化學發光免疫測定技術在甲狀腺腫瘤檢驗中的價值探討

文/陳茜璐，陳玥，蘇風雪

甲狀腺腫瘤是起源于甲狀腺濾泡細胞的腫瘤，也是人類頭頸部最常見的腫瘤疾病之一，分為良性、惡性兩種[1]。其中，前者以甲狀腺腺瘤為主，后者即為人們熟知的甲狀腺癌。臨床資料顯示，本病多發生于40歲以下的女性患者，臨床主要表現為甲狀腺孤立性或多發性結節，并可隨著吞咽上下移動。甲狀腺瘤的病因及發病機制極其復雜，至今尚未完全探明。因此，不同類型甲狀腺瘤的病因是不同的，即使在同一類型中，也可能存在異質性。總體而言，臨床目前尚缺乏基于病因治療本病的有效方式，主要遵循早期及長期、積極而理性、綜合治療等原則治療。甲狀腺瘤是可以治愈的，良性腫瘤的治療周期約為3～6個月；惡性腫瘤則需長期治療。為盡早確認甲狀腺瘤患者的疾病類型，并及時給予針對性治療，要求臨床診斷的精確程度必須盡可能地提高。化學發光免疫測定技術（chemiluminescence immunoassay，CLIA），又稱為化學發光標記免疫測定，是指用化學發光劑對抗原或抗體進行直接標記，并與待測標本中相應的抗體、抗原等進行反應，在磁場的作用下，將處于結合狀態（沉淀部分）和游離狀態的化學發光劑標記物分離開來，之后加入發光促進劑進行光反應，通過監測發光強度，對標本中的某種物質進行定量、定性檢測的方法。為探究CLIA應用于甲狀腺腫瘤疾病時的效果，特開展本研究，現梳理研究過程，作如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料綜述

科室界定：長江航運總醫院內分泌科；時間限定：2020年3月—2021年3月；分析對象選定：80例甲狀腺腫瘤疾病患者。

納入標準：（1）出現甲狀腺結節、頸淋巴結腫大、心悸等癥狀，經血清、超聲、同位素掃描、甲狀腺淋巴造影、頸部X線等檢測，懷疑為甲狀腺瘤者；（2）思維意識清晰，能夠與長江航運總醫院醫護人員正常交流；（3）具備基礎的醫學常識，聽從醫護人員指引并積極配合；（4）自愿簽署知情同意書的患者；（5）長江航運總醫院醫倫理委員會對本研究進行多次審核，認定不違反倫理道德，予以批準。

排除標準：（1）脖頸、下頜等處存在嚴重皮膚病、灼傷，或是受到嚴重機械性損傷的患者；（2）思維意識缺失，無法與長江航運總醫院醫護人員有效交流的患者；（3）合并其他腫瘤疾病的患者；（4）病歷資料完善程度不符合本研究要求的患者。

80例患者的一般資料如下：男性女性分別為比33∶47例，年齡26～55歲，平均（41.34±4.65）歲。

1.2 研究方法簡析

采集所有患者的靜脈血，行化學發光免疫檢測。具體流程：

（1）化學發光免疫檢測。①靜脈血標本采集。叮囑患者在采血日前日全天禁止食用高油膩、高蛋白食物，且不應飲酒；夜晚20：00后禁食，可適量飲用清水（飲水量控制在200～300mL之間）；采血日清晨7:30左右前來醫院，在空腹狀態下抽取約5mL的靜脈血。將血液標本放置于離心設備中，調整轉數參數為每分鐘4000轉，進行持續10min的離心處理。之后收取上層血清待檢（若無法即時檢測，應放置于4℃的冰箱中冷藏保管，且最大持續時間不得超過24h）。②化學發光免疫測定設備選擇：雅培全自動免疫分析儀architect2000sr，特點為：①條碼閱讀器：試劑轉盤，樣品放置軌道和樣品運行軌道；②上機數據保存在硬盤中；③操作模式分為隨機和連續模式，可進行優先放置；④分樣能力；機械精密度并可探測凝塊；⑤質量控制：levy-Jennings圖和Westgard規則；⑥檢測原理：化學發光微粒子免疫分析技術（CMIA）；⑦測試速度：200測試/h，無前處理時，29min得到第1個結果；有前處理時，36～43min出第1個結果。

（2）“金標準”為病理檢測結果，在研究組成員收集的臨床病歷數據中均有清晰記錄。

1.3 觀察指標界定

（1）比對兩種檢測方式下，甲狀腺腫瘤疾病的陽性檢出情況（甲狀腺球蛋白含量＞40μg/L）；

（2）比對兩種檢測對甲狀腺腫瘤疾病的診斷效能。主要指標包含特異度（真陰性/[假陽性+真陰性]、敏感度[真陽性/（真陽性+假陰性]、準確度[(真陽性+真陰性）/總數]、約登指數（敏感度與特異度之和，在此基礎上減固定參數“1”）。

1.4 統計學分析

所有數據均納入SPSS23.0統計學軟件進行分析。其中，針對計量資料行“t”檢驗，所有結果均以“±s”的形式予以呈現；針對計數資料行“x2”檢驗，相關結果以“n（%）”的形式呈現；當P＜0.05時，表明比對項差異具有統計學意義[2]。

2 結果

2.1 兩種檢測方式下甲狀腺腫瘤疾病陽性檢出情況對比

臨床病歷數據顯示，80例患者甲狀腺瘤陽性檢出率為46.25%，盡管高于化學發光免疫檢測的38.75%（假陰性、假陽性例數均為2例，分別占比2.50%），但兩種檢測方式的差異并不明顯，P＞0.05。見表1。

表1 兩種檢測方式甲狀腺瘤疾病陽性檢出情況對比（例）

2.2 化學發光檢測方式下甲狀腺腫瘤疾病診斷效能結果

化學發光免疫檢測下，特異度為45/（2+45）=95.74%；敏感度為31/（31+2）=93.94%；準確度為（31+45）/80=95.00%；約登指數為95.74%+93.94%-100%=89.68%。

3 綜合討論

病理檢測是檢查機體器官、組織、細胞中病理改變的病理形態學方法，主要圍繞所發生的病變，探討其產生原因、發病機理、病變的發生及發展過程，最后做出病理診斷。將此種檢測方法應用于甲狀腺腫瘤等疾病的診斷時，能夠精確判定腫瘤細胞的類型、組織來源、性質、范圍等，準確率幾乎達到100%，故可為臨床診斷和治療提供極其精確的依據。因此，此種檢測方法被視為臨床檢測的“金標準（當前臨床醫學界公認的診斷疾病最可靠的方法）”。本研究收集的臨床病歷數據均為病理檢測結果。

化學發光免疫測定技術是一種將具有高靈敏度的化學發光測定技術與具備高特異性的免疫反應檢測技術相結合后，以各類抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素、藥物成分作為檢測對象的一種新型免疫測定分析技術[3]。該技術的原理為：分為免疫反應系統和化學發光分析系統兩大部分。其中，前者是指將發光物質（通常指在反應劑的激發下，能夠生成“激發態”的中間體）直接標記在相應的抗原、抗體之上，作用于發光底物。后者是指利用化學發光物質，在催化劑的催化和氧化作用下，形成一個激發態的中間體。當該中間體從激發態逐漸回歸到穩定的基態狀態時，會發射出光子（同時帶有光信號）[4]。通過特定的發光信號測量儀器，對此類光信號進行收集及測量、計算，最后可得出與目標檢測物的含量。但化學發光免疫測定技術的先天劣勢在于，基于此種檢測方式得出的檢測結果只具備輔助診斷價值，不能作為唯一的疾病診斷憑據。原因在于：使用化學發光免疫測定技術診斷患者是否患有某種疾病時，必須選定幾種目標抗體、抗原、酶等物質，通過測量這些物質的含量，與標準值（正常人人體內的含量）進行對比，進而判定“可能”為何種疾病。如本研究開展期間選擇的甲狀腺球蛋白，正常值應＜40μg/L，如果檢測結果顯示甲狀腺球蛋白含量高于40μg/L，可確定患者患有甲狀腺疾病，但具體的種類則無法判定（如甲狀腺功能亢進、毒性結節性甲狀腺腫、亞急性甲狀腺炎、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎等均會導致甲狀腺球蛋白含量超過正常值）。由此可見，基于化學發光免疫測定技術的檢測方式盡管在診斷準確率方面正日漸提升，但依然存在誤診、漏診的可能性。本研究結果顯示，80例患者甲狀腺瘤陽性檢出率為46.25%，盡管高于化學發光免疫檢測的38.75%。從該結果可以看出，兩種檢測結果存在一定的差異（但并不明顯，P＞0.05）。而在特異度、敏感度、準確度、約登指數等方面，化學發光免疫檢測的相關水平均不低。總之，此種檢測方式可作為臨床診斷甲狀腺腫瘤疾病的一種常用方法，但卻不能作為唯一的方法。至少在現階段，只能作為一種快速檢測方法，最終結果還需取決于臨床病歷數據（病理檢測結果）。