒沙門菌H凝集效價(jià)和傷寒沙門菌O凝集效價(jià)均不低于1:80,而H凝集效價(jià)不低于1:160;(2)陰性:未達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)[5]。
數(shù)據(jù)資料的處理均使用軟件SPSS-19.0,數(shù)據(jù)類型分為計(jì)數(shù)資料、計(jì)量資料兩類,表現(xiàn)形式分別為n(%)和(±s),檢驗(yàn)分別使用卡方值(x2)和t值。若P值在統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算后為<0.05,則組間對(duì)比有顯著性差異。
研究組的陽(yáng)性檢出率為97.14%,高于對(duì)照組71.43%的陽(yáng)性檢出率,統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比有明顯差異(P<0.05)。見表1。

表1 檢驗(yàn)結(jié)果的組間對(duì)比(n,%)
沙門菌是非常具有代表性的腸道致病菌,其在抗原的構(gòu)造與生化反應(yīng)上與革蘭氏陰性桿菌有著很高的相似度,是導(dǎo)致食物中毒的主要原因,人體在攝入存在沙門菌的食物后將會(huì)在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)一系列明顯的癥狀表現(xiàn),患者輕則嘔吐、腹瀉,重則脫水、休克,面臨生命危險(xiǎn)[6]。但是,以上癥狀并非是食物中毒所特有的表現(xiàn),且導(dǎo)致食物中毒的原因并非只有沙門菌感染,不同病因意味著治療方案存在很大的差異,故臨床需要明確患者的發(fā)病原因,而要實(shí)現(xiàn)對(duì)沙門菌感染的準(zhǔn)確診斷,則需要為其采取科學(xué)的檢驗(yàn)方法。沙門菌有多種類型,其中與人體疾病關(guān)系最為密切的類型是傷寒沙門菌,其余類型的沙門菌多與動(dòng)物經(jīng)有關(guān),原因是傷寒沙門菌的生存環(huán)境溫度在35~37℃左右,與人體溫度相近,因此在攝入含有傷寒沙門菌的食物后非常容易發(fā)嚴(yán)重食物中毒,故臨床檢驗(yàn)的沙門菌主要指?jìng)抽T菌[7]。傷寒沙門菌所引起的疾病主要是腸熱癥,本文以腸熱癥患者作為研究對(duì)象,為其進(jìn)行了沙門菌檢驗(yàn)。而從結(jié)果可知,采取全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)的研究組其沙門菌陽(yáng)性檢出率(97.14%)高于采取常規(guī)檢驗(yàn)的對(duì)照組(71.43%),可見全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)對(duì)沙門菌有非常高的診斷準(zhǔn)確性。而全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)之所以有如此顯著的應(yīng)用效果,原因主要是:沙門菌雖然是兼性厭氧菌,但也可在有氧和缺氧的環(huán)境中生存,當(dāng)其侵入到腸道后會(huì)在其中大量繁殖,于缺氧或有氧狀態(tài)下釋放出大量的毒素,誘導(dǎo)外膜蛋白、過氧化氫酶與超氧化物歧化酶等抗氧化酶過量表達(dá)(缺氧狀態(tài)下傷寒沙門菌的毒性要高于有氧狀態(tài)下),臨床可以通過常規(guī)檢驗(yàn)來(lái)測(cè)定超氧化物歧化酶、過氧化氫酶含量,進(jìn)而判斷患者是否發(fā)生沙門菌感染,但需要注意的是,常規(guī)檢驗(yàn)雖能檢驗(yàn)一定比例的沙門菌,但該方法易受到外界因素的影響,因此準(zhǔn)確性較為一般[8]。而全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)中的全面生化反應(yīng)試驗(yàn)主要是培養(yǎng)可疑的菌落再觀察液面顏色,血清學(xué)檢驗(yàn)則是凝集可疑菌落和抗體并觀察是否有顆粒沉淀,二者聯(lián)合不僅可以減少外界因素帶來(lái)的干擾,還可以顯著提高對(duì)沙門菌感染的陽(yáng)性檢出率,因此在沙門菌臨床檢驗(yàn)中有比常規(guī)檢驗(yàn)顯著得多的診斷準(zhǔn)確性;并且,全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)性高,這一點(diǎn)也提高了該方法在沙門菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值[9]。將本文中采取全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗(yàn)的研究組97.14%的陽(yáng)性檢出率與姜少霞[10]研究報(bào)告《全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗(yàn)在沙門菌臨床檢驗(yàn)中的作用分析》中同樣采取全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗(yàn)的研究組91.67%的陽(yáng)性率進(jìn)行對(duì)比,二者較為相近,可見本研究結(jié)果結(jié)論真實(shí)可靠。
最后,沙門菌檢驗(yàn)需要注意如下幾點(diǎn):(1)生化反應(yīng)主要檢驗(yàn)純培養(yǎng)物,若血清學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性但生化試驗(yàn)結(jié)果為陰性,則要純化接種物再進(jìn)行檢驗(yàn);(2)無(wú)論采取哪種檢驗(yàn)方法,沙門菌的分離菌與陽(yáng)性對(duì)照菌均有可能對(duì)周圍環(huán)境造成一定污染,在進(jìn)行菌株分離、增菌和血清凝集的過程中,必須要做好器具的清洗和消毒工作、對(duì)檢驗(yàn)人員的保護(hù)工作,以免病菌擴(kuò)散,引發(fā)感染。
相較于常規(guī)檢驗(yàn),在沙門菌臨床檢驗(yàn)中的全面生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗(yàn)具有更高的診斷準(zhǔn)確性,其臨床應(yīng)用價(jià)值更高,故應(yīng)該被更積極地推廣開來(lái)。