80例胃癌患者腹水常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查分析

劉超群， 韓 東， 徐 健

（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬金華中醫(yī)院檢驗科，浙江 金華 321017；2.海軍軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院實驗診斷科，上海 200433）

惡性腹水中多見胃腸道腫瘤細(xì)胞，胃癌的病理分型較多，細(xì)胞形態(tài)較復(fù)雜，國內(nèi)文獻(xiàn)多以病理科角度進(jìn)行報道，檢驗科多側(cè)重腫瘤標(biāo)志物[1]等的研究，有關(guān)胃癌腹水常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究較少。本研究收集80例經(jīng)病理科確診的胃癌患者，分析其腹水常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點，提高檢驗人員認(rèn)知能力，為臨床診療提供有價值的診斷信息。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2012年1月—2017年4月海軍軍醫(yī)大學(xué)附屬長海醫(yī)院和浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬金華中醫(yī)院經(jīng)病理診斷為胃癌的患者80例，其中男35例、女45例，年齡22～88歲；組織病理學(xué)類型為中分化腺癌3例（3.75%）、中-低分化腺癌8例（10.00%）、低分化腺癌35例（43.75%）、低分化腺癌伴部分印戒細(xì)胞癌16例（20.00%）、印戒細(xì)胞癌14例（17.50%）、低分化黏液性腺癌2例（2.50%）、低分化腺癌伴部分未分化癌1例（1.25%）、局部腺上皮高級內(nèi)瘤伴癌變1例（1.25%）；病變部位中，胃體33例（41.25%）、胃竇角43例（53.75%）、賁門胃底3例（3.75%）、全胃1例（1.25%）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采用腹水常規(guī)檢查專用乙二胺四乙酸二鉀抗凝管留取10 mL腹水標(biāo)本并送檢。

1.2.2 細(xì)胞計數(shù) 將腹水標(biāo)本混勻充入計數(shù)池，靜置2 min，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。血性腹水或含大量細(xì)胞數(shù)的樣本應(yīng)進(jìn)行稀釋（100倍）或使用帶有體液模式的血液分析儀進(jìn)行計數(shù)。

1.2.3 細(xì)胞分類 將留取的標(biāo)本500×g離心5 min，棄上清液吸取沉淀物制片，采用改良推片法[2]制備6張涂片，其中無尾厚片、有尾厚片、有尾薄片各2張。采用改良瑞-吉染色法[2]進(jìn)行染色，干燥后用油鏡進(jìn)行細(xì)胞分類。

1.2.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 由經(jīng)驗豐富的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗人員在普通光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察。

2 結(jié)果

2.1 常規(guī)檢查結(jié)果

80例胃癌患者中，有核細(xì)胞數(shù)>500×106/L的有52例（65.0%），其中中性粒細(xì)胞>50%且淋巴細(xì)胞≤50%的有7例、中性粒細(xì)胞≤50%且淋巴細(xì)胞>50%的有28例、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞均≤50%的有17例；有核細(xì)胞數(shù)為（300～500）×106/L的有10例（12.5%），其中淋巴細(xì)胞>50%的有6例、淋巴細(xì)胞≤50%的有4例；有核細(xì)胞數(shù)＜300×106/L的有18例（22.5%）。

2.2 異常細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果

參考病理診斷結(jié)果，重點觀察35例低分化腺癌，發(fā)現(xiàn)鏡下低分化腺癌細(xì)胞體積較小；有花邊狀突起，胞質(zhì)較少，著色不均，核較大，核染色質(zhì)粗糙不均，核仁清楚，呈單個、散在分布，或成團(tuán)分布，如開窗樣、柵欄樣、鑲嵌狀等。見圖1和圖2。

圖1 低分化腺癌細(xì)胞胞體呈花邊狀突起，開窗樣排列（瑞-吉染色，×1 000）

圖2 低分化腺癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有大小不一的空泡（瑞-吉染色，×1 000）

3 討論

多數(shù)胃癌患者缺乏特異性消化道癥狀，早期胃癌無消化道癥狀占42.2%[3]。進(jìn)展期胃癌常以腹痛、厭食、黑便和貧血為臨床表現(xiàn)，當(dāng)癥狀明顯時，多已進(jìn)入晚期。有不少病例以腹水為首發(fā)表現(xiàn)[4]。腹水常規(guī)及形態(tài)學(xué)檢查在二級及以上醫(yī)院檢驗科均有開展，該檢查對臨床診斷、治療及預(yù)后評估有重要價值，但關(guān)于胃癌患者腹水常規(guī)形態(tài)學(xué)檢查分析報道較少。

世界衛(wèi)生組織以組織學(xué)來源及其異型性為基礎(chǔ)，將胃癌分為乳頭狀腺癌、管狀腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌、鱗腺癌、未分化癌和不能分類的癌[5]。本研究收集的80例胃癌患者腹水中均可查見癌細(xì)胞，其中低分化腺癌細(xì)胞所占比例最高，印戒細(xì)胞癌細(xì)胞次之，提示分化程度差的腺癌或惡性程度高的胃癌細(xì)胞易在腹水中被檢出[6]；病變部位以胃竇角居多，胃體病變次之，這與其他文獻(xiàn)報道[7]較一致。異常細(xì)胞中以低分化腺癌細(xì)胞多見，其形態(tài)學(xué)特征[8]表現(xiàn)為細(xì)胞體積較小；胞體有花邊狀突起，胞質(zhì)較少，著色不均，邊緣深染，內(nèi)有大小不一的空泡；核較大，偏位或居中，核染色質(zhì)粗糙不均、濃聚，核仁清楚；呈單個、散在分布，或成團(tuán)分布，如開窗樣、柵欄樣、鑲嵌狀等。低分化腺癌細(xì)胞易與間皮細(xì)胞混淆，但有一定區(qū)別。（1）胞質(zhì)著色，內(nèi)涵物：低分化腺癌細(xì)胞胞質(zhì)著色不均，邊緣著色很深，內(nèi)有大小不等的空泡。（2）核染色質(zhì)：低分化腺癌細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙不均，核仁清楚。（3）細(xì)胞排列分布：低分化腺癌細(xì)胞除了單個、散在分布，還有其他排列方式。除了易與間皮細(xì)胞混淆外，低分化腺癌細(xì)胞與其他的小細(xì)胞性腫瘤細(xì)胞（如淋巴瘤細(xì)胞、小細(xì)胞癌細(xì)胞，低分化鱗癌細(xì)胞等）形態(tài)上也有相似點，檢驗人員應(yīng)高度重視，加強(qiáng)對比分析。

腹水常規(guī)檢查中，有核細(xì)胞數(shù)>500×106/L，以中性粒細(xì)胞（>50%）為主，提示有細(xì)菌性腹膜炎[9]。本研究80例胃癌患者中有7例除了腹水中查見癌細(xì)胞，還可能有細(xì)菌性腹膜炎，需引起臨床注意，應(yīng)結(jié)合細(xì)菌培養(yǎng)、藥敏結(jié)果，積極給予抗感染治療。有核細(xì)胞數(shù)>300×106/L，以淋巴細(xì)胞（>50%）為主的有34例，胸/腹水中淋巴比例增高主要見于慢性炎癥、結(jié)核、腫瘤等疾病[10]。腫瘤細(xì)胞浸潤腹腔，體內(nèi)啟動免疫應(yīng)答，淋巴細(xì)胞比例會增高。常規(guī)檢查可為臨床提供有價值的信息。

總之，腹水常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是一種重要的臨床檢驗手段，為臨床診斷、治療等提供重要的實驗室依據(jù)，尤其是細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，難度大、價值也大，檢驗人員應(yīng)綜合其他相關(guān)檢查，不斷積累經(jīng)驗，提高認(rèn)識和技能，以減少漏診和誤診。