無創DNA檢測在產前篩查唐氏綜合征中的準確性探討

文/申時龍，陸勁

唐氏綜合征是一種由染色體數目異常導致的缺陷性疾病，使得嬰幼兒出生后身體及智力水平低下，影響人口素質。隨著我國醫療技術的不斷發展，唐氏綜合征的發生率顯著下降，但其仍是不可避免的，由于該疾病涉及到基因，患兒出生后再治療基本無效。因此，產前檢查是預防本病的常見手段。醫學界一直在尋找更為安全有效的診斷方式，無創DNA作為產前診斷的一種，通過檢測母體外周血，對胎兒游離的DNA進行檢測及分析，檢測其染色體有無異常情況，以便臨床及時作出反應[2]。本次研究我院在提取胎兒游離DNA，對其行無創DNA檢測，探討無創DNA檢測的準確性，具體研究內容如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

收集2020年1月至2020年12月時間段來我院行在產前篩查唐氏綜合征篩查的895例孕婦的外周血，產婦經過B超檢查確認為宮內單活胎。年齡21 ~40歲，平均年齡（28.22±4.04）歲；采血時妊娠周期12~24周，平均孕周（18.11±2.20）周。35歲以上妊娠246例，35歲以下妊娠的649例。

1.2 診斷方法

1.2.1 無創DNA檢測

采用EDTA抗凝管取孕婦外周血8~10ml，將其置于4℃環境中保存，采集后72h內分離其血漿，在4℃環境下低速離心12分鐘，再高速離心10分鐘，置于-70℃環境中，采用核酸提取cff DNA，嚴格按照實際說明書操作，采用Qubit定量儀進行質控后，將樣本置于-70℃環境中保存。采用生物信息學分析法篩查胎兒染色體非整倍體的風險，篩查出高危孕產婦。試劑盒由北京貝瑞和康生物技術有限公司提供，采用貝瑞NextSeqCN500測序儀，基于邊合成邊測序技術(Sequencing-By-Synthesis,SBS)的新型測序方法，通過利用單分子陣列實現在小型芯片(Flow Cell)上進行橋式PCR反應，通過可逆阻斷技術可以實現每次只合成一個堿基，并標記熒光基團，利用相應的激光激發熒光基團，捕獲激發光，從而讀取堿基信息。

1.2.2 染色體核型分析

無創DNA檢測結果為高風險的產婦，行羊水穿刺術，在超聲診斷的引導下，取孕18~24周產婦的羊水20ml，對其羊水細胞進行培養、制片，然后根據人類細胞遺傳學國際命名體制標準對其進行染色體核型分析，以此診斷結果為金標準。

2 結果

2.1 無創DNA檢測高風險結果

895例患者中無創DNA檢測染色體非整倍體高風險3例，高風險篩查率0.03%，其中21-三體檢出2例，檢出率0.22%；18-三體檢出1例，檢出率0.11%；詳見表1。

表1 無創DNA檢測高風險結果

2.2 羊膜穿刺檢測結果及跟蹤隨訪結果

羊膜穿刺檢測結果顯示3例21-三體檢出2例，18-三,1例。3例確診的產婦進行門診咨詢或電話隨訪，最終選擇終止妊娠，其他孕婦進行結局隨訪，未發現漏檢情況。無創DNA診斷唐氏綜合征的準確率為100%。

3 討論

唐氏綜合征的主要特征為21號染色體多一條染色體，作為一種遺傳性疾病，患兒會出現身體發育遲緩及智力低下的情況，喪失生活自理能力，降低出生人口質量的同時，增加家庭及社會的負擔。針對已經出生的唐氏綜合征患兒，臨床尚無有效的治療措施，因此，產前篩查顯得尤為重要，可提高疾病新生人口治療提供科學依據及數據支持[3]。

為預防新生兒缺陷，我國近十年來在此方面下了很大功夫，血清學篩查是臨床常用的篩查方式，但由于人體較為復雜，較多因素會影響產檢結果，且孕婦體質特殊，導致診斷結果易出現假陽性現象，影響疾病檢出正確率。羊水穿刺術是其中最為精準的監測方式，但其存在一定風險，如增加對胎兒的損傷，甚至增加產婦宮內感染及流產等情況的發生，且此種方式需要較長時間得出診斷結果，不利于疾病早期診斷。研究顯示，胎兒在母體內發育需要通過臍帶不斷吸收母體營養，此過程中胎兒的遺傳物質可在孕期特定時間及分娩后短期存在于母體，無創DNA檢測利用上述機理，在臨床得以推廣，通過抽取母體外周血，工作人員提取胎兒的遺傳物質，并通過基因檢測技術，獲取胎兒的染色體信息，了解其染色體數目有無異常情況。此種診斷方式不會給胎兒及孕婦帶來損傷，且近年來文獻報道，其診斷準確率極高[6]，具有無創及敏感度高的優點。本次研究結果顯示，895例患者中無創DNA檢測染色體非整倍體高風險3例，高風險篩查率0.03%，其中21-三體檢出2例，檢出率0.22%；18-三體檢出1例，檢出率0.11%；胎兒經過羊水穿刺得以證實，21-三體檢出2例，18-三體檢出1例，診斷唐氏綜合征的準確率為100%。

綜上所述，無創DNA作為一種產前篩查工具，可用于唐氏綜合征的初步篩查中，但對于存在高危風險的孕婦，還需要進一步行羊水穿刺術確診[4-7]。