糞便鈣衛(wèi)蛋白聯(lián)合血清學(xué)抗體檢測診斷炎癥性腸病的臨床應(yīng)用價(jià)值

高丹，王科峰，盧麗萍

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科；2.泌尿外科，沈陽 110004）

炎癥性腸病（inflammatory bowel disease，IBD）是一類主要累及消化道的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和克羅恩病（Crohn disease，CD）。IBD的病因及發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，其診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查、內(nèi)鏡和組織病理學(xué)檢查［1-2］。近年來，IBD的實(shí)驗(yàn)室檢查取得了較大的進(jìn)展，可以通過某些生物標(biāo)志物輔助IBD的診斷與鑒別診斷、疾病活動(dòng)度的評估、治療應(yīng)答以及預(yù)測復(fù)發(fā)［3-4］。這些生物標(biāo)志物主要有糞便鈣衛(wèi)蛋白（fecal calprotectin，F(xiàn)C）及慢性IBD抗體，包括抗胰腺腺泡抗體（antipancreatic antibody，PAB）、抗釀酒酵母抗體（antisaccharomyces cerevisiae antibody，ASCA）、抗小腸杯狀細(xì)胞抗體（anti-intestinal goblet cell antibody，GAB）、核周型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibodies，pANCA）等。本 研究擬對FC和慢性IBD抗體在腸道疾病中的檢測結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，并對其在IBD診斷中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

選擇2019年3月至2020年3月中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院消化內(nèi)科收治的腸道疾病患者106例，年齡14～84歲，男62例，女44例，以病理及腸鏡檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)分為UC組（n=64）和CD組（n=42）。另選擇同期健康體檢者（n=30）作為對照組（均無遺傳性家族病史、自身免疫性疾病及腹痛、腹瀉等臨床癥狀）。UC組和CD組患者均符合IBD診斷與治療的共識意見［1］，并排除嚴(yán)重心、肝、腎疾病等。

1.2 方法

1.2.1 糞便標(biāo)本采集：在腸鏡檢查口服清腸藥前3 d內(nèi)留取清晨第1次排便的標(biāo)本［5-6］。嚴(yán)格按照鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒（膠體金法）（珠海市醫(yī)友生物科技有限公司）說明書進(jìn)行糞便標(biāo)本采樣，用試劑盒標(biāo)本處理管中的采樣棒采取約15 mg的固體糞便標(biāo)本至1.5 mL稀釋液中；若為液體標(biāo)本，則用微量移液器移取15 μL糞便標(biāo)本至1.5 mL稀釋液中。盡量保證不同標(biāo)本糞便取樣量一致。檢測標(biāo)本時(shí)嚴(yán)格按照說明書操作，保證每份標(biāo)本滴加的樣本液和結(jié)果判讀的時(shí)間均一致。由2名檢驗(yàn)主管技師同時(shí)進(jìn)行結(jié)果判讀，以保證結(jié)果的一致性。

1.2.2 血液樣本采集：清晨采集患者空腹靜脈血3～4 mL，置于真空促凝管中，離心5 min（3 500 r/min）。采用慢性IBD抗體檢測試劑盒（間接免疫熒光法）（德國歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司）體外定性檢測人血清中IgA和IgG型PAB、ASCA、GAB 和pANCA。嚴(yán)格按照說明書操作，由2名檢驗(yàn)主管技師同時(shí)進(jìn)行結(jié)果判讀，以保證結(jié)果的一致性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計(jì)算曲線下面積（area under curve，AUC）。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組患者中IgA和IgG型PAB、ASCA、GAB、pANCA及FC的陽性比例分布

UC組FC陽性率與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；CD組FC、PAB-IgG、ASCA-IgG、GAB-IgG陽性率與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表1。

表1 各組患者FC、PAB、ASCA、GAB和pANCA的陽性檢測結(jié)果［n（%）］Tab.1 The positive results of FC，PAB，ASCA，GAB and pANCA in each group ［n（%）］

2.2 各組中FC、慢性IBD抗體陽性檢測結(jié)果

4種慢性IBD抗體中1項(xiàng)為陽性則判定為慢性IBD抗體檢測陽性。本研究結(jié)果顯示，UC、CD組FC、慢性IBD抗體及聯(lián)合檢測陽性率與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）；各組FC、慢性IBD抗體聯(lián)合檢測陽性率高于2項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測。其中，UC組FC、慢性IBD抗體聯(lián)合檢測陽性率與慢性IBD抗體單獨(dú)檢測比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表2。

表2 各組FC和慢性IBD抗體陽性檢測結(jié)果［n（%）］Tab.2 The positive results of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in each group ［n（%）］

2.3 FC、慢性IBD抗體診斷IBD準(zhǔn)確性比較

以腸鏡及病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，其他腸道疾病組為對照，繪制FC、慢性IBD抗體診斷IBD的ROC曲線。結(jié)果顯示，F(xiàn)C、慢性IBD抗體、FC聯(lián)合慢性IBD抗體的AUC分別為0.859、0.583、0.828；95%CI分別為0.790～0.929，0.478～0.688，0.738～0.917。提示FC診斷IBD準(zhǔn)確性更高。見圖1。

圖1 FC、慢性IBD抗體診斷炎癥性腸病ROC曲線Fig.1 ROC curve of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in the diagnosis of inflammatory bowel disease

2.4 FC、慢性IBD抗體IBD診斷效能分析

聯(lián)合檢測FC與慢性IBD抗體，其中1項(xiàng)陽性即判定為陽性。結(jié)果顯示，F(xiàn)C聯(lián)合慢性IBD抗體檢測的靈敏度和陰性預(yù)測值高于2項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測；FC單獨(dú)檢測特異性和陽性預(yù)測值高于慢性IBD抗體單獨(dú)檢測及FC聯(lián)合慢性IBD抗體檢測。見表3。

表3 FC和慢性IBD抗體檢測診斷炎癥性腸病的效能評價(jià)（%）Tab.3 Efficacy evaluation of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in the diagnosis of inflammatory bowel disease（%）

3 討論

目前，診斷IBD主要依據(jù)臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡檢查、組織病理學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室和放射學(xué)檢查等，且還需排除其他原因引起的腸道炎癥疾病。但內(nèi)鏡屬于有創(chuàng)檢查，患者的心理負(fù)擔(dān)較重，接受性較差，而且當(dāng)患者的臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡和病理學(xué)特征不典型時(shí)會(huì)更加難以診斷［7］。因此，臨床上需要非侵入性、準(zhǔn)確客觀的方法對IBD患者進(jìn)行診斷。近年來，IBD的實(shí)驗(yàn)室檢查取得了很大進(jìn)展，且實(shí)驗(yàn)室檢查具有客觀、方便、侵入性低等優(yōu)點(diǎn)，在IBD的診斷方面有很高的價(jià)值。

FC主要存在于中性粒細(xì)胞，也存在于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞等。在腸道發(fā)生炎癥時(shí)，由于腸黏膜滲透性增加，使中性粒細(xì)胞滲透并釋放鈣衛(wèi)蛋白，在糞便中可檢測到鈣衛(wèi)蛋白，因此，F(xiàn)C與腸道炎癥相關(guān)［8］。同時(shí)，F(xiàn)C與IBD的篩選、監(jiān)測和預(yù)測疾病復(fù)發(fā)有關(guān)［9］。本研究顯示，在IBD中，F(xiàn)C陽性率大于慢性IBD抗體，F(xiàn)C可用于鑒別IBD與非IBD［10］。pANCA是核周型抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體，可見于20%～80%的UC患者和5%～25%的CD患者［11-14］。ASCA則是抗釀酒酵母抗體，是最早被發(fā)現(xiàn)的IBD自生抗體，可見于22%～71%的CD患者和0%～14%UC患者［12-14］，在疾病的緩解期，ASCA仍可以作為CD炎癥表現(xiàn)的生物學(xué)標(biāo)志物［15］。PACA是抗胰腺腺泡抗體，它在CD中的陽性率明顯高于UC，特異度高達(dá)96%～98%，說明可作為診斷CD的特異性血清學(xué)指標(biāo)［13-14］。本研究中，pANCA（IgG+IgA）陽性見于20%的UC患者和7%的CD患者；ASCA（IgG+IgA）陽性見于26%的CD患者和3%的UC患者，與其他研究結(jié)論一致。本研究結(jié)果提示慢性IBD抗體中，PACA、ASCA與CD相關(guān)，可用于鑒別UC；pANCA在UC中的表達(dá)高于CD，為UC特異性抗體，與文獻(xiàn)［16］報(bào)道一致。

FC與慢性IBD抗體聯(lián)合檢測對于IBD與非IBD胃腸道疾病的鑒別具有重要意義［16］。本研究中，各組患者FC與慢性IBD抗體聯(lián)合檢測陽性率高于2項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測，提高了檢測的靈敏度。根據(jù)診斷IBD的ROC曲線，F(xiàn)C、慢性IBD抗體、FC+慢性IBD抗體的AUC分別為0.859、0.583、0.828，表明FC和FC+慢 性IBD抗體檢測對IBD診斷均有一定價(jià)值，但FC單獨(dú)檢測對IBD診斷準(zhǔn)確性更高。

在IBD診斷效能方面，單獨(dú)檢測FC對IBD診斷特異性可達(dá)91.7%，適合用來鑒別IBD與非IBD，與慢性IBD抗體聯(lián)合檢測可以提高檢測的敏感性，因此，F(xiàn)C聯(lián)合慢性IBD抗體檢測在IBD的診斷中具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。