化學發光免疫分析法檢測乙肝病毒感染性標志物的臨床應用分析

葉婷玉

摘要：目的：探究乙肝病毒感染性標志物檢測中施行化學發光免疫分析法檢測的效果。方法：參與此次研究的研究對象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。對上述患者分別采取化學發光免疫分析法檢測（CLIA）以及酶聯免疫吸附法檢測（HBeAg）。對比兩種方法的檢測結果。結果：由研究結果數據上可見，酶聯免疫吸附法與化學發光免疫分析法的HBeAb陽性檢出率比較差異不具備統計學含義（P>0.05）。化學發光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽性檢出率相比較酶聯免疫吸附法較高（P<0.05）。結論：在乙肝病毒感染性標志物檢測中采取化學發光免疫分析法，具有較高的敏感度，其檢測準確度較高，有助于乙肝患者的治療，在乙肝病毒感染性標志物檢測中具有重要意義。

關鍵詞：化學發光免疫分析法;乙肝病毒;感染性標志物;敏感度

乙型肝炎病毒的傳播路徑較為廣泛﹐同時具備較高的感染率，當患者感染此種病毒后，可伴隨時間逐步進展為急性肝炎以及慢性肝炎，病情較為嚴重的患者可產生肝硬化等疾病，對患者的身心健康產生較大的危害。若能夠及時診斷出乙肝病毒有無感染，經治療對患者的痛苦進行緩解，且能減少傳染率[1]。當前，臨床上對于乙肝診斷常采取酶聯免疫吸附法檢測法，能夠對乙肝病毒感染性標志物予以定性分析，但不能準確定量。化學發光免疫分析法較好地結合了化學發光反應以及免疫反應，靈敏度高，能夠較快定量分析，可對酶聯免疫吸附法存在的缺陷予以彌補。為此，參與此次研究的研究對象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。探究乙肝病毒感染性標志物檢測中施行化學發光免疫分析法檢測的效果。研究結果詳見下文。

1資料與方法

1.1 基礎資料

參與此次研究的研究對象為乙肝患者，均在2020年2月～2021年2月期間收入本院接受診治，共60例。上述研究對象男女占比為35：25;年齡在23～67歲，平均年齡（54.32±3.25）歲。上述研究對象均滿足此次研究所設定的納入標準。本研究經倫理審核標準通過。

1.1.1 納入標準

（1）患者經病理診斷后滿足乙肝疾病相關指證;（2）患者對本次研究目的知悉，且自愿參與到此次研究;（3）患者基礎資料缺失。

1.1.2 排除標準

（1）患有器官功能性障礙疾病，以及感染性疾病和凝血功能障礙等;（2）患有精神類疾病，以及存在認知能力障礙者;（3）患者基礎資料缺失，中途退出研究者。

1.2 方法

1.2.1 設備儀器

本次研究所使用的離心機設備型號為SV-II，為山東博科科學儀器有限公司生產;全自動酶免分析儀型號為Bosal，為上海通達生物科技有限公司生產;化學發光法檢測儀型號為HISCL-5000，為日本希森美康公司生產。

1.2.2 試劑

酶聯免疫吸附法試劑盒：HBsAg（生產廠家：艾康生物技術（杭州）有限公司;批準文號：國食藥監械（準）字2010第3400516號;規格：條型單人份包裝：50人份/盒;條型筒裝：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生產廠家：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司﹐批準文號：國食藥監械（準）字2014第3401095號;規格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。）;HBeAb（生產廠家：深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司，批準文號：國食藥監械（準）字2013第3400473號（變更批件）;規格：100測試/盒），HBsAb（生產廠家：艾康生物技術（杭州）有限公司;批準文號：國食藥監械（準）字2010第3400379號;規格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒），HBcAb（湖北中保龍醫藥有限公司;批準文號：生產廠家：蘇械注準20152401292;規格：48/96T）;化學發光免疫分析法檢測試劑盒：HBsAg（生產廠家：艾康生物技術（杭州）有限公司;批準文號：國食藥監械（準）字2010第3400516號;規格：條型單人份包裝：50人份/盒;條型筒裝：100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBeAg（生產廠家：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司﹐批準文號：國食藥監械（準）字2014第3401095號;規格：2×50人份/盒、2×100人份/盒。） HBeAb（生產廠家：深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司，批準文號：國食藥監械（準）字2013第3400473號（變更批件）;規格：100測試/盒）;HBsAb（生產廠家：艾康生物技術（杭州）有限公司;批準文號：國食藥監械（準）字2010第3400379號;規格：50人份/盒、100人份/盒（25人份/筒×4筒）;HBcAb（生產廠家：湖北中保龍醫藥有限公司;批準文號：蘇械注準20152401292;規格：48/96T）。

1.2.3 檢測方法

采集患者清晨空腹靜脈血，進行離心處理（3500 rpm，時間：15分鐘）獲得血清。

（1）酶聯免疫吸附法：使用相關試劑盒和酶標儀予以檢測，操作人員需要嚴格依照試劑盒使用說明和酶標儀操作方法進行相關檢測﹐測定指標為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

（2）化學發光免疫分析法：使用相關試劑盒予以檢測，操作人員需要嚴格依照試劑盒使用說明進行相應操作，測定指標為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

1.3 療效標準

對比兩種方法的檢測結果。（1）酶聯免疫吸附法陽性判定標準：檢測值≥上限參考值;HBsAg參考值0.2 ng/ml;HBsAb參考值10.0 mlU/ml;HBeAg參考值0.05 NCU/ml;HBeAb參考值2.0 NCU/ml;HBcAb參考值為1.5 NCU/ml。（2）化學發光免疫分析法的陽性判定標準：測定值≥上限參考值，測定參考值與酶聯免疫吸附法相同。

1.4 統計學方法

研究所得到的數據均采用SPSS 23.0軟件進行處理，（±s）用于表示計量資料，用t檢驗;（%）用于表示計數資料，用χ2檢驗。當所計算出的P<0.05時則提示進行對比的對象之間存在顯著差異。

2結果

在60例患者中，采取酶聯免疫吸附法檢測HBsAg 陽性為40例，占比為66.67%;HBsAb陽性22例，占比為36.67%;HBeAg陽性為50例，占比為83.33%;HBeAb陽性為57例，占比為95.00% ;HBcAb陽性為45例，占比為75.00%。化學發光免疫分析法檢測HBsAg 陽性為50例，占比為83.33%;HBsAb陽性33例，占比為55.00%;HBeAg陽性58例，占比為96.67%;HBeAb陽性59例，占比為98.33%;HBcAb陽性53例，占比為88.33%。χ2檢驗值：HBsAg（χ2=44.44，P=0.035）、HBsAb（χ2=4.062，P=0.044）、HBeAg（χ2=5.926，P=0.015）、HBeAb（χ2=0.209，P=0.648）、HBcAb（χ2=3.562，P=0.048）。由此可見，酶聯免疫吸附法與化學發光免疫分析法的HBeAb陽性檢出率比較差異不具備統計學含義（P>0.05）。化學發光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽性檢出率相比較酶聯免疫吸附法較高（P<0.05）。

3討論

臨床上常見的乙肝病毒感染檢測指標分別為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb五項，能夠較好地表達患者體內乙肝病毒水平和機體反應情況。上述檢測指標可分為定性以及定量，定性檢查則是明確指標的陰、陽性結果，而定量檢查則是上述指標的精確數值。上述指標在乙肝患者診斷、治療中具有重要的作用，有助于醫生為患者制定治療方法。

酶聯免疫吸附法屬于一種定性法，其原理是經試劑使抗原、抗體結合某種固相載體表面，且保持其免疫活性，促使抗原、抗體和某種酶連接為酶標抗原以及抗體，能夠保留免疫活性以及酶的活性。化學發光免疫分析法囊括兩個部分，分別為免疫反應系統以及化學發光分析系統。其中化學發光分析系統則是經化學發光物質經催化劑的催化以及氧化劑氧化，產生激發態中間體。此種激發態中間體處于穩定基態期間可發射出光子，經發光信號對儀器測量光量子產額進行測量。免疫反應系統則是將發光物質直接在抗原、抗體上予以標記，以及酶作用在發光底物。由于反應原理不同，所以具備不同靈敏度以及檢測限。出來上述差別，兩種方法檢測過程也存在差異。酶聯免疫吸附法需要進行手動加樣、明確孵育時間和手動洗板等，這就受到操作人員手法不同影響，引起結果存在差異[2]。本次研究結果中，酶聯免疫吸附法與化學發光免疫分析法的HBeAb陽性檢出率比較差異不具備統計學含義（P>0.05）。化學發光免疫分析法HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb陽性檢出率相比較酶聯免疫吸附法較高（P<0.05）。結果可見化學發光免疫分析法的檢測效果優于酶聯免疫吸附法。

綜上所述，化學發光免疫分析法具有較高的敏感度，檢測準確度較高，有助于乙肝患者的治療，在乙肝病毒感染性標志物檢測中具有重要意義。

參考文獻

[1]黃光豪.酶聯免疫吸附試驗和電化學發光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原結果的比較[J].醫學食療與健康，2020，18（6）：2.

[2]李丹.乙肝病毒血清學檢驗中化學發光免疫分析技術與酶聯免疫吸附試驗檢驗效果對比分析[J].醫藥前沿，2020，10（1）：2.