化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)在甲狀腺腫瘤檢驗(yàn)中的價(jià)值探討

文/陳茜璐，陳玥，蘇風(fēng)雪

甲狀腺腫瘤是起源于甲狀腺濾泡細(xì)胞的腫瘤，也是人類頭頸部最常見的腫瘤疾病之一，分為良性、惡性兩種[1]。其中，前者以甲狀腺腺瘤為主，后者即為人們熟知的甲狀腺癌。臨床資料顯示，本病多發(fā)生于40歲以下的女性患者，臨床主要表現(xiàn)為甲狀腺孤立性或多發(fā)性結(jié)節(jié)，并可隨著吞咽上下移動(dòng)。甲狀腺瘤的病因及發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，至今尚未完全探明。因此，不同類型甲狀腺瘤的病因是不同的，即使在同一類型中，也可能存在異質(zhì)性。總體而言，臨床目前尚缺乏基于病因治療本病的有效方式，主要遵循早期及長(zhǎng)期、積極而理性、綜合治療等原則治療。甲狀腺瘤是可以治愈的，良性腫瘤的治療周期約為3～6個(gè)月；惡性腫瘤則需長(zhǎng)期治療。為盡早確認(rèn)甲狀腺瘤患者的疾病類型，并及時(shí)給予針對(duì)性治療，要求臨床診斷的精確程度必須盡可能地提高。化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)（chemiluminescence immunoassay，CLIA），又稱為化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測(cè)定，是指用化學(xué)發(fā)光劑對(duì)抗原或抗體進(jìn)行直接標(biāo)記，并與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗體、抗原等進(jìn)行反應(yīng)，在磁場(chǎng)的作用下，將處于結(jié)合狀態(tài)（沉淀部分）和游離狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑標(biāo)記物分離開來，之后加入發(fā)光促進(jìn)劑進(jìn)行光反應(yīng)，通過監(jiān)測(cè)發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)標(biāo)本中的某種物質(zhì)進(jìn)行定量、定性檢測(cè)的方法。為探究CLIA應(yīng)用于甲狀腺腫瘤疾病時(shí)的效果，特開展本研究，現(xiàn)梳理研究過程，作如下報(bào)告。

1 資料與方法

1.1 一般資料綜述

科室界定：長(zhǎng)江航運(yùn)總醫(yī)院內(nèi)分泌科；時(shí)間限定：2020年3月—2021年3月；分析對(duì)象選定：80例甲狀腺腫瘤疾病患者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）出現(xiàn)甲狀腺結(jié)節(jié)、頸淋巴結(jié)腫大、心悸等癥狀，經(jīng)血清、超聲、同位素掃描、甲狀腺淋巴造影、頸部X線等檢測(cè)，懷疑為甲狀腺瘤者；（2）思維意識(shí)清晰，能夠與長(zhǎng)江航運(yùn)總醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員正常交流；（3）具備基礎(chǔ)的醫(yī)學(xué)常識(shí)，聽從醫(yī)護(hù)人員指引并積極配合；（4）自愿簽署知情同意書的患者；（5）長(zhǎng)江航運(yùn)總醫(yī)院醫(yī)倫理委員會(huì)對(duì)本研究進(jìn)行多次審核，認(rèn)定不違反倫理道德，予以批準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）脖頸、下頜等處存在嚴(yán)重皮膚病、灼傷，或是受到嚴(yán)重機(jī)械性損傷的患者；（2）思維意識(shí)缺失，無法與長(zhǎng)江航運(yùn)總醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員有效交流的患者；（3）合并其他腫瘤疾病的患者；（4）病歷資料完善程度不符合本研究要求的患者。

80例患者的一般資料如下：男性女性分別為比33∶47例，年齡26～55歲，平均（41.34±4.65）歲。

1.2 研究方法簡(jiǎn)析

采集所有患者的靜脈血，行化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)。具體流程：

（1）化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)。①靜脈血標(biāo)本采集。叮囑患者在采血日前日全天禁止食用高油膩、高蛋白食物，且不應(yīng)飲酒；夜晚20：00后禁食，可適量飲用清水（飲水量控制在200～300mL之間）；采血日清晨7:30左右前來醫(yī)院，在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取約5mL的靜脈血。將血液標(biāo)本放置于離心設(shè)備中，調(diào)整轉(zhuǎn)數(shù)參數(shù)為每分鐘4000轉(zhuǎn)，進(jìn)行持續(xù)10min的離心處理。之后收取上層血清待檢（若無法即時(shí)檢測(cè)，應(yīng)放置于4℃的冰箱中冷藏保管，且最大持續(xù)時(shí)間不得超過24h）。②化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定設(shè)備選擇：雅培全自動(dòng)免疫分析儀architect2000sr，特點(diǎn)為：①條碼閱讀器：試劑轉(zhuǎn)盤，樣品放置軌道和樣品運(yùn)行軌道；②上機(jī)數(shù)據(jù)保存在硬盤中；③操作模式分為隨機(jī)和連續(xù)模式，可進(jìn)行優(yōu)先放置；④分樣能力；機(jī)械精密度并可探測(cè)凝塊；⑤質(zhì)量控制：levy-Jennings圖和Westgard規(guī)則；⑥檢測(cè)原理：化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析技術(shù)（CMIA）；⑦測(cè)試速度：200測(cè)試/h，無前處理時(shí)，29min得到第1個(gè)結(jié)果；有前處理時(shí)，36～43min出第1個(gè)結(jié)果。

（2）“金標(biāo)準(zhǔn)”為病理檢測(cè)結(jié)果，在研究組成員收集的臨床病歷數(shù)據(jù)中均有清晰記錄。

1.3 觀察指標(biāo)界定

（1）比對(duì)兩種檢測(cè)方式下，甲狀腺腫瘤疾病的陽(yáng)性檢出情況（甲狀腺球蛋白含量＞40μg/L）；

（2）比對(duì)兩種檢測(cè)對(duì)甲狀腺腫瘤疾病的診斷效能。主要指標(biāo)包含特異度（真陰性/[假陽(yáng)性+真陰性]、敏感度[真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性]、準(zhǔn)確度[(真陽(yáng)性+真陰性）/總數(shù)]、約登指數(shù)（敏感度與特異度之和，在此基礎(chǔ)上減固定參數(shù)“1”）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)均納入SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。其中，針對(duì)計(jì)量資料行“t”檢驗(yàn)，所有結(jié)果均以“±s”的形式予以呈現(xiàn)；針對(duì)計(jì)數(shù)資料行“x2”檢驗(yàn)，相關(guān)結(jié)果以“n（%）”的形式呈現(xiàn)；當(dāng)P＜0.05時(shí)，表明比對(duì)項(xiàng)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[2]。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方式下甲狀腺腫瘤疾病陽(yáng)性檢出情況對(duì)比

臨床病歷數(shù)據(jù)顯示，80例患者甲狀腺瘤陽(yáng)性檢出率為46.25%，盡管高于化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)的38.75%（假陰性、假陽(yáng)性例數(shù)均為2例，分別占比2.50%），但兩種檢測(cè)方式的差異并不明顯，P＞0.05。見表1。

表1 兩種檢測(cè)方式甲狀腺瘤疾病陽(yáng)性檢出情況對(duì)比（例）

2.2 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方式下甲狀腺腫瘤疾病診斷效能結(jié)果

化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)下，特異度為45/（2+45）=95.74%；敏感度為31/（31+2）=93.94%；準(zhǔn)確度為（31+45）/80=95.00%；約登指數(shù)為95.74%+93.94%-100%=89.68%。

3 綜合討論

病理檢測(cè)是檢查機(jī)體器官、組織、細(xì)胞中病理改變的病理形態(tài)學(xué)方法，主要圍繞所發(fā)生的病變，探討其產(chǎn)生原因、發(fā)病機(jī)理、病變的發(fā)生及發(fā)展過程，最后做出病理診斷。將此種檢測(cè)方法應(yīng)用于甲狀腺腫瘤等疾病的診斷時(shí)，能夠精確判定腫瘤細(xì)胞的類型、組織來源、性質(zhì)、范圍等，準(zhǔn)確率幾乎達(dá)到100%，故可為臨床診斷和治療提供極其精確的依據(jù)。因此，此種檢測(cè)方法被視為臨床檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)（當(dāng)前臨床醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的診斷疾病最可靠的方法）”。本研究收集的臨床病歷數(shù)據(jù)均為病理檢測(cè)結(jié)果。

化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)是一種將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與具備高特異性的免疫反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合后，以各類抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素、藥物成分作為檢測(cè)對(duì)象的一種新型免疫測(cè)定分析技術(shù)[3]。該技術(shù)的原理為：分為免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)兩大部分。其中，前者是指將發(fā)光物質(zhì)（通常指在反應(yīng)劑的激發(fā)下，能夠生成“激發(fā)態(tài)”的中間體）直接標(biāo)記在相應(yīng)的抗原、抗體之上，作用于發(fā)光底物。后者是指利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，在催化劑的催化和氧化作用下，形成一個(gè)激發(fā)態(tài)的中間體。當(dāng)該中間體從激發(fā)態(tài)逐漸回歸到穩(wěn)定的基態(tài)狀態(tài)時(shí)，會(huì)發(fā)射出光子（同時(shí)帶有光信號(hào)）[4]。通過特定的發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x器，對(duì)此類光信號(hào)進(jìn)行收集及測(cè)量、計(jì)算，最后可得出與目標(biāo)檢測(cè)物的含量。但化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)的先天劣勢(shì)在于，基于此種檢測(cè)方式得出的檢測(cè)結(jié)果只具備輔助診斷價(jià)值，不能作為唯一的疾病診斷憑據(jù)。原因在于：使用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)診斷患者是否患有某種疾病時(shí)，必須選定幾種目標(biāo)抗體、抗原、酶等物質(zhì)，通過測(cè)量這些物質(zhì)的含量，與標(biāo)準(zhǔn)值（正常人人體內(nèi)的含量）進(jìn)行對(duì)比，進(jìn)而判定“可能”為何種疾病。如本研究開展期間選擇的甲狀腺球蛋白，正常值應(yīng)＜40μg/L，如果檢測(cè)結(jié)果顯示甲狀腺球蛋白含量高于40μg/L，可確定患者患有甲狀腺疾病，但具體的種類則無法判定（如甲狀腺功能亢進(jìn)、毒性結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、亞急性甲狀腺炎、慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎等均會(huì)導(dǎo)致甲狀腺球蛋白含量超過正常值）。由此可見，基于化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)的檢測(cè)方式盡管在診斷準(zhǔn)確率方面正日漸提升，但依然存在誤診、漏診的可能性。本研究結(jié)果顯示，80例患者甲狀腺瘤陽(yáng)性檢出率為46.25%，盡管高于化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)的38.75%。從該結(jié)果可以看出，兩種檢測(cè)結(jié)果存在一定的差異（但并不明顯，P＞0.05）。而在特異度、敏感度、準(zhǔn)確度、約登指數(shù)等方面，化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)的相關(guān)水平均不低。總之，此種檢測(cè)方式可作為臨床診斷甲狀腺腫瘤疾病的一種常用方法，但卻不能作為唯一的方法。至少在現(xiàn)階段，只能作為一種快速檢測(cè)方法，最終結(jié)果還需取決于臨床病歷數(shù)據(jù)（病理檢測(cè)結(jié)果）。